熒光染料:能發(fā)出熒光的染料。在吸收紫外線或可見(jiàn)光后,能把短波長(zhǎng)的光轉(zhuǎn)變?yōu)椴ㄩL(zhǎng)較長(zhǎng)的可見(jiàn)光波而反射出來(lái),呈閃亮的鮮艷色彩。例如,酸性曙紅、熒光黃、紅汞以及某些分散染料等。它們大多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨(dú)使用,也可以組合成復(fù)合熒光染料使用。其中復(fù)合熒光染料是利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)合成的熒光染料,由距離非常近、能量可以在彼此間傳遞的一個(gè)供體及一個(gè)受體熒光物分子所組成。復(fù)合染料在受體分子的激發(fā)波長(zhǎng)被激發(fā),在供體分子的發(fā)射波長(zhǎng)發(fā)射一個(gè)光子。熒光染料發(fā)展非常迅速,已開(kāi)發(fā)的用于科研和臨床應(yīng)用的熒光染料已基本覆蓋了由紫外到可見(jiàn)光及紅外的整個(gè)光譜范圍。D-熒光素(D-Lucif...
為什么要使用熒光染料?雖然不同的染色技術(shù)(即考馬斯染色、銀染色、熒光染色)可用于可視化凝膠電泳分離的蛋白質(zhì),但使用熒光染料具有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。他們提供:高靈敏度:對(duì)于大多數(shù)分析物,熒光測(cè)量的靈敏度比吸光度測(cè)量高1000倍,即使在使用小樣本時(shí)也可以令人滿(mǎn)意地達(dá)到ppt(萬(wàn)億分之一)的檢測(cè)限。寬線性動(dòng)態(tài)范圍。輸出與樣品濃度成正比。低干擾:由于吸收光的材料數(shù)量眾多,分光光度測(cè)量通常會(huì)遇到干擾問(wèn)題。在進(jìn)行熒光測(cè)量時(shí)不會(huì)遇到這個(gè)問(wèn)題,因?yàn)橹挥猩贁?shù)材料具有熒光能力。高通量:熒光測(cè)量具有簡(jiǎn)單而強(qiáng)大的協(xié)議,并且可以自動(dòng)化用于高通量應(yīng)用。非磺化花青類(lèi)染料- 該組中的一些染料包括 cy3、cy3.3、cy5、cy5...
SuperFluor活化酯(與Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同)SuperFlour系列熒光探針,具有更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度,更廣的pH應(yīng)用范圍(pH4~10),更好的抗淬滅性。在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7等熒光染料。1.標(biāo)記效率低——計(jì)算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標(biāo)記的熒光團(tuán)少于4mol有以下原因:1)緩沖液中含有痕量伯銨成分,與染料反應(yīng)降低了標(biāo)記效率。如果蛋白已經(jīng)溶于含氨基的緩沖液(如Tris或氨基乙酸),標(biāo)記前用PBS透析。2)蛋白含量較低(≤1mg/mL)會(huì)影響標(biāo)記效率。3)標(biāo)記步驟中加入碳酸氫鈉的作用是將反應(yīng)混合物的...
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度**增強(qiáng),這類(lèi)染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對(duì)細(xì)胞染色,這類(lèi)染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散,比較好濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。它們的熒光顏**分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來(lái)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標(biāo)準(zhǔn)的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā),有著比DiI更長(zhǎng)的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng),在細(xì)胞和組織染色中更有價(jià)值。 D...
5(6)-FITC(Fluorescein5(6)-isothiocyanate)是一種胺活性衍生物的熒光染料,具有廣泛的應(yīng)用,作為抗體和其他探針標(biāo)記,用熒光顯微鏡,流式細(xì)胞儀、免疫熒光方法如ELISA和Western印跡實(shí)驗(yàn)。熒光素衍生物具有高吸收率、優(yōu)異的熒光量子產(chǎn)率和良好的水溶性,是流式細(xì)胞儀和免疫熒光中生物檢測(cè)**常用的熒光標(biāo)記之一。**常用的熒光素包括用于標(biāo)記蛋白質(zhì)(特別是抗體)的異硫氰酸熒光素[5(6)-FITC)],5-FITC和用于標(biāo)記肽和寡核苷酸的羧基熒光素(5-FAM和5(6)-FAM)。BIOFOUNT提供***的基于熒光素的染料、底物和偶聯(lián)物,以及一系列具有針對(duì)細(xì)胞標(biāo)記...
小動(dòng)物***成像技術(shù)(invivoimagingtechnology)是利用高靈敏度的光學(xué)檢測(cè)儀器直接檢測(cè)動(dòng)物***體內(nèi)的細(xì)胞活動(dòng)和基因行為研究的一類(lèi)技術(shù),是近年來(lái)發(fā)展**快的生命科學(xué)研究方法,是**直接觀察細(xì)胞和分子在體內(nèi)行為的新興技術(shù),已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域[1]。***動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像主要采用生物發(fā)光與熒光發(fā)光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是利用熒光素酶報(bào)告基因在***內(nèi)表達(dá)產(chǎn)生的熒光蛋白與體外注射的熒光素底物發(fā)生化學(xué)反映產(chǎn)生熒光。而熒光發(fā)光成像技術(shù)是將熒光物質(zhì)或熒光物質(zhì)標(biāo)記的小分子物質(zhì)如基因、細(xì)胞也可是小分子藥物、抗體、納米材料等導(dǎo)入到***體內(nèi),通過(guò)小動(dòng)物***成像系統(tǒng)的激發(fā)光源激發(fā)...
第二種***使用的DNA染色方法是Hoechst染料,**初由化學(xué)公司HoechstAG生產(chǎn)。Hoechst33258、Hoechst33342和Hoechst34580都是鄰苯二甲酰亞胺,具有向A-T富集區(qū)插入的趨勢(shì),因此后者不常使用。與DAPI相似,此類(lèi)染料受到紫外線激發(fā)并在455nm下發(fā)射比較大值,在無(wú)結(jié)合狀態(tài)下變?yōu)?10–540nm。Hoechst染料還具有細(xì)胞滲透作用,因此可用于固定細(xì)胞和活細(xì)胞。與DAPI不同是,Hoechst染料毒性更低。DNA染色劑碘化丙啶無(wú)法透過(guò)細(xì)胞膜。在細(xì)胞培養(yǎng)中,因?yàn)樵撊旧珓o(wú)法進(jìn)入完好的細(xì)胞內(nèi),所以常常被用來(lái)區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。碘化丙啶也是一種結(jié)合劑,但...
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖?。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對(duì)pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細(xì)胞電位追蹤劑的母核,所以它是在生物技術(shù)中非常有用的熒光染料。在熒光成像時(shí),Cy3的背景熒光一般認(rèn)為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來(lái)標(biāo)記蛋白,抗體,多肽等,它常見(jiàn)的使用是標(biāo)記核酸...
南京星葉生物科技有限公司各類(lèi)熒光染料 多肽、蛋白、抗體標(biāo)記:5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAMRA,SE6-TAMRA,SE5-ROX6-ROX5-ROX,SE6-ROX,SE***成像:脂溶性熒光染料CY3NHSesterCY3amineCY3maleimideCY3azideCY3COOHCY3alkyneCY3hydrazideCY3ThiolCY5amineCY5NHSesterCY5maleimideCY5azideCY...
一、體外生物發(fā)光試驗(yàn)熒光素試劑的制備:D-熒光素,鉀鹽,無(wú)菌純水,完全培養(yǎng)基(自行配置)1、用無(wú)菌水制備100X熒光素原液(15mg/ml),輕輕顛倒搖動(dòng)至熒光素完全溶解?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2、將D-luciferin,potassiumsalt溶解于預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基中制備成濃度為150μg/ml的工作液。用組織培養(yǎng)基1∶100稀釋儲(chǔ)存液,配置工作液(終濃度150μg/mL)3、去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基圖像分析前,向細(xì)胞培養(yǎng)板中添加1×熒光素工作液,然后進(jìn)行圖像分析-注射器濾膜過(guò)濾除菌,0.2μm注:成像前在37℃下對(duì)細(xì)胞進(jìn)行短時(shí)間孵育可增強(qiáng)信號(hào)。南京星葉生物熒光染料標(biāo)記蛋白。...
過(guò)標(biāo)記——計(jì)算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標(biāo)記的熒光團(tuán)大于10mol。雖然過(guò)標(biāo)記的蛋白也可以使用,但可能會(huì)引起蛋白的聚集、降低抗體結(jié)合抗原的特異性,這些都會(huì)造成非特異性結(jié)合。過(guò)標(biāo)記還會(huì)引起熒光淬滅。可以增加蛋白或減少反應(yīng)時(shí)間。3.未結(jié)合染料難以去除——盡管大部分時(shí)候用分離柱可以較好的純化蛋白偶聯(lián)物,但仍可能會(huì)有痕量的游離染料留在偶聯(lián)物溶液中,會(huì)使標(biāo)記計(jì)算的值偏高。可用分離柱再次分離或透析去除。4.蛋白或蛋白偶聯(lián)物無(wú)法洗脫——不要再加緩沖液,只需再次離心一次或幾次。Super Flour 系列熒光探針,具有更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度,更廣的pH應(yīng)用范圍(pH 4~10), 更好的抗淬滅性。內(nèi)蒙古南...
一種發(fā)光雜環(huán)化合物,存在于生物發(fā)光的生物體中,如螢火蟲(chóng)。在含有三磷酸腺苷的情況下,通過(guò)熒光素酶氧化脫羧產(chǎn)生光??捎糜跓晒馑孛干锇l(fā)光成像和細(xì)胞高通量篩選應(yīng)用。D-熒光素(D-Luciferin)是螢火熒光素酶底物,其量子效率為0.88,是Luminol的20倍。反應(yīng)原理:首先,在鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與ATP反應(yīng),接著它被氧化形成二氧雜環(huán)丁烷結(jié)構(gòu)并發(fā)出黃綠色的光。Luciferin-luciferase發(fā)光用于ATP監(jiān)控以測(cè)定細(xì)胞活力以及細(xì)菌計(jì)數(shù)。它還用于報(bào)告基因檢測(cè)。可與小動(dòng)物***成像系統(tǒng)配套使用,用于標(biāo)記LUC基因后的體內(nèi)***熒光檢測(cè)。D-熒光素游離酸(D-Luciferin,f...
細(xì)胞培養(yǎng)后,需要對(duì)其生長(zhǎng)情況、形態(tài)甚至生物學(xué)性狀進(jìn)行觀察。由于細(xì)胞小而復(fù)雜,若不借助適當(dāng)?shù)氖侄?,難以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu),更難發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前,已有多種研究細(xì)胞的技術(shù),從光學(xué)顯微鏡到電子顯微鏡,從一般細(xì)胞化學(xué)法到免疫化學(xué)法。細(xì)胞染色是研究細(xì)胞生物學(xué)特征的一種常用手段,然而,對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)新手來(lái)說(shuō),想要獲得一張漂亮的細(xì)胞染色圖并不容易。染色試劑不會(huì)選、細(xì)胞染色不均勻、染色時(shí)切片脫落等都是很常見(jiàn)的問(wèn)題。 細(xì)胞膜常用染料DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見(jiàn)的細(xì)胞膜染料(見(jiàn)表2),它們是一族親脂性的熒光染料,用于細(xì)胞的形態(tài)學(xué)和結(jié)構(gòu)研究。該系列染料進(jìn)入細(xì)胞膜后,會(huì)在整個(gè)...
熒光染料,由于靈敏度高,操作方便,逐漸取代了放射性同位素作為檢測(cè)標(biāo)記,其廣泛應(yīng)用于熒光免疫,熒光探針,細(xì)胞染色等。包括特異性的DNA染色,用于染色體分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等相關(guān)研究。另有很多核酸染料在多色染色系統(tǒng)中是非常有用的復(fù)染劑,可作為背景對(duì)照,標(biāo)記細(xì)胞核使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系一目了然。熒光標(biāo)記的單克隆抗體技術(shù)為流式細(xì)胞儀在研究細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)各種功能性抗原、**基因蛋白等領(lǐng)域擴(kuò)展了無(wú)限的應(yīng)用空間。熒光探針可以通過(guò)蛋白質(zhì)交聯(lián)劑共價(jià)結(jié)合在單克隆抗體上。免疫熒光標(biāo)記**常用的染料有異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻紅蛋白(PE)以及AlexaFl...
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖?。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對(duì)pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細(xì)胞電位追蹤劑的母核,所以它是在生物技術(shù)中非常有用的熒光染料。在熒光成像時(shí),Cy3的背景熒光一般認(rèn)為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來(lái)標(biāo)記蛋白,抗體,多肽等,它常見(jiàn)的使用是標(biāo)記核酸...
三、流式細(xì)胞儀分析1、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,接種到孔板,過(guò)夜培養(yǎng)。2、如果要進(jìn)行藥物刺激,在細(xì)胞中加入感興趣的藥物進(jìn)行干預(yù),繼續(xù)培養(yǎng)一定時(shí)間后,收集細(xì)胞,PBS清洗2次。3、加入Rhodamine123工作液重懸細(xì)胞,37℃避光孵育15min或更長(zhǎng)時(shí)間?!咀⒁狻浚河捎诩?xì)胞種類(lèi)和實(shí)驗(yàn)體系不同,Rhodamine123工作液濃度和孵育時(shí)間可以根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)或參考文獻(xiàn)自行調(diào)整。4、用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。 四、實(shí)驗(yàn)案例1、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期A549細(xì)胞接于六孔板(1*106+2mlDMEM培養(yǎng)基),37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)4-24h待其貼壁,以便后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作.2、棄掉培養(yǎng)液,PBS洗滌兩次.3、用培養(yǎng)基(無(wú)血清)稀...
一種發(fā)光雜環(huán)化合物,存在于生物發(fā)光的生物體中,如螢火蟲(chóng)。在含有三磷酸腺苷的情況下,通過(guò)熒光素酶氧化脫羧產(chǎn)生光。可用于熒光素酶生物發(fā)光成像和細(xì)胞高通量篩選應(yīng)用。D-熒光素(D-Luciferin)是螢火熒光素酶底物,其量子效率為0.88,是Luminol的20倍。反應(yīng)原理:首先,在鎂離子存在下熒光素酶使熒光素與ATP反應(yīng),接著它被氧化形成二氧雜環(huán)丁烷結(jié)構(gòu)并發(fā)出黃綠色的光。Luciferin-luciferase發(fā)光用于ATP監(jiān)控以測(cè)定細(xì)胞活力以及細(xì)菌計(jì)數(shù)。它還用于報(bào)告基因檢測(cè)??膳c小動(dòng)物***成像系統(tǒng)配套使用,用于標(biāo)記LUC基因后的體內(nèi)***熒光檢測(cè)。D-熒光素游離酸(D-Luciferin,f...
管可用于實(shí)驗(yàn)室的熒光團(tuán)數(shù)量眾多,但這些染料通常屬于以下三組之一:熒光染料:這些是用于在體外標(biāo)記生物相關(guān)分子的小型有機(jī)天然或合成熒光分子。該組中的一些熒光染料包括熒光素、溴化乙錠和花青。熒光蛋白:這些是較大的、生物制造的蛋白質(zhì),由于它們的大分子結(jié)構(gòu)而發(fā)出熒光。GFP、RFP和YFP是屬于該組的一些染料。量子點(diǎn):這些高熒光合成納米晶體由半導(dǎo)體材料制成。隨著熒光基本特性的廣泛應(yīng)用和該領(lǐng)域的顯著進(jìn)步,已經(jīng)針對(duì)特定應(yīng)用和儀器開(kāi)發(fā)和優(yōu)化了數(shù)百種活性熒光染料。同樣,多年來(lái),大量復(fù)雜的熒光技術(shù)(例如,F(xiàn)RET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS)也在不斷發(fā)展。異硫氰酸熒光素含有一個(gè)異硫氰酸酯反應(yīng)基團(tuán)這有...
花青類(lèi)熒光染料屬于共振染料,其特征在于具有離域電荷的氮原子(兩個(gè)氮原子)之間的聚甲炔染料。由于與生物分子的低非特異性結(jié)合以及明亮的熒光,花青類(lèi)熒光染料已成為一些當(dāng)下流行的用于標(biāo)記核酸的熒光染料。花青類(lèi)染料分為兩大類(lèi):非磺化花青類(lèi)染料-該組中的一些染料包括cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7和cy7.5。在大多數(shù)情況下,這些染料的特點(diǎn)是水溶性低,但胺的鹽酸鹽和酰肼除外。它們首先溶解在有機(jī)溶劑(共溶劑)中,然后在生物分子標(biāo)記期間添加到含有生物分子的溶液中。而“Cy”**花青,***個(gè)數(shù)字**存在于亞油啉基團(tuán)之間的碳原子數(shù)。另一方面,添加0.5后綴以表示苯并稠合花青。這些熒光染料通常用于有...
注:建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,從而確定比較高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期。保存和操作的過(guò)程中都要避光。另外水溶性?xún)?chǔ)存液過(guò)濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復(fù)凍融。如果有條件,對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤猓ǚ乐寡趸€(wěn)定性和保存時(shí)間更長(zhǎng)。 注射方式,動(dòng)物類(lèi)型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射,因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,確定比較好信號(hào)平臺(tái)期和比較好的檢測(cè)時(shí)間。熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應(yīng)用上沒(méi)有差別,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻(xiàn)來(lái)看,鉀鹽的使用率遠(yuǎn)高于鈉鹽,尤其是體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。兩者功效相同。 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)...
CY7是一種CY染料。CY為花菁(Cyanine)的縮寫(xiě),是由奇數(shù)個(gè)甲基單元連接的兩個(gè)氮原子組成的化合物。菁類(lèi)化合物具有波長(zhǎng)長(zhǎng)、吸收和發(fā)射可調(diào)、消光系數(shù)高的特點(diǎn)CY系染料常被用于蛋白、抗體以及小分子化合物的標(biāo)記,對(duì)于蛋白抗體的標(biāo)記,可以通過(guò)簡(jiǎn)單的混合反應(yīng)來(lái)完成結(jié)合,下面我們介紹了蛋白抗體標(biāo)記的標(biāo)記方法,具有一定的參考意義。一、比較好蛋白制備1)為獲得標(biāo)記效果,請(qǐng)制備蛋白(抗體)濃度為2mg/mL。2)蛋白溶液的pH值為8.5±0.5。如果pH值低于8.0,應(yīng)使用1M3)如果蛋白濃度低于2mg/mL,標(biāo)記效率會(huì)**降低。為獲得比較好標(biāo)記效率,建議**終蛋白濃度范圍為2-10mg/mL。4)蛋白必...
納米粒子納米顆粒是指尺寸在1到100納米之間的顆粒。由于它們的小尺寸,納米粒子通常用于不同類(lèi)型的細(xì)胞和組織的熒光成像。當(dāng)今生物成像中常用的一些納米材料包括碳點(diǎn)、貴金屬納米顆粒、聚合物點(diǎn)、量子點(diǎn)和熒光摻雜二氧化硅等。在成像中,與其他分子熒光團(tuán)和探針相比,納米顆粒/納米材料具有多種優(yōu)勢(shì),使其成為理想的選擇。除了提高亮度外,納米粒子是惰性的并且往往分布均勻,這有助于在成像過(guò)程中獲得更好的結(jié)果。此外,與各種分子熒光團(tuán)相比,納米顆粒和納米材料沒(méi)有細(xì)胞毒性,并且不受非特異性結(jié)合問(wèn)題的影響。由于這些特性,大多數(shù)熒光納米顆粒(染色納米顆粒)可以?xún)?nèi)化到細(xì)胞/組織中,并容易靶向給定部位。D-熒光素是熒光素酶 (L...
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖?。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對(duì)pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光顯微鏡中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的濾片觀察,所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy3也是Dil等細(xì)胞電位追蹤劑的母核,所以它是在生物技術(shù)中非常有用的熒光染料。在熒光成像時(shí),Cy3的背景熒光一般認(rèn)為比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用來(lái)標(biāo)記蛋白,抗體,多肽等,它常見(jiàn)的使用是標(biāo)記核酸...
SUPERGreenI(10,000×DMSO溶液,電泳級(jí))儲(chǔ)存條件及注意事項(xiàng)4℃避光可保存12個(gè)月。本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點(diǎn)是18.5℃,使用前請(qǐng)放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點(diǎn)●無(wú)毒性:屬花菁類(lèi)染料,容易生物降解,無(wú)致*毒性。●靈敏度高:至少可檢出20pgDNA,高于EB染色法25~100倍?!裥旁氡雀撸簶悠窡晒庑盘?hào)強(qiáng),背景信號(hào)低?!癫僮骱?jiǎn)單:無(wú)須脫色或沖洗,即可直接用紫外凝膠透射儀或可見(jiàn)光透射儀觀察。●適用范圍廣:可適用于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場(chǎng)凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等?!袷褂梅奖悖簩?duì)分子生物學(xué)中常用的酶(如:Taq酶、反...
與花青和羅丹明染料一樣,熒光素也是一種有機(jī)染料。熒光素的比較大吸收波長(zhǎng)為494nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)為521nm(通常吸收藍(lán)色范圍內(nèi)的光并發(fā)射綠色范圍內(nèi)的光),熒光素是一種高熒光物質(zhì)。即使在非常少量的情況下也可以檢測(cè)到它,并且在與抗體結(jié)合時(shí)用于顯微鏡檢查。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。與許多其他熒光染料一樣,熒光素價(jià)格低廉且易于使用,使其成為生物學(xué)研究中很受歡迎的染料之一。與大多數(shù)其他染料不同,熒光素在水溶液中是無(wú)毒的。因此,它是極少數(shù)用作地下水示蹤劑的染料之一。南京星葉生物科技有限公司Super Fluor系列(效果同Alexa Fluor 系列)。新疆熒光染料...
細(xì)胞培養(yǎng)后,需要對(duì)其生長(zhǎng)情況、形態(tài)甚至生物學(xué)性狀進(jìn)行觀察。由于細(xì)胞小而復(fù)雜,若不借助適當(dāng)?shù)氖侄?,難以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu),更難發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前,已有多種研究細(xì)胞的技術(shù),從光學(xué)顯微鏡到電子顯微鏡,從一般細(xì)胞化學(xué)法到免疫化學(xué)法。細(xì)胞染色是研究細(xì)胞生物學(xué)特征的一種常用手段,然而,對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)新手來(lái)說(shuō),想要獲得一張漂亮的細(xì)胞染色圖并不容易。染色試劑不會(huì)選、細(xì)胞染色不均勻、染色時(shí)切片脫落等都是很常見(jiàn)的問(wèn)題。 細(xì)胞膜常用染料DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見(jiàn)的細(xì)胞膜染料(見(jiàn)表2),它們是一族親脂性的熒光染料,用于細(xì)胞的形態(tài)學(xué)和結(jié)構(gòu)研究。該系列染料進(jìn)入細(xì)胞膜后,會(huì)在整個(gè)...
如何選擇的染料? 考慮到熒光染料種類(lèi)繁多,您如何為您的特定應(yīng)用選擇使用哪種染料?以下是您需要考慮的一些因素?!c實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的兼容性:雖然它們可能與其他熒光團(tuán)共享一些光譜相似性,但每種染料都是***的,并且具有不同的功能、激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)、波段形狀和寬度以及光穩(wěn)定性。為確保成功,請(qǐng)選擇與您的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)相輔相成的一種。與設(shè)備的兼容性:選擇與您正在使用的照明源相匹配的染料。在選擇合適的熒光儀器時(shí),請(qǐng)考慮儀器的靈敏度、動(dòng)態(tài)范圍、穩(wěn)定性和通量、信噪比和信空白比。為了獲得更好的結(jié)果,請(qǐng)確保染料的發(fā)射曲線與可用的檢測(cè)方法相匹配。與樣品中其他熒光材料的相容性:在雙重或三重標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,您選擇的染料的發(fā)射和激...
與花青和羅丹明染料一樣,熒光素也是一種有機(jī)染料。熒光素的比較大吸收波長(zhǎng)為494nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)為521nm(通常吸收藍(lán)色范圍內(nèi)的光并發(fā)射綠色范圍內(nèi)的光),熒光素是一種高熒光物質(zhì)。即使在非常少量的情況下也可以檢測(cè)到它,并且在與抗體結(jié)合時(shí)用于顯微鏡檢查。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。與許多其他熒光染料一樣,熒光素價(jià)格低廉且易于使用,使其成為生物學(xué)研究中很受歡迎的染料之一。與大多數(shù)其他染料不同,熒光素在水溶液中是無(wú)毒的。因此,它是極少數(shù)用作地下水示蹤劑的染料之一。熒光素的衍生物包括異硫氰酸熒光素、俄勒岡綠和羧基萘并熒光素等。中國(guó)香港熒光染料APC異硫氰酸熒光素(F...
熒光染料標(biāo)記蛋白或肽技術(shù)是一種常見(jiàn)的蛋白質(zhì)體外標(biāo)記技術(shù)。除了GFP等熒光蛋白的融合表達(dá)外,目標(biāo)蛋白還可以通過(guò)熒光染料標(biāo)記直接進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)操作,如***跟蹤、細(xì)胞分選等。 FITC熒光標(biāo)記的原理是什么? 熒光標(biāo)記所依賴(lài)的化合物稱(chēng)為熒光材料。熒光材料是指具有共軛雙鍵系統(tǒng)化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物。當(dāng)受到紫外線或藍(lán)紫光的照射時(shí),它可以被刺激為刺激狀態(tài)。當(dāng)激發(fā)狀態(tài)恢復(fù)到基本狀態(tài)時(shí),它會(huì)發(fā)出熒光。蛋白質(zhì)熒光標(biāo)記技術(shù)利用熒光材料的共價(jià)結(jié)合在目標(biāo)分子的基團(tuán)上,利用其熒光特性提供研究對(duì)象的信息。 Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖稀3啥紵晒馊玖螰luor 750熒光染料:...
小動(dòng)物***熒光成像技術(shù)是現(xiàn)***物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的一項(xiàng)重要技術(shù),因其具有操作簡(jiǎn)單、實(shí)時(shí)直觀、靈敏度高、實(shí)驗(yàn)成本低等特點(diǎn),已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)研究及藥物開(kāi)發(fā)等方面。納米材料在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,旨在解決傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)面臨的各種醫(yī)學(xué)挑戰(zhàn),包括生物利用度差,靶向特異性受損,全身和***毒性等。納米材料具有很多與眾不同的優(yōu)點(diǎn),比如多功能性、大的負(fù)載量、靶向性、血液循環(huán)時(shí)間長(zhǎng)等。納米材料在生物醫(yī)學(xué)中起著關(guān)鍵作用,可以有效攜帶成像探針、***劑或生物材料并傳遞至靶點(diǎn),如特定的***、組織甚至細(xì)胞。光學(xué)成像主要包括生物發(fā)光(bioluminescenceimaging,BLI)和焚光成像(...