2脂質(zhì)體的主要成分 ?油磷脂(GP)、鞘磷脂(SM)和膽固醇(Chol)是市場上脂質(zhì)體產(chǎn)品中使?的基本成分。GP含有?油,它連接?對疏?脂肪酸鏈和?個(gè)親?極性頭基。脂肪酸和極性頭基團(tuán)的類型。在?理pH下,不同的頭部組提供負(fù)(PA、PS、PG和?磷脂)...
其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)常用染料生物染料在細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組分鑒定中有著廣泛的應(yīng)用,除細(xì)胞膜研究外,我們經(jīng)常也會(huì)對一些其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)及成分進(jìn)行探索,例如線粒體、溶酶體、蛋白質(zhì)、細(xì)胞核等,而對于不同的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有不同的染料進(jìn)行染色細(xì)胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色...
超聲聯(lián)合納米微泡進(jìn)行核酸輸送超聲聯(lián)合納米微泡進(jìn)行DNA傳遞。不考慮超聲穿孔現(xiàn)象,建議采用US與帶核酸的微泡相互作用來提高傳輸效率。這種策略也可能有助于遺傳物質(zhì)的位點(diǎn)特異性釋放,從而減少非共振組織轉(zhuǎn)染。通過納米微泡轉(zhuǎn)移基因已經(jīng)采用了幾種技術(shù),從基因的并發(fā)管理到納...
熒光標(biāo)記的靶向微泡在血管生成過程中的應(yīng)用。內(nèi)皮表面的許多內(nèi)皮標(biāo)記物被上調(diào),特別是αvβ3和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)受體。血管生成可以是*結(jié)生長的標(biāo)志,也可以作為***慢性缺血(例如骨骼肌)的***干預(yù)手段。監(jiān)測這些情況在臨床前動(dòng)物研究和臨床中可能很重要。血...
**初的微泡靶向?qū)嶒?yàn)是在靜態(tài)條件下進(jìn)行的:將氣泡與目標(biāo)表面接觸(通常是倒置),在沒有流動(dòng)的情況下孵育幾分鐘,然后將剩余的自由氣泡洗掉,測量保留氣泡的數(shù)量和聲學(xué)響應(yīng)。然而,這種情況并不是脈管系統(tǒng)內(nèi)真正靶向的良好模型,在脈管系統(tǒng)內(nèi),結(jié)合發(fā)生時(shí)沒有任何流動(dòng)停止。取決...
脂質(zhì)體共價(jià)連接藥物-脂質(zhì)偶聯(lián)載***式通過連接劑將藥物分?與脂質(zhì)共價(jià)連接是另?種在脂質(zhì)體內(nèi)裝載藥物的有效策略,例如Mepact。MDP是主要?蘭?陽性菌細(xì)胞壁的組成部分,具有****應(yīng)答的作?。由于MDP是?溶性低分?量分?,其脂質(zhì)體在儲(chǔ)存過程中存在包封效率低...
內(nèi)皮素(CD105)是轉(zhuǎn)化生長因子的受體,是一種增殖相關(guān)的低氧誘導(dǎo)蛋白,在血管生成內(nèi)皮細(xì)胞上高度表達(dá)。使用99mTc-labeled單克隆抗體靶向內(nèi)啡肽的免疫掃描顯示,**中大量攝取內(nèi)啡肽。**近,已經(jīng)描述了一種將內(nèi)啡肽特異性單克隆抗體偶聯(lián)到微泡的新方法。通過...
將配體附著在微泡表面的基本方法有兩種:要么通過直接共價(jià)鍵,要么通過生物素-親和素連接。生物素-親和素連接是一種直接的技術(shù),其中生物素化的配體通過親和素橋連接到生物素化的微泡上。盡管生物素-親和素連鎖在概念驗(yàn)證和臨床前靶向研究中很有用,但免疫原性使其無法轉(zhuǎn)化為人...
脂質(zhì)體質(zhì)量控制脂質(zhì)體的質(zhì)量控制是確保其制備過程中符合一定標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范的重要步驟,主要包括以下幾個(gè)方面:1.原材料質(zhì)量控制:對用于制備脂質(zhì)體的原材料進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制,包括磷脂質(zhì)、膽固醇、表面活性劑、PEG衍生物等。確保原材料的純度、穩(wěn)定性和符合規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。2...
脂質(zhì)體靶向遞送中RGD配體修飾盡管陽離子脂質(zhì)體具有在體內(nèi)遞送核酸的潛力,但其遞送到特定靶點(diǎn)仍然是一個(gè)主要挑戰(zhàn)。為了增強(qiáng)攜帶核酸的陽離子脂質(zhì)體在靶組織中的分布,研究人員用多肽和小分子修飾了脂質(zhì)體表面。例如,研究了Arg-Gly-Asp(RGD)肽修飾的脂質(zhì)體增強(qiáng)...
目前核酸遞送系統(tǒng)的局限性之一是無法深入穿透組織和***,如實(shí)體瘤和大腦。通常情況下,只能到達(dá)并轉(zhuǎn)染細(xì)胞的外層,從而導(dǎo)致***效果不佳。愛潑斯坦巴爾病毒(EBV),一種人類**病原體,似乎通過劫持**微環(huán)境中的外泌體進(jìn)行細(xì)胞間通訊來克服這一點(diǎn)。外泌體是小的膜囊泡...
PHP是由天然來源的羥基脯氨酸(如膠原蛋白、明膠和其他蛋白質(zhì))制成的,是***個(gè)用作基因載體的聚酯。在生理環(huán)境中,PHP可以在不到兩個(gè)小時(shí)的時(shí)間內(nèi)失去其初始分子量的50%。然而,PHP完全分解為其等效單體需要三個(gè)月的時(shí)間,分解產(chǎn)物是單體羥脯氨酸。雖然PHP酯在...
羅丹明123一種可對活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。羅丹明123可透過細(xì)胞膜且在活細(xì)胞的線粒體內(nèi)聚集,并發(fā)出黃綠色熒光。羅丹明123***用作檢測線粒體膜電位,也常用于細(xì)胞凋亡檢測。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與羅丹明123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性,此熒光染料被應(yīng)用...
轉(zhuǎn)染是將外來核酸傳遞到真核細(xì)胞中以修飾宿主細(xì)胞的遺傳組成的過程。在過去的30年里,轉(zhuǎn)染因其廣泛應(yīng)用于研究疾病的細(xì)胞過程和分子機(jī)制而越來越受歡迎。了解疾病的分子途徑,可以發(fā)現(xiàn)可能用于疾病診斷和預(yù)后的特定生物標(biāo)志物。此外,轉(zhuǎn)染可以作為基因***中的策略之一,用于*...
脂質(zhì)體質(zhì)量控制脂質(zhì)體的質(zhì)量控制是確保其制備過程中符合一定標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范的重要步驟,主要包括以下幾個(gè)方面:1.原材料質(zhì)量控制:對用于制備脂質(zhì)體的原材料進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制,包括磷脂質(zhì)、膽固醇、表面活性劑、PEG衍生物等。確保原材料的純度、穩(wěn)定性和符合規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。2...
陰離子脂體由帶負(fù)電荷的脂質(zhì)組成,如磷脂酰甘油、磷脂酰絲氨酸和磷脂酸,由于它們被巨噬細(xì)胞攝取,循環(huán)時(shí)間縮短。帶負(fù)電的小脂質(zhì)體比其對應(yīng)的中性和帶正電的脂質(zhì)體被***得更快。此外,在帶負(fù)電荷的小脂質(zhì)體中觀察到一種雙相***模式。 另一方面, 與中性和帶正電的脂質(zhì)體相...
肌內(nèi)注射脂質(zhì)體不能引起強(qiáng)烈的毒性反應(yīng),這與肺內(nèi)或靜脈注射途徑的情況不同。幾項(xiàng)體內(nèi)研究表明,pDNA載體的肺內(nèi)遞送是促炎th1樣細(xì)胞因子的產(chǎn)生和隨后浸潤細(xì)胞涌入肺區(qū)域的原因。在任何情況下,陽離子脂質(zhì)本身不會(huì)引起免疫反應(yīng),而且這種效果不是由于pDNA制備中存在內(nèi)*...
羰花青染料***用作Di來標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。長鏈羰花青包括DiO(DiOC18(3))、DiI(DiIC18(3))、DiD(DiIC18(5))和DiR,以及二烷基氨基苯乙烯基染料DiA(4-Di-16-ASP)用于標(biāo)記膜和其他疏水結(jié)構(gòu)...
將靶向成像方式與病變定向***相結(jié)合,可以確定與積極***反應(yīng)可能性有關(guān)的幾個(gè)生物學(xué)相關(guān)事實(shí)。特別令人感興趣的問題是,目標(biāo)是否存在,藥物是否達(dá)到目標(biāo),以及預(yù)期目標(biāo)是否真的是正在***的目標(biāo)。有多種有趣的生物過程適合應(yīng)用靶向超聲成像來監(jiān)測藥物遞送的療效。我們的研...
選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑可能取決于幾個(gè)因素,包括轉(zhuǎn)染核酸的類型和轉(zhuǎn)染的復(fù)雜性(單轉(zhuǎn)染或共轉(zhuǎn)染)。一些試劑如Effectene和TransIT-X2是專門用于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染的,而一些試劑如Lipofectamine RNAiMAX更適合于小寡核苷酸的轉(zhuǎn)染。哺乳動(dòng)物原代...
三:貼壁細(xì)胞染色1、將貼壁細(xì)胞培養(yǎng)于無菌蓋玻片上。2、從培養(yǎng)基中移走蓋玻片,吸走過量培養(yǎng)液,但要使表面保持濕潤。3、在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。4、37℃孵育細(xì)胞2~20min,不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時(shí)間不同??梢?...
超聲微泡的粒徑大小直接影響微泡的動(dòng)物的體內(nèi)滲透和代謝。首先,與傳統(tǒng)藥物相比,超聲造影劑微泡相對較大。微泡的直徑一般為1-10um。**血管特別具有滲透性,通常有較大的內(nèi)皮間隙;然而,造影劑微泡通常太大而無法脫離脈管系統(tǒng)。在Wheatley等人**近的一篇文章中...
由于CRISPR/Cas的發(fā)現(xiàn),基因組編輯領(lǐng)域經(jīng)歷了一場**。細(xì)菌免疫系統(tǒng)的CRIPSR/Cas成分導(dǎo)致全基因組雙鏈DNA斷裂,并通過內(nèi)部DNA修復(fù)過程促進(jìn)基因編輯。有研究指出,陽離子聚合物聚乙二胺-環(huán)糊精(PC)有助于編碼Cas9和sgRNA的質(zhì)粒的有效遞送...
所需的CY3-NHS酯的量取決于待標(biāo)記蛋白的量,以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例:假設(shè)所需的標(biāo)記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000),用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯,得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL...
作為一般指導(dǎo)原則,建議使用早期傳代的細(xì)胞以獲得良好的轉(zhuǎn)染效率,特別是涉及原代或干細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。另一個(gè)有趣的觀察結(jié)果是,37℃是可以幫助原代細(xì)胞達(dá)到更高轉(zhuǎn)染效率的比較好培養(yǎng)溫度。這種現(xiàn)象可能是因?yàn)?7攝氏度是哺乳動(dòng)物細(xì)胞的比較好培養(yǎng)溫度。同時(shí),在轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞時(shí),化...
DOPC和DEPC是兩親性兩性離?磷脂,可形成蜂窩狀腔室的壁。帶負(fù)電荷的DPPG可阻?MVLs聚集。中性脂類(如三油酯和?油三酯)在雙層交叉點(diǎn)處充當(dāng)疏?空間填充劑,并穩(wěn)定這些膜結(jié)構(gòu)。沒有中性脂質(zhì),將形成常規(guī)的ULV或MLV,?不是MVLs。配?中中性脂的?量決...
**近的研究已經(jīng)確定了陽離子脂質(zhì)體(CLs)的某些特征,這些特征增強(qiáng)了它們在體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)核酸的能力。這些特征包括陽離子頭基團(tuán)及其鄰近的脂肪鏈在主鏈上呈1,2關(guān)系,醚鍵用于橋接脂肪鏈到主鏈,成對的油基鏈作為疏水系鏈。無論如何,這些特征雖然不能決定細(xì)胞培養(yǎng)中更好的轉(zhuǎn)染...
流式細(xì)胞術(shù)可以更精確地定量表達(dá)特定熒光基因的細(xì)胞,以評估轉(zhuǎn)染效率。另一種評估轉(zhuǎn)染效率的方法是通過監(jiān)測轉(zhuǎn)染后的特定蛋白表達(dá)。將轉(zhuǎn)基因引入細(xì)胞可能會(huì)改變由轉(zhuǎn)基因或細(xì)胞中其他基因編碼的蛋白質(zhì)的表達(dá)。同樣,轉(zhuǎn)染小RNA也可以調(diào)節(jié)宿主細(xì)胞中特定下游遺傳靶點(diǎn)的表達(dá)。免疫印...
常用抗體標(biāo)記熒光染料的特性及其應(yīng)用 1、FITC:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長525nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL1通道檢測;3)可用于熒光顯微鏡技術(shù)4)熒光強(qiáng)度易受PH值影響,P...
小動(dòng)物***成像技術(shù)(invivoimagingtechnology)是利用高靈敏度的光學(xué)檢測儀器直接檢測動(dòng)物***體內(nèi)的細(xì)胞活動(dòng)和基因行為研究的一類技術(shù),是近年來發(fā)展**快的生命科學(xué)研究方法,是**直接觀察細(xì)胞和分子在體內(nèi)行為的新興技術(shù),已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)...