制備培養(yǎng)基的小技巧1.培養(yǎng)基可按制備也可使用按生產(chǎn)的符合規(guī)定的商品化成品培養(yǎng)基,脫水培養(yǎng)基除附有和使用說(shuō)明外還應(yīng)注明有效期、貯存條件、適用性試驗(yàn)的質(zhì)控菌株和用途。配制時(shí)應(yīng)按使用說(shuō)明上的要求操作,受潮結(jié)塊不能使用,以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求。2.配制培養(yǎng)基使用的容器應(yīng)是玻璃器皿或搪瓷器皿如搪瓷筒、量筒、漏斗、三角燒瓶、刻度吸管、試管、培養(yǎng)皿等。使用的器皿應(yīng)洗凈,用蒸餾水沖凈,烘干后方可使用。禁用金屬容器如鐵、銅、鋁容器,避免金屬離子與培養(yǎng)基成分結(jié)合,生成有害物質(zhì),影響細(xì)菌生長(zhǎng)。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):容器可自行拆卸更換和消毒,操作方便。重慶全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器Systec培養(yǎng)基準(zhǔn)備器的工作模式...
血清培養(yǎng)基主要問(wèn)題:血清的成份可能有幾百種之多,對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制不清楚,尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí),這給研究工作帶來(lái)許多困難。血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞,在體內(nèi)狀態(tài),血清不是它們接觸的生理學(xué)液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過(guò)程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)(成纖維細(xì)胞)同時(shí)抑制另一類細(xì)胞生長(zhǎng)(表皮細(xì)胞)。培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。福建...
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:1.過(guò)濾滅菌:過(guò)濾滅菌可以在真空負(fù)壓或正壓條件下進(jìn)行。使用無(wú)菌設(shè)備和0.2um孔徑的濾膜。將過(guò)濾裝置的各個(gè)部分消毒滅菌,或使用預(yù)消毒設(shè)備。一些濾膜上附著蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)()。為達(dá)到有效過(guò)濾,應(yīng)事先將濾膜用無(wú)菌水潤(rùn)濕。2.監(jiān)測(cè):應(yīng)對(duì)經(jīng)濕熱或過(guò)濾滅菌的培養(yǎng)基進(jìn)行監(jiān)測(cè),尤其要對(duì)pH、色澤、滅菌效果和均勻度等指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。添加劑的制備:制備含有有毒物質(zhì)(生素)時(shí)應(yīng)小心操作,避免因粉末的擴(kuò)散造成實(shí)驗(yàn)人員過(guò)敏或發(fā)生其他不良反應(yīng)。采用適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施并小心按照產(chǎn)品使用說(shuō)明操作。低滲溶液則使細(xì)胞吸水膨脹易破裂,因此,配制培養(yǎng)基時(shí)要掌握營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度。重慶培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)干粉顆粒微生物培養(yǎng)...
血清培養(yǎng)基主要問(wèn)題:血清的成份可能有幾百種之多,對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制不清楚,尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí),這給研究工作帶來(lái)許多困難。血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞,在體內(nèi)狀態(tài),血清不是它們接觸的生理學(xué)液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過(guò)程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)(成纖維細(xì)胞)同時(shí)抑制另一類細(xì)胞生長(zhǎng)(表皮細(xì)胞)。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性。湖...
濕熱滅菌:濕熱滅菌在高壓鍋或培養(yǎng)基制備器中進(jìn)行,高壓滅菌一般采用121℃±3℃滅菌15min,具體培養(yǎng)基按食品微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定進(jìn)行滅菌。培養(yǎng)基體積不應(yīng)超過(guò)1000mL,否則滅菌時(shí)可能會(huì)造成過(guò)度加熱。所有的操作應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)或使用說(shuō)明的規(guī)定進(jìn)行。滅菌效果的控制是關(guān)鍵問(wèn)題。加熱后采用適當(dāng)?shù)姆绞嚼鋮s,以防加熱過(guò)度。這對(duì)于大容量和敏感培養(yǎng)基十分重要,例如含有煌綠的培養(yǎng)基。過(guò)濾除菌:過(guò)濾除菌可在真空或加壓的條件下進(jìn)行。使用孔徑為0.2μm的無(wú)菌設(shè)備和濾膜。消毒過(guò)濾設(shè)備的各個(gè)部分或使用預(yù)先消毒的設(shè)備。一些濾膜上附著有蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)(如物品),為了達(dá)到有效過(guò)濾,應(yīng)事先將濾膜用無(wú)菌水潤(rùn)濕。全自動(dòng)培養(yǎng)基制...
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1.培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外.一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對(duì).再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來(lái)源。2.培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)推各稱,配方及其來(lái)源.和各種成份的牌號(hào)。好終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度過(guò)大,會(huì)使?jié)B透壓過(guò)高,使細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離而抑制微生物生長(zhǎng)。大容量 培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試培養(yǎng)基的制備原則和要求:培養(yǎng)基是根據(jù)各...
培養(yǎng)基的制備步驟有哪些:第1,用水:培養(yǎng)基制備用水應(yīng)使用電阻率不小于30萬(wàn)Ωcm的蒸餾水或與其同質(zhì)的水,較好不使用離子交換器生產(chǎn)的去離子水。第二,稱量。稱量時(shí)要用獨(dú)有的角匙,避免交叉污染而影響檢驗(yàn)結(jié)果;干粉培養(yǎng)基易吸潮,如有條件,盡量在濕度較低的房間稱取培養(yǎng)基。第三,復(fù)水,復(fù)水時(shí)不得用銅鍋或鐵鍋,以防有離子混入培養(yǎng)基中,影響微生物的生長(zhǎng);容器的大小需大于復(fù)水后培養(yǎng)基總體積的2倍以上,避免在加熱溶解過(guò)程中,培養(yǎng)基溢出;含有瓊脂粉的培養(yǎng)基,在加熱溶解之前可以浸泡數(shù)分鐘;加熱培養(yǎng)基時(shí)一定要進(jìn)行攪拌,特別是瓊脂類培養(yǎng)基。為避免燒焦和沸騰溢出,對(duì)于少量的培養(yǎng)基較好使用沸水浴進(jìn)行加熱。強(qiáng)力磁力攪拌培養(yǎng)基在...
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1、培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來(lái)源。2、培養(yǎng)基的制備記錄:每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來(lái)源,和各種成份的牌號(hào),較終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基制備器全自動(dòng)程序,無(wú)人值守;分裝過(guò)程無(wú)需人工干預(yù)。培養(yǎng)基制備器廠家微生物限度:細(xì)胞培養(yǎng)基不是無(wú)菌產(chǎn)品,其中的微生物在一定條件下會(huì)吸收細(xì)...
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:1.pH的測(cè)定和調(diào)整:用pH計(jì)測(cè)定pH,必要時(shí)在滅菌前調(diào)節(jié)pH,除特殊說(shuō)明外,培養(yǎng)基滅菌后冷卻至25℃時(shí),要求pH的變化不超過(guò)0.2pH單位.通常使用濃度約為40g/L(約1mol/L)的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L(約1mol/L)的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH。如果滅菌后調(diào)節(jié)pH,溶液需滅菌。注:商品化培養(yǎng)基在高壓滅菌前后pH可能發(fā)生明顯變化,但使用蒸餾水或去離子水時(shí),滅菌前無(wú)需調(diào)節(jié)pH。2.分裝:將配置好的培養(yǎng)基分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦校萜鞯捏w積至少為體積的1.2倍。培養(yǎng)基制備器外控高低電平控制啟停,正反,簡(jiǎn)易分裝,光耦隔離;外控模擬量調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速。天津觸摸屏培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基各...
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1、培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來(lái)源。2、培養(yǎng)基的制備記錄:每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱,配方及其來(lái)源,和各種成份的牌號(hào),較終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):儀器蓋設(shè)計(jì)保護(hù)鎖,超過(guò)100度自動(dòng)加鎖,使實(shí)驗(yàn)環(huán)境更安全。西藏全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基...
常用培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理;掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟;了解常見(jiàn)滅菌、清毒基本原理及方法;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過(guò)濾除菌的操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長(zhǎng)繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因素和水。根據(jù)微生物的種類和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌囵B(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,有時(shí)又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需要的較基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),所以可供微生物生長(zhǎng)繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過(guò)升溫...
配制培養(yǎng)基的原則:控制培養(yǎng)基的條件,控制培養(yǎng)基的pH配制培養(yǎng)基必須根據(jù)微生物的特點(diǎn)調(diào)節(jié)pH。各大類微生物要求的適宜生長(zhǎng)pH范圍不同。如霉菌與酵母菌一般為5.0-6.0,細(xì)菌為6.5-7.5.放線菌為7.5-8.5.培養(yǎng)基的pH與其C/N有極大關(guān)系。C/N高的培養(yǎng)基,例如培養(yǎng)各種的培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)后其pH明顯下降;相反,C/N低的培養(yǎng)基,例如培養(yǎng)一般細(xì)菌的培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)后,其pH則明顯上升。這是由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗與代謝產(chǎn)物的積累,改變了培養(yǎng)基的pH,若不及時(shí)控制,將導(dǎo)致菌體生長(zhǎng)停止。培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。江西培養(yǎng)基制備器售后培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:①概述:培養(yǎng)基和試劑的滅菌通常采用濕...
液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的對(duì)應(yīng)詞,是微生物或動(dòng)植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。它具有進(jìn)行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)。在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細(xì)胞的周圍,形成透過(guò)養(yǎng)分的壁障,養(yǎng)分的攝入受到阻礙。由于在通氣或在振蕩的條件下,可消除這種阻礙以及增加供氧量,所以有利于細(xì)胞生長(zhǎng),提高生產(chǎn)量。培養(yǎng)基的配制:配料:配方換算→在容器中加入少量水→按照配方稱取各種藥品,依次加入→加足所需水量一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋。溶解:淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀,加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。調(diào)PH:用1N的鹽酸或的1NNaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。過(guò)濾...
培養(yǎng)基制備器:1.多功能蠕動(dòng)泵:該儀器的明顯特征是高精密度和高速度??蛇x擇從0.1到999ml不等的劑量量配器,實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)基定量分裝,系統(tǒng)運(yùn)行的精確度達(dá)到±0.5﹪。系統(tǒng)自動(dòng)調(diào)整供給樣品劑量保證了重現(xiàn)性結(jié)果。2.自動(dòng)管閥:經(jīng)濟(jì)的分配法。在培養(yǎng)基器皿中事先選好一定的輕微的余壓來(lái)推動(dòng)樣品流動(dòng)。MediaPreo控制閥門開(kāi)關(guān)。容量一達(dá)到所需,MediaPrep就會(huì)開(kāi)始運(yùn)行樣品量配器并根據(jù)培養(yǎng)基的黏度調(diào)整樣品劑量。3.其他系統(tǒng):可直接連接標(biāo)準(zhǔn)、通用的蠕動(dòng)泵和稀釋、充填培養(yǎng)皿系統(tǒng)。制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn):液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的。安徽Systec培養(yǎng)基制備器一種培養(yǎng)基制備分裝一體機(jī),其中所述自動(dòng)分裝...
培養(yǎng)基制備器:1.多功能蠕動(dòng)泵:該儀器的明顯特征是高精密度和高速度??蛇x擇從0.1到999ml不等的劑量量配器,實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)基定量分裝,系統(tǒng)運(yùn)行的精確度達(dá)到±0.5﹪。系統(tǒng)自動(dòng)調(diào)整供給樣品劑量保證了重現(xiàn)性結(jié)果。2.自動(dòng)管閥:經(jīng)濟(jì)的分配法。在培養(yǎng)基器皿中事先選好一定的輕微的余壓來(lái)推動(dòng)樣品流動(dòng)。MediaPreo控制閥門開(kāi)關(guān)。容量一達(dá)到所需,MediaPrep就會(huì)開(kāi)始運(yùn)行樣品量配器并根據(jù)培養(yǎng)基的黏度調(diào)整樣品劑量。3.其他系統(tǒng):可直接連接標(biāo)準(zhǔn)、通用的蠕動(dòng)泵和稀釋、充填培養(yǎng)皿系統(tǒng)。培養(yǎng)基制備器內(nèi)部的管道和容器可以更換,方便移除和清洗。西藏培養(yǎng)基制備器多少錢培養(yǎng)基制備的九個(gè)步驟關(guān)注要點(diǎn):步驟一:稱取數(shù)量:用...
培養(yǎng)基的配置應(yīng)該注意的幾大步驟:常用玻璃儀器的準(zhǔn)備制備培養(yǎng)基所用的吸管、錐形瓶、毛細(xì)吸管、平皿等玻璃儀器用前要用肥皂水洗刷后用清水沖洗干凈,晾干后備用。(1)平皿用紙或布包好,或裝在金屬盒內(nèi),于121℃高壓蒸汽菌3min后烘干,備用。(2)試管管口用棉花塞或硅氟塑料試管塞塞好,再用布或報(bào)紙包扎好,121℃高壓蒸汽滅菌20℃后烘干,備用。(3)吸管及滴管先用少許棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽內(nèi)的氣體污染),然后用紙包后或裝入金屬吸管筒內(nèi),于121℃高壓蒸汽滅菌20min后烘干,備用。其他玻璃器皿均應(yīng)按上法處理,也應(yīng)裝金屬筒內(nèi)160℃干熱滅菌2h后,備用。合成培養(yǎng)基是一類化學(xué)成分和數(shù)量完...
牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基(又稱營(yíng)養(yǎng)肉湯,用于培養(yǎng)細(xì)菌):成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g,蒸餾水(或去離子水)1000mL,pH7.4士0.2。制法:將各成分溶解于水中,于20~25℃條件下以1mol/LNaOH溶液用pH計(jì)校正pH7.4,分裝三角瓶(裝量以三角瓶容積的1/2~2/3為宜),或試管(分裝量以試管高度的1/4左右為宜),0.1MPa滅菌15~20min后備用?;瘜W(xué)分類:天然培養(yǎng)基指一類利用動(dòng)、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基等。組合培養(yǎng)基又稱為合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基,是一類按微生物的營(yíng)養(yǎng)要求精確設(shè)計(jì)后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培...
培養(yǎng)基配置原則:控制pH條件,培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi),以滿足不同類型微生物的生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的很適pH條件各不相同,一般來(lái)講,細(xì)菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長(zhǎng),酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長(zhǎng)。值得注意的是,在微生物生長(zhǎng)繁殖和代謝過(guò)程中,由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累,會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化,若不對(duì)培養(yǎng)基pH條件進(jìn)行控制,往往導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)速度下降或(和)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此,為了維持培養(yǎng)基pH的相對(duì)恒定,通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑,常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽(如KH2PO4和K2HPO4)組成的混...
根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來(lái)區(qū)分,可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。1)液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,沒(méi)有明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長(zhǎng)代謝狀態(tài)。2)固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂較為常用。固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分普遍。在實(shí)驗(yàn)室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗(yàn)雜菌、計(jì)數(shù)、保藏、生物測(cè)定等。3)半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時(shí)可用來(lái)觀察微生物的動(dòng)力,有時(shí)用來(lái)保藏...
常用培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理;掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟;了解常見(jiàn)滅菌、清毒基本原理及方法;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過(guò)濾除菌的操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長(zhǎng)繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因素和水。根據(jù)微生物的種類和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌囵B(yǎng)基也有不同的種類和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基,有時(shí)又稱為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需要的較基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),所以可供微生物生長(zhǎng)繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過(guò)升溫...
利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基:包扎,分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。滅菌,按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。擺斜面,滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的1/2。貯存,培養(yǎng)基在30℃下放置,無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養(yǎng)基是細(xì)胞生長(zhǎng)的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),利用三角培養(yǎng)瓶制備培養(yǎng)基可按照以上步驟操作,在使用前需確保培養(yǎng)基的無(wú)菌性,以免影響細(xì)胞正常繁殖。液體培養(yǎng)基在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細(xì)胞的周圍,形成透過(guò)...
培養(yǎng)基滅菌方法有哪五種類型:1、輻射滅菌原理方法:輻射滅菌原理:是用高能電磁輻射和細(xì)菌核酸的光化學(xué)反應(yīng)引起細(xì)菌死亡。常用的是紫外線,X射線和伽馬射線。主要用于室內(nèi)空氣和器皿的表面消毒。2、干熱滅菌原理方法:干熱滅菌原理:是采用高溫氧化微生物,使蛋白質(zhì)變性并濃縮電解質(zhì)以殺死微生物。3、化藥滅菌原理方法,化藥滅菌原理:使用化藥與微生物細(xì)胞中的成分發(fā)生反應(yīng),從而使蛋白質(zhì)變性酶失活。4、過(guò)濾滅菌原理方法:過(guò)濾滅菌原理:是使用不能滲透的微生物濾膜進(jìn)行滅菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的細(xì)孔濾膜對(duì)壓縮空氣,酶溶液和其他對(duì)熱不穩(wěn)定的復(fù)合溶液進(jìn)行滅菌。5、濕熱滅菌原理方法:在工業(yè)生產(chǎn)中,用于滅菌對(duì)于培...
血清培養(yǎng)基主要問(wèn)題:血清的成份可能有幾百種之多,對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制不清楚,尤其是對(duì)其中一些多肽類生長(zhǎng)因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識(shí),這給研究工作帶來(lái)許多困難。血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞,在體內(nèi)狀態(tài),血清不是它們接觸的生理學(xué)液體,只是在損傷愈合以及血液凝固過(guò)程中才接觸血清,因此使用血清有可能改變某種細(xì)胞在體內(nèi)的正常狀態(tài),血清可能促進(jìn)某些細(xì)胞的生長(zhǎng)(成纖維細(xì)胞)同時(shí)抑制另一類細(xì)胞生長(zhǎng)(表皮細(xì)胞)。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過(guò)濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形。新疆培養(yǎng)基制備器...
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng):1.培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂.較好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側(cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號(hào),并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后.還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。2.培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng),以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重...
培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過(guò)容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時(shí)好好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,以為測(cè)定該批培養(yǎng)基好終pH之用。培養(yǎng)基制備器應(yīng)存放于冷暗處,較好能放于普通冰箱內(nèi)。河北Systec培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、...
培養(yǎng)基的類別按照培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分:培養(yǎng)基按其物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三類。(1)古體培養(yǎng)基。是在培養(yǎng)基中加入凝固劑,有瓊脂、明膠、硅膠等。古體培養(yǎng)基常月于微生物分離、鑒定、計(jì)數(shù)和菌種保存等方面。(2)液體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基中不加任何凝固劑。這種培養(yǎng)基的成分均勻,微生物能充按標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間和溫度對(duì)接種后的平板進(jìn)行培養(yǎng),目標(biāo)菌應(yīng)呈現(xiàn)良好生長(zhǎng),并有典型的菌落外觀、大小和形態(tài),非目標(biāo)菌應(yīng)是微弱生長(zhǎng)或無(wú)生長(zhǎng)。培養(yǎng)基制備器蓋子和分裝孔是采用溫度和壓力控制的,不能隨意打開(kāi)。貴州瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基的過(guò)濾澄清:液體培養(yǎng)基必須較全澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無(wú)明顯沉淀,因此...
培養(yǎng)基的物理滅菌方法:(一)加熱滅菌法:加熱可破壞微生物中酶、蛋白質(zhì)和核酸,導(dǎo)致微生物死亡。加熱滅菌又分干熱滅菌法和濕熱滅菌法。在同一溫度下,濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好。主要是因濕熱滅菌時(shí),有水分存在,蛋白質(zhì)容易變性。水分又易使微生物膜壁潤(rùn)濕,濕熱的穿透力比干熱大。常用的有火焰滅菌法與干熱空氣滅菌法兩種。(二)紫外線滅菌法:是指用紫外線照射殺滅微生物的方法。一般用于滅菌的紫外線波長(zhǎng)是200~300nm,滅菌力較強(qiáng)的波長(zhǎng)是253.7nm。紫外線作用于核酸蛋白促使其變性,同時(shí)空氣受紫外線照射后產(chǎn)生微量臭氧,從而起共同殺菌作用。紫外線進(jìn)行直線傳播,可被不同的表面反射,穿透力微弱,但較易穿透清潔空氣及...
培養(yǎng)基的類型-根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來(lái)區(qū)分,可以分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。1)液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,其中的成分基本上溶于水,沒(méi)有明顯的固形物,液體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻,易于控制微生物的生長(zhǎng)代謝狀態(tài)。2)固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂較為常用。固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分多方面。在實(shí)驗(yàn)室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗(yàn)雜菌、計(jì)數(shù)、保藏、生物測(cè)定等。3)半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時(shí)可用來(lái)觀察微生物的動(dòng)...
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:1.pH的測(cè)定和調(diào)整:用pH計(jì)測(cè)定pH,必要時(shí)在滅菌前調(diào)節(jié)pH,除特殊說(shuō)明外,培養(yǎng)基滅菌后冷卻至25℃時(shí),要求pH的變化不超過(guò)0.2pH單位.通常使用濃度約為40g/L(約1mol/L)的氫氧化鈉溶液或濃度約為36.5g/L(約1mol/L)的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH。如果滅菌后調(diào)節(jié)pH,溶液需滅菌。注:商品化培養(yǎng)基在高壓滅菌前后pH可能發(fā)生明顯變化,但使用蒸餾水或去離子水時(shí),滅菌前無(wú)需調(diào)節(jié)pH。2.分裝:將配置好的培養(yǎng)基分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦?,容器的體積至少為體積的1.2倍。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性。觸摸屏培養(yǎng)基制備器售后培養(yǎng)基配制--稱量...
培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng),以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補(bǔ)足。培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。中國(guó)香港Syste...