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如何挑選好的胎牛血清：好的胎牛血清是實驗的成功的前提是所有實驗人做細胞培養(yǎng)的共識，如何挑選好的胎牛血清，可以從以下幾個方面著手。1.外觀，好的血清應是透明清亮，土黃色或棕黃色，無沉淀或極少沉淀，比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁，不透明，含許多沉淀物，說明血清污染或血清...

如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?未拆封的血清，一般情況下應存放于-10℃至-20℃，在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用，若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi)，再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使...

胎牛血清：胎牛血清是通過母牛剖腹產(chǎn)胎牛心臟密閉穿刺采的血獲得的新鮮胎牛全血，經(jīng)自然層析、離心后收集得到去除血細胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體，后經(jīng)生產(chǎn)使用多級高置流膜過濾技術(shù)和三級0.1μm終端微濾方法處理后，常用于細胞培養(yǎng)相關(guān)實驗。胎牛血清是細胞培養(yǎng)...

將胎牛血清與培養(yǎng)基混合。在混合之前，需要將培養(yǎng)基預先加熱至37攝氏度，并將胎牛血清緩慢加入培養(yǎng)基中，同時輕輕攪拌，以確保均勻混合?；旌虾蟮呐囵B(yǎng)基應立即使用，避免長時間存放。較后，進行細胞培養(yǎng)。將混合后的培養(yǎng)基加入培養(yǎng)皿中，然后將細胞懸浮液加入培養(yǎng)基中。將培養(yǎng)皿...

胎牛血清中的成分和含量可能因批次而異。胎牛血清中含有多種生物活性物質(zhì)，如生長因子、激的素和細胞黏附蛋白等，這些物質(zhì)對細胞的生長和分化起著重要作用。然而，由于胎牛血清的生產(chǎn)過程中的變異性，不同批次之間這些成分的含量可能存在差異。這可能導致在使用不同批次的胎牛血清...

冷凍電鏡技術(shù)原理之單顆粒技術(shù)：對分散分布的生物大分子分別成像，基于分子結(jié)構(gòu)同一性的假設，對多個圖像進行統(tǒng)計分析，并通過對正、加和平均等圖像操作手段提高信噪比，進一步確認二維圖像之間的空間投影關(guān)系后經(jīng)過三維重構(gòu)獲得生物大分子的三維結(jié)構(gòu)方法。其適合的樣品分子量范圍...

單顆粒冷凍電鏡技術(shù)二維圖像分析——顆粒圖像的匹配與分類：二維顆粒圖像的分類是獲取三維結(jié)構(gòu)過程的第一步。對二維圖像的分析包括兩部分：顆粒圖像的匹配和顆粒圖像的分類。匹配的過程通常會對顆粒圖像應用一些變換操作，通過關(guān)聯(lián)函數(shù)去判斷不同顆粒圖像之間的相似程度。圖像匹配...

冷凍電子顯微鏡技術(shù)步驟之圖像采集：冷凍的樣品通過專門的設備一冷凍輸送器轉(zhuǎn)移到電鏡的樣品室。在照相之前，必須觀察樣品中的水是否處于玻璃態(tài)，如果不是則應重新制備樣品。由于生物樣品對高能電子的輻射敏感，照相時必須使用較小曝光技術(shù)。經(jīng)過透射電子顯微鏡中一系列復雜的過程...

單顆粒冷凍電鏡技術(shù)二維圖像分析——顆粒圖像的匹配與分類：二維顆粒圖像的分類是獲取三維結(jié)構(gòu)過程的第一步。對二維圖像的分析包括兩部分：顆粒圖像的匹配和顆粒圖像的分類。匹配的過程通常會對顆粒圖像應用一些變換操作，通過關(guān)聯(lián)函數(shù)去判斷不同顆粒圖像之間的相似程度。圖像匹配...

冷凍電子顯微鏡技術(shù)中單顆粒重構(gòu)技術(shù)：該技術(shù)也叫做單顆粒分析，主要適用于結(jié)構(gòu)具有全同性的生物大分子的結(jié)構(gòu)解析，蛋白質(zhì)的分子量通常要求在100KD以上，在顆粒數(shù)目足夠多的情況下，理論上其分辨率可以達到原子水平。該方法的圖像處理和三維重構(gòu)計算過程如下:從原始的電鏡照...

冷凍電鏡技術(shù)原理之電子斷層掃描成像技術(shù)：通過在顯微鏡內(nèi)傾轉(zhuǎn)樣品從而收集樣品多角度的電子顯微圖像并對這些電子顯微圖像根據(jù)傾轉(zhuǎn)幾何關(guān)系進行重構(gòu)的方法稱為電子斷層掃描成像技術(shù)。該方法主要應用于細胞及亞細胞器，以及沒有固定結(jié)構(gòu)的生物大分子復合物(分子量范圍為800kD...

冷凍電子顯微技術(shù)學解析生物大分子及細胞結(jié)構(gòu)的中心是透射電子顯微鏡成像,包括樣品制備、圖像采集、圖像處理及三維重構(gòu)等幾個基本步驟。三維重構(gòu)：數(shù)據(jù)處理的較終目的是為了獲得生物樣品的三維質(zhì)量密度圖，由二維圖像推知三維結(jié)構(gòu)的方法即三維重構(gòu)。其理論原理是在1968年由D...

冷凍電子顯微技術(shù)主要包括單顆粒冷凍電鏡技術(shù)和冷凍電子斷層掃描技術(shù)。單顆粒冷凍電鏡技術(shù)首先捕獲大量隨機分布的同一種生物樣品的二維圖像，然后通過圖像處理算法解析其三維結(jié)構(gòu)。近年來，隨著冷凍電鏡設備和計算機軟硬件的快速發(fā)展，特別是隨著直接電子探測器在冷凍電鏡中的應用...

單顆粒冷凍電鏡技術(shù)的顆粒挑選：接下來需要從原始數(shù)據(jù)中篩選出顆粒投影，也被稱為“顆粒挑選”，顆粒挑選的好壞也將影響所有后續(xù)的分析和處理過程，是一個重要并且繁瑣的步驟。顆粒挑選方式可以分為手動挑選、半自動挑選和完全自動挑選這幾種。在早期的分析中，對于結(jié)構(gòu)的了解還非...

血清中絮狀沉淀，它們是什么，怎么處理?1.將冷凍保存的血清取出后，置4℃冰箱靜止過夜；2.待血清融化后，上下顛倒，輕輕混勻，繼續(xù)4℃2-3小時；3.輕輕吸取上層血清，分裝，余底下50ml左右；4.低速離心5分鐘，去掉沉淀。若解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該怎么處...

胎牛血清要求：1、性狀、外觀：淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量：3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量：≤0.02%(w/v)。4、無菌檢驗：陰性。5、支原體檢驗：陰性。6、細菌內(nèi)的毒性：≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒：陰性。8...

如何區(qū)別真假胎牛血清：外觀，拿到血清，較先接觸的是血清外觀，對于缺少細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說，外觀的判斷尤為重要，顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色，我國的細胞培養(yǎng)用血清標準是不高于20mg/dl，實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響，...

胎牛血清對細胞貼壁中的作用：在細胞培養(yǎng)時，大部分來自實體組織感官的細胞會貼壁。它們在機體內(nèi)時，也是與其他細胞或者細胞外基質(zhì)結(jié)合的，貼壁對維持細胞的良好形態(tài)和促進細胞的增殖有益處。有人培養(yǎng)許旺細胞，發(fā)現(xiàn)貼壁良好的細胞，其增殖率也較高。人的造血干細胞培養(yǎng)，更是需要...

胎牛血清要求：1、性狀、外觀：淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量：3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量：≤0.02%(w/v)。4、無菌檢驗：陰性。5、支原體檢驗：陰性。6、細菌內(nèi)的毒性：≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒：陰性。8...

胎牛血清制備：離心，將準備好的瓶放入離心套筒調(diào)好平衡后，對稱放入離心機，按1800轉(zhuǎn)/分鐘離心50分鐘后，放入4℃冷庫備用。抽血清，取出4℃冷庫離心好的瓶，注意輕抬輕放，以免將下層血塊和血清混層。將經(jīng)過高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接...

胎牛血清制備：用止血鉗夾住血管，切開1厘米左右的切口進行插管，插好管后打開血管的止血鉗，讓牛血順采的血管流入另一個潔凈房間內(nèi)的瓶中。采的血瓶采的血前經(jīng)干烤滅菌（180℃2小時）后，按無菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口，于采的血前半小時放入3...

胎牛血清如何采取?在牛屠宰過程中，如發(fā)現(xiàn)母牛懷孕，就應立即將生殖系統(tǒng)從尸體中分離出來，在無菌條件下從子宮中取出小牛，進行臍帶打結(jié)處理，清理羊水并消毒。在胎兒兩肋之間直接插入一根針頭到心臟，在真空的條件下，血液通過導管被抽入無菌的血液收集袋內(nèi)。在沒有真空泵時，也...

胎牛血清融化方法：只要2.5個小時，溫和有效地加快了水融化的速度，另一方面，融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子，讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時間，而且較大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。血清融化過程中，蛋白質(zhì)會比水先融化。冰塊底部亮亮的細絲就是融化中的蛋白，血...

胎牛血清對細胞貼壁中的作用：在細胞培養(yǎng)時，大部分來自實體組織感官的細胞會貼壁。它們在機體內(nèi)時，也是與其他細胞或者細胞外基質(zhì)結(jié)合的，貼壁對維持細胞的良好形態(tài)和促進細胞的增殖有益處。有人培養(yǎng)許旺細胞，發(fā)現(xiàn)貼壁良好的細胞，其增殖率也較高。人的造血干細胞培養(yǎng)，更是需要...

胎牛血清：胎牛血清(FBS)，胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量...

胎牛血清的生產(chǎn)工藝：胎牛血清適合脈沖示蹤實驗（同位素標記研究細胞代謝）適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選，避免外源小分子對細胞產(chǎn)生干擾。透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎上進行加工的。胎牛血清在無菌條件下要經(jīng)過0.1微米膜三重過濾，要進行一系列的檢測，包括理化性質(zhì)檢查（如滲透...

如何區(qū)別真假胎牛血清：1、血紅蛋白，標準為不高于20mg/dl，顏色越紅，數(shù)值越高，反之，數(shù)值越低。2、pH，國產(chǎn)血清，大多高于7.5，進口胎牛血清，大多低于7.5，具體原因未知，可能和牛齡有關(guān)，這也能用來初步鑒別血清的來源。3、微生物。包括細菌、霉菌、支原體...

胎牛血清制備：用止血鉗夾住血管，切開1厘米左右的切口進行插管，插好管后打開血管的止血鉗，讓牛血順采的血管流入另一個潔凈房間內(nèi)的瓶中。采的血瓶采的血前經(jīng)干烤滅菌（180℃2小時）后，按無菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口，于采的血前半小時放入3...

胎牛血清的意義：胎牛血清是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血，豐富的生長發(fā)育因子，胎牛血清非常適合各種細胞的培養(yǎng)，胎牛血清是細胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基，胎牛血清起到為細胞提供營養(yǎng)、支持、保護的作用。好的的胎牛血清是讓細胞“快樂成長”的必備營養(yǎng)物，但劣質(zhì)的胎牛血清...

胎牛血清中沉淀物該如何處理?胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但較普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但少量這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。所有胎牛...