那么如何保障胎牛血清的品質(zhì)呢:內(nèi)有毒的,內(nèi)有毒的含量越低的血清,胎牛血清級別就越高:內(nèi)有毒的≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;10EU/ml<內(nèi)有毒的≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;內(nèi)有毒的≥ 25EU/ml時,此血清為標準級胎牛血清;應(yīng)選...
添加胎牛血清的時候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因為如果培養(yǎng)液有沉淀的存在,會使得其中培養(yǎng)的細胞產(chǎn)生大量的黑點,除此之外,細胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會極其不利于細胞的正常生長。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清...
血清的保存應(yīng)該注意:血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點"。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。有些沉淀物在顯微...
如何挑選適合細胞生長的血清?原代或是正常細胞株建議使用BI特級胎牛血清,對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用所用特級胎牛血清,或胚胎干細胞所用胎牛血清。由于血清有批間差異,細胞種類不同,我們建議客戶購買前可先申請試用樣品,通過篩選得到滿意的血清批號,之后根據(jù)項...
膜片鉗技術(shù)與其他生物檢測技術(shù)的結(jié)合應(yīng)用:1.膜片鉗與光學(xué)顯微成像技術(shù)結(jié)合應(yīng)用:利用激光掃描共聚焦顯微鏡、雙光子顯微鏡、熒光顯微鏡等技術(shù)可以對細胞進行實時成像研究,將膜片鉗技術(shù)與光學(xué)顯微成像技術(shù)結(jié)合使用不但可以檢測細胞的電流變化情況,而且還可以對細胞的電信號傳遞...
膜片鉗技術(shù)是通過微玻管電極(膜片電極或膜片吸管)接觸細胞膜,用千兆歐姆以上的阻抗使之封接,在電學(xué)上分隔和電極尖開口處相接的細胞膜的小區(qū)域(膜片)以及其周圍,在此基礎(chǔ)上固定點位,對這膜片上的離子通道的離子電流(pA級)進行監(jiān)測記錄的方法。測量回路的中心部分是使用...
膜片鉗技術(shù)是用于紀錄全細胞或個別細胞膜上離子信道電生理特性的研究方法,目的在于提供基礎(chǔ)研究知識與新藥開發(fā)時研究細胞電特性或小分子藥物對細胞膜上離子信道特性的影響,替開發(fā)標靶藥物提供一個測試平臺。傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)膜片鉗系統(tǒng)由人工操作,實驗人員在取得元代細胞(例如心...
膜片鉗技術(shù)是通過微玻管電極(膜片電極或膜片吸管)接觸細胞膜,用千兆歐姆以上的阻抗使之封接,在電學(xué)上分隔和電極尖開口處相接的細胞膜的小區(qū)域(膜片)以及其周圍,在此基礎(chǔ)上固定點位,對這膜片上的離子通道的離子電流(pA級)進行監(jiān)測記錄的方法。測量回路的中心部分是使用...
膜片鉗電生理技術(shù)服務(wù)記錄的幾種形式:全細胞記錄構(gòu)型(whole-cell recording) 高阻封接形成后,繼續(xù)以負壓抽吸使電極管內(nèi)細胞膜破裂,電極胞內(nèi)液直接相通,而與浴槽液絕緣,這種形式稱為“全細胞”記錄。它既可記錄膜電位又可記錄膜電流。其中膜電位可在電...
膜片鉗在通道研究中的重要作用:用膜片鉗技術(shù)可以直接觀察和分辨單離子通道電流及其開閉時程、區(qū)分離子通道的離子選擇性、同時可發(fā)現(xiàn)新的離子通道及亞型,并能在記錄單細胞電流和全細胞電流的基礎(chǔ)上進一步計算出細胞膜上的通道數(shù)和開放概率,還可以用以研究某些胞內(nèi)或胞外物質(zhì)對離...
胎牛血清的主要成分:蛋白質(zhì)類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進細胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細胞利用)、纖維粘連素(促進細胞附著生長)等;多肽類,主要是一些促進細胞生長和分裂的生長因子,較為主要的生長因子...
血清是血液凝固后的液體部分,不含血細胞、纖維蛋白及凝集因子等,含有多種對細胞生長必需的營養(yǎng)因子及大分子物質(zhì)。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量對細胞生長必需的生長因子 [1, 2] 。 胎牛血清也含有一些小分子物質(zhì),如氨基酸、糖...
胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛(通常5-8個月胎齡),之后對未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血,完成的工作以后便再通過一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集已出生10天內(nèi)的小牛,而且...
聚合酶鏈反應(yīng)也可以用作以下敏感試驗的一部分組織分型,對移植至關(guān)重要。截至2008年,甚至有人提議用聚合酶鏈反應(yīng)檢測取代傳統(tǒng)的血型抗體檢測。許多形式的病癥涉及致病基因的改變。通過使用基于聚合酶鏈反應(yīng)的測試來研究這些突變,醫(yī)治方案有時可以根據(jù)患者的不同而不同。聚合...
研制小動物三維在體光纖成像記錄,該成像設(shè)備以雙光子激發(fā)成像模態(tài)為中心,有機融合光片照明顯微成像模態(tài),從細胞分子、結(jié)構(gòu)圖譜和功能回路多個層面系統(tǒng)多方面地提供生物體的神經(jīng)回路信息。圍繞小動物三維在體神經(jīng)回路成像設(shè)備研制這一中心目標,將會涉及到成像設(shè)備、圖像算法、軟...
在體光纖成像記錄能夠同時測量多個光纖源的光偏振態(tài),開啟了在許多應(yīng)用中通過控制偏振態(tài)創(chuàng)造的反饋回路的可能性。例如,高功率的激光放大器和那些依賴于融合多個相同性質(zhì)激光束產(chǎn)生高密度局部化光束的無透鏡成像。偏振是實現(xiàn)高的度激光束控制的關(guān)鍵特性之一。此外,在光學(xué)成像的應(yīng)...
動物體內(nèi)很多物質(zhì)在受到激發(fā)光激發(fā)后,會發(fā)出熒光,產(chǎn)生的非特異性熒光會影響到檢測靈敏度。背景熒光主要是來源于皮毛和血液的自發(fā)熒光,皮毛中的黑色素是皮毛中主要的自發(fā)熒光源,其發(fā)光光線波長峰值在 500 一 520 nm 左右,在利用綠色熒光作為成像對象時,影響較為...
在體光纖成像記錄的工作原理是將光源入射的光束經(jīng)由光纖送入調(diào)制器,在調(diào)制器內(nèi)與外界被測參數(shù)的相互作用, 使光的光學(xué)性質(zhì)如光的強度、波長、頻率、相位、偏振態(tài)等發(fā)生變化,成為被調(diào)制的光信號,再經(jīng)過光纖送入光電器件、經(jīng)解調(diào)器后獲得被測參數(shù)。整個過程中,光束經(jīng)由光纖導(dǎo)入...
研制小動物三維在體光纖成像記錄,該成像設(shè)備以雙光子激發(fā)成像模態(tài)為中心,有機融合光片照明顯微成像模態(tài),從細胞分子、結(jié)構(gòu)圖譜和功能回路多個層面系統(tǒng)多方面地提供生物體的神經(jīng)回路信息。圍繞小動物三維在體神經(jīng)回路成像設(shè)備研制這一中心目標,將會涉及到成像設(shè)備、圖像算法、軟...
在體光纖成像記錄光學(xué)相干是濾除散射光的物理機制。反射光可以作為相干光,而由于散射光散射的位置不同,造成光路長度的差異,再加上光源的相干長度極短,使得散射光失去了相干的性質(zhì)。在光學(xué)相干斷層掃描設(shè)備中,光學(xué)干涉儀被用來檢測相干光。從原理上說,在體光纖成像記錄可以將...
如何挑選適合細胞生長的血清?原代或是正常細胞株建議使用BI特級胎牛血清,對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用所用特級胎牛血清,或胚胎干細胞所用胎牛血清。由于血清有批間差異,細胞種類不同,我們建議客戶購買前可先申請試用樣品,通過篩選得到滿意的血清批號,之后根據(jù)項...
細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果...
現(xiàn)在有些PCR因為擴增區(qū)很短,即使Taq酶活性不是很好也能在很短的時間內(nèi)復(fù)制完成,因此可以改為兩步法,即退火和延伸同時在60℃-65℃間進行,以減少一次升降溫過程,提高了反應(yīng)速度。檢測:PCR反應(yīng)擴增出了高的拷貝數(shù),下一步檢測就成了關(guān)鍵。熒光素(溴化乙錠,EB...
在體光纖成像記錄使得網(wǎng)絡(luò)用戶可以從中間圖像存儲系統(tǒng)中存儲和調(diào)用圖像文檔。網(wǎng)絡(luò)提供了訪問這些文件的方便方法,這樣用戶就無需親自跑到辦公室的存儲區(qū)和從遠離現(xiàn)場的位置申請這些文件。成像是文檔處理和工作流應(yīng)用程序(管理文檔在組織機構(gòu)內(nèi)傳送的方式)的組成部分。許多影像學(xué)...
聚合酶鏈反應(yīng):流聚合酶鏈反應(yīng):一種偽等溫PCR方法。將溶液置于熱梯度下,而不是反復(fù)加熱和冷卻聚合酶鏈反應(yīng)混合物。由此產(chǎn)生的熱不穩(wěn)定性驅(qū)動對流流動自動將聚合酶鏈反應(yīng)試劑從熱區(qū)域和冷區(qū)域打亂,從而反復(fù)啟動聚合酶鏈反應(yīng)。通過利用混沌流場的出現(xiàn),可以優(yōu)化熱邊界條件和P...
聚合酶鏈式反應(yīng)的試驗污染:陽性對照:在建立PCR反應(yīng)實驗室及一般的檢驗單位都應(yīng)設(shè)有PCR陽性對照,它是PCR反應(yīng)是否成功、產(chǎn)物條帶位置及大小是否合乎理論要求的一個重要的參考標志。陽性對照要選擇擴增度中等、重復(fù)性好,經(jīng)各種鑒定是該產(chǎn)物的標本,如以重組質(zhì)粒為陽性對...
在體光纖成像記錄對于成像結(jié)果的處理,需要依賴專業(yè)的圖像分析軟件,分割出目的信號和背景噪聲,獲得準確的熒光強度值。光學(xué)成像方法可分為基于熒光的方法和基于生物發(fā)光的方法。光學(xué)相對于設(shè)備小且較便宜。活的物體顯微成像的缺點是它的有創(chuàng)性,因為需要通過手術(shù)創(chuàng)造一個窗口來觀...
在體光纖成像記錄在自由活動動物的深部腦區(qū)實現(xiàn)光信號記錄和神經(jīng)細胞活性調(diào)控;高質(zhì)量,亞細胞分辨率的成像;多波長成像,實現(xiàn)較多的鈣離子成像(GCaMP or RCaMP),和光遺傳實驗,特定目標光刺激;在體光纖成像系統(tǒng)是模塊化設(shè)計,使用者擁有很高的靈活性,可以隨時...
現(xiàn)有技術(shù)中的在體光纖成像記錄系統(tǒng)仍包含多根多模光纖,若待成像物體所處環(huán)境的空間較窄,可能會導(dǎo)致該光纖成像系統(tǒng)中的多根多模光纖無法進入待成像物體所處環(huán)境,也就無法獲取到待成像物體的圖像,導(dǎo)致光纖成像系統(tǒng)的適用范圍較窄。提供的光纖成像系統(tǒng)靠近待成像物體一側(cè)只包含一...
聚合酶鏈式反應(yīng)的步驟:標準的PCR過程分為三步:DNA變性:(90℃-96℃):雙鏈DNA模板在熱作用下,氫鍵斷裂,形成單鏈DNA;退火:(60℃-65℃):系統(tǒng)溫度降低,引物與DNA模板結(jié)合,形成局部雙鏈。延伸:(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右,...