胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別?根據(jù)牛出生時(shí)間和血清采集分離方法分為:胎牛血清:胎牛血清是指懷孕3-8個(gè)月的母牛被屠宰后,發(fā)育未完全的胎牛心臟密閉穿刺后,通過(guò)一系列工藝處理較為終獲得。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長(zhǎng)發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育完全這些因子會(huì)自動(dòng)消失。新生牛...
膜片鉗技術(shù)基本原理與特點(diǎn):膜片鉗技術(shù)本質(zhì)上也屬于電壓鉗范疇,兩者的區(qū)別關(guān)鍵在于:①膜電位固定的方法不同;②電位固定的細(xì)胞膜面積不同,進(jìn)而所研究的離子通道數(shù)目不同。電壓鉗技術(shù)主要是通過(guò)保持細(xì)胞跨膜電位不變,并迅速控制其數(shù)值,以觀察在不同膜電位條件下膜電流情況。因...
胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛(通常5-8個(gè)月胎齡),之后對(duì)未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血,完成的工作以后便再通過(guò)一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集已出生10天內(nèi)的小牛,而且...
在體光纖成像記錄,指的是利用光學(xué)的探測(cè)手段結(jié)合光學(xué)探測(cè)分子對(duì)細(xì)胞或者組織甚至生物體進(jìn)行成像,來(lái)獲得其中的生物學(xué)信息的方法。傳統(tǒng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法需要在不同的時(shí)間點(diǎn)處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,以獲得多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。而在體光纖成像記錄則可以對(duì)同一觀察目標(biāo)進(jìn)行連續(xù)的查看并記錄其...
未經(jīng)檢疫的胎牛血清可能攜帶傳染性物質(zhì),一旦流入境內(nèi),將會(huì)對(duì)人民**的生命健康造成重大威脅,如可能帶有瘋牛病病毒、牛病毒性腹瀉病毒、牛細(xì)小病毒、狂犬病毒或其他傳染性物質(zhì),具有極高的檢疫風(fēng)險(xiǎn)。此外,不合格的血清對(duì)實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性、穩(wěn)定性和真實(shí)性也會(huì)造成嚴(yán)重影響。無(wú)合格...
膜片鉗技術(shù)及其應(yīng)用:它是作者在\"膜片鉗技術(shù)及其應(yīng)用\"領(lǐng)域所進(jìn)行的研究工作的總結(jié),同時(shí)也吸取了國(guó)際上的先進(jìn)技術(shù)和新近的研究成果。內(nèi)容包括:細(xì)胞電生理與膜片鉗技術(shù),膜片鉗系統(tǒng)的組建及實(shí)驗(yàn)技術(shù)概要,膜片鉗放大器原理與低噪聲設(shè)計(jì),單通道和全細(xì)胞電流記錄技術(shù),數(shù)據(jù)采...
膜片鉗技術(shù)在通道研究中的重要作用:應(yīng)用膜片鉗技術(shù)可以直接觀察和分辨單離子通道電流及其開(kāi)閉時(shí)程、區(qū)分離子通道的離子選擇性、同時(shí)可發(fā)現(xiàn)新的離子通道及亞型,并能在記錄單細(xì)胞電流和全細(xì)胞電流的基礎(chǔ)上進(jìn)一步計(jì)算出細(xì)胞膜上的通道數(shù)和開(kāi)放概率,還可以用以研究某些胞內(nèi)或胞外物...
膜片鉗記錄的幾種形式:細(xì)胞吸附膜片(cell-attached patch) 將兩次拉制后經(jīng)加熱拋光的微管電極置于清潔的細(xì)胞膜表面上,形成高阻封接,在細(xì)胞膜表面隔離出一小片膜,既而通過(guò)微管電極對(duì)膜片進(jìn)行電壓鉗制,高分辨測(cè)量膜電流,稱(chēng)為細(xì)胞貼附膜片。由于不破壞細(xì)...
單光纖在體光纖成像記錄與內(nèi)窺鏡結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了超細(xì)內(nèi)窺。超細(xì)內(nèi)窺鏡在一些特殊檢測(cè)環(huán)境(如耳、鼻、心、腦等)中,可實(shí)現(xiàn)體內(nèi)無(wú)創(chuàng)傷檢查。人體耳蝸在人耳內(nèi)部深處,由于耳道的結(jié)構(gòu)復(fù)雜,很難從耳外觀察內(nèi)部的結(jié)構(gòu),采用超細(xì)內(nèi)窺鏡,可以讓內(nèi)窺鏡通過(guò)耳道,直接進(jìn)入耳朵內(nèi)部,然后對(duì)...
聚合酶鏈反應(yīng)的常見(jiàn)問(wèn)題分析與解決方法:反應(yīng)緩沖液未完全融化或未充分混勻。確保反應(yīng)緩沖液融化完全并徹底混勻。引物特異性差。利用BLAST檢查引物特異性或重新設(shè)計(jì)引物。引物量過(guò)多。減少反應(yīng)體系中引物的用量。模板量過(guò)多。質(zhì)粒DNA的用量應(yīng)
逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)的原理是:提取組織或細(xì)胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA。再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增,而獲得目的基因或檢測(cè)基因表達(dá)。完整RNA 的提取和純化,是進(jìn)行RNA 方面的研究...
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)重要的培養(yǎng)基且不可替代,它是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(zhǎng)分化階段,血中含有豐富的生長(zhǎng)發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng)。因此,如何在使用過(guò)程中保護(hù)這些因子的活性,達(dá)到較為大的細(xì)胞培養(yǎng)效果,就需要正確地使用胎牛血清。正...
聚合酶鏈反應(yīng)允許快速生產(chǎn)短DN段,即使已知的引物序列不超過(guò)兩個(gè)。聚合酶鏈反應(yīng)的這種能力增強(qiáng)了許多方法,例如生成雜交 探針用于 Southern 或northern blot 雜交。聚合酶鏈反應(yīng)為這些技術(shù)提供了大量的純DNA,有時(shí)是單鏈的,甚至可以從非常少量的起...
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng):RNA和DNA的五碳糖,前者比后者多了一個(gè)O,由于多出來(lái)的O原子造成了RNA和DNA的堿基不同,即O原子造成U和T的不同,U分子化學(xué)式C4H4N2O2,T胸腺嘧啶化學(xué)式C5H6N2O2,現(xiàn)在將兩個(gè)分子式進(jìn)行對(duì)比,U比T多了CH2,結(jié)合前面的核糖...
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的試驗(yàn)污染:實(shí)驗(yàn)室中克隆質(zhì)粒的污染:在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室及某些用克隆質(zhì)粒做陽(yáng)性對(duì)照的檢驗(yàn)室,這個(gè)問(wèn)題也比較常見(jiàn)。因?yàn)榭寺≠|(zhì)粒在單位容積內(nèi)含量相當(dāng)高,另外在純化過(guò)程中需用較多的用具及試劑,而且在活細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)粒,由于活細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖的簡(jiǎn)便性及具有很強(qiáng)的...
在體光纖成像記錄對(duì)于成像結(jié)果的處理,需要依賴(lài)專(zhuān)業(yè)的圖像分析軟件,分割出目的信號(hào)和背景噪聲,獲得準(zhǔn)確的熒光強(qiáng)度值。光學(xué)成像方法可分為基于熒光的方法和基于生物發(fā)光的方法。光學(xué)相對(duì)于設(shè)備小且較便宜。活的物體顯微成像的缺點(diǎn)是它的有創(chuàng)性,因?yàn)樾枰ㄟ^(guò)手術(shù)創(chuàng)造一個(gè)窗口來(lái)觀...
膜片鉗實(shí)驗(yàn)系統(tǒng):根據(jù)不同的電生理實(shí)驗(yàn)要求,可以組建不同的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),但有若干共同的基本部件,包括機(jī)械部分(防震工作臺(tái)、屏蔽罩、儀器設(shè)備架)、光學(xué)部分(顯微鏡、視頻監(jiān)視器、單色光系統(tǒng))、電子部件(膜片鉗放大器、刺激器、數(shù)據(jù)采集的設(shè)備、計(jì)算機(jī)系統(tǒng))和微操縱器在大多數(shù)...
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的常見(jiàn)問(wèn)題:出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增帶:PCR擴(kuò)增后出現(xiàn)的條帶與預(yù)計(jì)的大小不一致,或大或小,或者同時(shí)出現(xiàn)特異性擴(kuò)增帶 與非特異性擴(kuò)增帶。非特異性條帶的出現(xiàn),其原因:一是引物與靶序列不完全互補(bǔ)、或引物聚合形成二聚體。二是Mg2+離子濃度過(guò)高、退火溫度過(guò)低,...
在體光纖成像記錄系統(tǒng)在外泌體研究中的應(yīng)用,細(xì)胞外囊泡,是來(lái)源于細(xì)胞的脂質(zhì)雙層包裹的納米囊泡。外泌體是來(lái)源于細(xì)胞的脂質(zhì)雙層包裹的納米囊泡。外泌體特性的影響還沒(méi)有完全闡明,也缺乏對(duì)不同儲(chǔ)存條件的對(duì)比評(píng)價(jià)。在自由活動(dòng)動(dòng)物的深部腦區(qū)實(shí)現(xiàn)光信號(hào)記錄和神經(jīng)細(xì)胞活性調(diào)控;高...
在體光纖成像記錄人類(lèi)大量的復(fù)雜行為主要取決于上千億個(gè)神經(jīng)元組成的精確神經(jīng)環(huán)路,而神經(jīng)環(huán)路的建立依賴(lài)于神經(jīng)元之間突觸連接的形成。突觸是神經(jīng)元交流的關(guān)鍵結(jié)構(gòu),只有通過(guò)突觸連接,神經(jīng)元之間以及神經(jīng)元和靶向細(xì)胞(包括肌肉,腺體分析的細(xì)胞)才能有效的傳遞信號(hào),因此突觸連...
膜片鉗技術(shù)本質(zhì)上也屬于電壓鉗范疇,兩者的區(qū)別關(guān)鍵在于:①膜電位固定的方法不同;②電位固定的細(xì)胞膜面積不同,進(jìn)而所研究的離子通道數(shù)目不同。電壓鉗技術(shù)主要是通過(guò)保持細(xì)胞跨膜電位不變,并迅速控制其數(shù)值,以觀察在不同膜電位條件下膜電流情況。因此只能用來(lái)研究整個(gè)細(xì)胞膜或...
在體光纖成像記錄技術(shù)是在散射介質(zhì)(或稱(chēng)為隨機(jī)介質(zhì))成像的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的,在散射介質(zhì)成像系統(tǒng)中,光經(jīng)過(guò)強(qiáng)散射介質(zhì)時(shí),由于介質(zhì)的隨機(jī)性或不均勻性,光發(fā)生散射后在輸出端形成散斑。當(dāng)光經(jīng)過(guò)光纖時(shí),多模光纖中不同模式的光產(chǎn)生隨機(jī)的相位延遲或者模間耦合導(dǎo)致光散射的產(chǎn)生,...
對(duì)生物體內(nèi)的突觸結(jié)構(gòu)和蛋白進(jìn)行空間分布的研究時(shí),成像系統(tǒng)需要具備高的成像速度,防止出現(xiàn)生物體移動(dòng)造成的重影現(xiàn)象;成像的超高動(dòng)態(tài)范圍和熒光信號(hào)的超高線(xiàn)性度:像的熒光強(qiáng)度計(jì)數(shù)需要具有對(duì)的的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義證明實(shí)驗(yàn)結(jié)論的正確性,因此圖像的熒光強(qiáng)度值必須能夠精確反映體內(nèi)蛋白...
血清的安全風(fēng)險(xiǎn)因素主要有以下方面:地理因素,地理因素包括血清產(chǎn)地的流行病學(xué)趨勢(shì)、基礎(chǔ)設(shè)施情況以及血源供應(yīng)量。措施得當(dāng)可以預(yù)防能避免的動(dòng)物疾病,同時(shí)產(chǎn)地國(guó)穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)設(shè)施,對(duì)保證供應(yīng)鏈的安全也十分必要。血源是否充足則決定了血清是否可源源不斷地持續(xù)供應(yīng)。生產(chǎn),生...
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng):Taq(水生棲熱菌)聚合酶耐熱DNA聚合酶的很好活性溫度約為75-80°C(167-176°F),盡管該酶通常使用72°C(162°F)的溫度。在該步驟中,DNA聚合酶通過(guò)從反應(yīng)混合物中添加在5’-至-3’方向上與模板互補(bǔ)的游離DNA鏈來(lái)合成與...
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng):三步:變性:模板DNA加熱變性;復(fù)性,引物與它的靶序列發(fā)生退火,引物DNA量多,使引物和模板在局部形成雜交鏈;延伸,4種dNTP 與 Mg2+ 存在的條件下,DNA合成酶催化以引物為起始點(diǎn),按5'-3'方向進(jìn)行延伸。上面三步為一個(gè)循環(huán),可使拷貝...
膜片鉗技術(shù)的基本原理和方法:膜片鉗技術(shù)是在電壓鉗技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的,電壓鉗是利用負(fù)反饋技術(shù)將膜電位在空間和時(shí)間上固定于某一測(cè)定值,以研究動(dòng)作電位產(chǎn)生過(guò)程中膜的離子通透性與膜電位之間的依從關(guān)系。但電壓鉗只能研究一個(gè)細(xì)胞上眾多通道的綜合活動(dòng)規(guī)律,而無(wú)法反映單個(gè)通...
在體光纖成像記錄增大視場(chǎng)可以提高成像光譜儀的工作效率,大視場(chǎng)寬覆蓋是下一代成像光譜儀的發(fā)展趨勢(shì)。視場(chǎng)增大通常會(huì)導(dǎo)致遙感器質(zhì)量和體積的增加,如何在獲得大視場(chǎng)的同時(shí)具有小型化與輕量化的結(jié)構(gòu)是每個(gè)成像光譜儀設(shè)計(jì)者應(yīng)該權(quán)衡的問(wèn)題。為了突破成像光譜儀質(zhì)量與體積對(duì)視場(chǎng)的限...
購(gòu)買(mǎi)回來(lái)的血清都是冰凍狀態(tài),使用時(shí)需要融化,融化過(guò)程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,待溶解完成,我們觀察到的胎牛血清會(huì)表現(xiàn)出黃色或紅色。并不是越紅越好,也不是越黃越好,淡黃色到淡紅色才是比較正常的顏色范圍。很多培養(yǎng)細(xì)胞的寶寶會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量...