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CY5熒光染料是一種被廣泛應(yīng)用于生物分子檢測(cè)和熒光成像等領(lǐng)域的高效、穩(wěn)定的熒光標(biāo)記試劑。它具有出色的熒光性能和良好的生物相容性。Cy5屬于小分子染料，其*大發(fā)射波長(zhǎng)為670nm，其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀，檢測(cè)通道一般是FL4通道。除流式細(xì)胞術(shù)外，Cy5同樣適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù)。需注意的是，Cy5與單核細(xì)胞和粒細(xì)胞的非特異性結(jié)合多，實(shí)驗(yàn)結(jié)果容易出現(xiàn)假陽(yáng)性。Cy5.5含有一個(gè)游離胺基,可與多種官能團(tuán)共軛,包括NHS酯和環(huán)氧化合物。激發(fā)和發(fā)射的最大值分別為678nm和694nm。Cy5.5已應(yīng)用于各種基于熒光的實(shí)驗(yàn)中。Cy5.5是一種遠(yuǎn)紅色(和近紅外)發(fā)射染...

熒光染料標(biāo)記蛋白或肽技術(shù)是一種常見(jiàn)的蛋白質(zhì)體外標(biāo)記技術(shù)。除了GFP等熒光蛋白的融合表達(dá)外，目標(biāo)蛋白還可以通過(guò)熒光染料標(biāo)記直接進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)操作，如***跟蹤、細(xì)胞分選等。 FITC熒光標(biāo)記的原理是什么？ 熒光標(biāo)記所依賴的化合物稱為熒光材料。熒光材料是指具有共軛雙鍵系統(tǒng)化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物。當(dāng)受到紫外線或藍(lán)紫光的照射時(shí)，它可以被刺激為刺激狀態(tài)。當(dāng)激發(fā)狀態(tài)恢復(fù)到基本狀態(tài)時(shí)，它會(huì)發(fā)出熒光。蛋白質(zhì)熒光標(biāo)記技術(shù)利用熒光材料的共價(jià)結(jié)合在目標(biāo)分子的基團(tuán)上，利用其熒光特性提供研究對(duì)象的信息。 CY7 是一種 CY 染料。CY 為花菁 (Cyanine) 的縮寫(xiě)，是由奇數(shù)個(gè)甲基單元連接的兩個(gè)氮原子組成...

SuperFluor活化酯（與Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同）SuperFlour系列熒光探針，具有更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度，更廣的pH應(yīng)用范圍（pH4～10）,更好的抗淬滅性。在生物熒光領(lǐng)域已逐漸替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7等熒光染料。1．標(biāo)記效率低——計(jì)算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標(biāo)記的熒光團(tuán)少于4mol有以下原因：1）緩沖液中含有痕量伯銨成分，與染料反應(yīng)降低了標(biāo)記效率。如果蛋白已經(jīng)溶于含氨基的緩沖液（如Tris或氨基乙酸），標(biāo)記前用PBS透析。2）蛋白含量較低(≤1mg/mL)會(huì)影響標(biāo)記效率。3）標(biāo)記步驟中加入碳酸氫鈉的作用是將反應(yīng)混合物的...

在1990年代***使用的綠色熒光蛋白（從水母維多利亞水母克?。┘捌溲苌铮ɡ缭寮t藍(lán)蛋白、藻膽蛋白和藻紅蛋白等）是當(dāng)今生物學(xué)研究中**常用的一些生物熒光團(tuán)。雖然熒光團(tuán)可用于在細(xì)胞、細(xì)菌和各種***中表達(dá)質(zhì)粒，但它們的使用有一些缺點(diǎn)，即它可能很耗時(shí)，并且在融合時(shí)還能夠改變某些細(xì)胞蛋白的正常生物學(xué)功能。此外，與許多其他熒光團(tuán)相比，生物熒光團(tuán)的光穩(wěn)定性和靈敏度較低。綠色熒光蛋白(GFP)綠色熒光蛋白是當(dāng)下流行的生物熒光團(tuán)之一，由238個(gè)氨基酸組成，其中三個(gè)負(fù)責(zé)發(fā)出可見(jiàn)綠色熒光的結(jié)構(gòu)。在水母本身中，熒光團(tuán)與水母發(fā)光蛋白（一種蛋白質(zhì)）相互作用，當(dāng)添加鈣時(shí)會(huì)發(fā)出藍(lán)光。通過(guò)DNA重組，研究人員可以使用負(fù)責(zé)...

異硫氰酸熒光素（fluoresceinisothiocyanate，F(xiàn)ITC）：FITC是應(yīng)用*為***的一種熒光素，經(jīng)激光激發(fā)后發(fā)出明亮的黃綠色熒光，*大發(fā)射波長(zhǎng)為525nm。FITC的熒光強(qiáng)度受PH影響較大，常隨著PH的降低而減弱，因此，在使用FITC時(shí)需格外注意溶液的酸堿度。a)電泳分離后的蛋白質(zhì)檢測(cè)(b)蛋白質(zhì)和肽的微測(cè)序分析(c)使用毛細(xì)管區(qū)帶電泳進(jìn)行分子分析(d)生物相互作用中的分子跟蹤和檢測(cè)(e)細(xì)胞和組織切片中的抗原檢測(cè)(f)通過(guò)標(biāo)記DNA片段進(jìn)行細(xì)胞凋亡檢測(cè)除了因其在水中的溶解性而易于用于偶聯(lián)物制備外，異硫氰酸熒光素還具有明亮的熒光（由于偶聯(lián)后的大消光系數(shù)和高量子產(chǎn)率），使其...

光熱***是另一個(gè)吲哚菁綠的重要應(yīng)用領(lǐng)域。在光熱***中，吲哚菁綠可以被引入**組織，并在近紅外激光的照射下吸收光能轉(zhuǎn)化為熱能，從而使**組織受到熱損傷，達(dá)到***的效果。吲哚菁綠的熒光性質(zhì)使得其在光熱***中具有很高的選擇性，可以精確地破壞**組織而對(duì)正常組織幾乎沒(méi)有影響。這種精細(xì)的***方式有助于減少***的副作用，提高***效果。吲哚菁綠在生物識(shí)別和藥物輸送方面也有廣泛的應(yīng)用。在生物識(shí)別中，吲哚菁綠可以與特定的生物分子結(jié)合，通過(guò)檢測(cè)其熒光信號(hào)來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)這些生物分子的定量分析。這種技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)研究、藥物篩選和疾病診斷中具有重要的意義。另外，吲哚菁綠還可以作為藥物輸送系統(tǒng)的一部分，將藥物包裹...

SUPERGreenI（10,000×DMSO溶液，電泳級(jí)）儲(chǔ)存條件及注意事項(xiàng)4℃避光可保存12個(gè)月。本品用DMSO溶解，因DMSO的熔點(diǎn)是18.5℃，使用前請(qǐng)放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點(diǎn)●無(wú)毒性：屬花菁類染料，容易生物降解，無(wú)致*毒性?！耢`敏度高：至少可檢出20pgDNA，高于EB染色法25～100倍。●信噪比高：樣品熒光信號(hào)強(qiáng)，背景信號(hào)低?！癫僮骱?jiǎn)單：無(wú)須脫色或沖洗，即可直接用紫外凝膠透射儀或可見(jiàn)光透射儀觀察?！襁m用范圍廣：可適用于多種凝膠電泳方法：瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場(chǎng)凝膠電泳和毛細(xì)管電泳等?！袷褂梅奖悖簩?duì)分子生物學(xué)中常用的酶（如：Taq酶、反...

藻紅蛋白-藻紅蛋白(PE)是一種紅色蛋白色素復(fù)合物，屬于藻膽蛋白家族。它可以在紅藻和隱植物中找到，它作為葉綠素色素的附屬物。在生物科學(xué)中，熒光團(tuán)可以與蛋白質(zhì)結(jié)合，例如用于抗原檢測(cè)的抗體等，因?yàn)樗軌虬l(fā)出明亮的熒光。由于熒光團(tuán)往往會(huì)很快發(fā)生光漂白，因此很少在熒光顯微鏡中使用。它經(jīng)常用于流式細(xì)胞術(shù)?！鶆e藻藍(lán)蛋白(APC)-與藻紅蛋白一樣，別藻藍(lán)蛋白也屬于藻膽蛋白家族，是從紅藻中分離出來(lái)的。在594和633nm的激光線激發(fā)下，熒光團(tuán)的比較大吸光度在650nm處，而熒光發(fā)射峰在66nm處。與熒光素偶聯(lián)物相比，熒光團(tuán)的靈敏度已顯示高5至10倍，并具有許多其他有益特性，包括大斯托克斯位移、高水溶性、長(zhǎng)波長(zhǎng)...

Cy5:激發(fā)波長(zhǎng)633/635nm，比較大發(fā)射波長(zhǎng)670nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL4通道檢測(cè);3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)同樣為小分子染料，非常適合需小分子染料的流式細(xì)胞術(shù)，熒光強(qiáng)度低于APC。5)與單核和粒細(xì)胞非特異性結(jié)合多，易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。 5、PE:激發(fā)波長(zhǎng)488nm，比較大發(fā)射波長(zhǎng)575nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氯離子激光器的流式細(xì)胞儀:2)在流式細(xì)胞儀的FL2通道檢測(cè);3)其熒光泯滅性強(qiáng)，不適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù)，但適用于激光共聚焦顯微鏡技術(shù)。 6、PE-TR:激發(fā)波長(zhǎng)48...

所需的CY3-NHS酯的量取決于待標(biāo)記蛋白的量，以及CY3-NHS的比較好摩爾比為10。示例：假設(shè)所需的標(biāo)記蛋白為500μL2mg/mLIgG(MW=150,000)，用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯，得到所需的CY3-NHS酯體積為5.05μL，詳細(xì)計(jì)算過(guò)程如下：1)mmol(IgG)=mg/mL(IgG)×mL(IgG)/MW(IgG)=2mg/mL×0.5mL/150，000mg/mmol=6.7×10-6mmol2)mmol(CY3-NHS酯)=mmol(IgG)×10=6.7×10-6mmol×10=6.7×10-5mmol3)uL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3...

注：建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線，從而確定比較高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期。保存和操作的過(guò)程中都要避光。另外水溶性儲(chǔ)存液過(guò)濾除菌后，可以-20℃或-80℃分裝凍存，避免反復(fù)凍融。如果有條件，對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤猓ǚ乐寡趸?，穩(wěn)定性和保存時(shí)間更長(zhǎng)。 注射方式，動(dòng)物類型以及體重等都會(huì)影響信號(hào)的發(fā)射，因此建議每次實(shí)驗(yàn)都要做熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線，確定比較好信號(hào)平臺(tái)期和比較好的檢測(cè)時(shí)間。熒光素鉀鹽和熒光素鈉鹽應(yīng)用上沒(méi)有差別，兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻(xiàn)來(lái)看，鉀鹽的使用率遠(yuǎn)高于鈉鹽，尤其是體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。兩者功效相同。 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)...

羰花青染料***用作Di來(lái)標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。長(zhǎng)鏈羰花青包括DiO(DiOC18(3))、DiI(DiIC18(3))、DiD(DiIC18(5))和DiR，以及二烷基氨基苯乙烯基染料DiA(4-Di-16-ASP)用于標(biāo)記膜和其他疏水結(jié)構(gòu)。DiIC16(3)具有比DiI(C18)更短的烷基取代基(C16)。它們?cè)谥|(zhì)環(huán)境中具有極高的消光系數(shù)、環(huán)境依賴性熒光和短的激發(fā)態(tài)壽命。它們?cè)谑覝叵率怯蜖钗?，在水中發(fā)出微弱熒光，但當(dāng)摻入膜中或與親脂性生物分子結(jié)合時(shí)，它們發(fā)出高熒光且相當(dāng)耐光。這些光學(xué)特性使它們成為細(xì)胞質(zhì)膜染色的理想選擇。一旦應(yīng)用于細(xì)胞，這些染料就會(huì)在質(zhì)膜內(nèi)橫向擴(kuò)散，導(dǎo)致...

小動(dòng)物***成像熒光染料是一種先進(jìn)的技術(shù)，可以在***小動(dòng)物體內(nèi)實(shí)時(shí)觀察和研究細(xì)胞、組織和***的功能和代謝過(guò)程。這種染料具有以下幾個(gè)特點(diǎn)：1.高度選擇性：小動(dòng)物***成像熒光染料能夠選擇性地與目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合，使其在***成像過(guò)程中能夠清晰地顯示出來(lái)，從而提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和信息。2.高亮度和穩(wěn)定性：該染料具有較高的熒光亮度和穩(wěn)定性，能夠在長(zhǎng)時(shí)間的觀察過(guò)程中保持熒光信號(hào)的強(qiáng)度和穩(wěn)定性，確保數(shù)據(jù)的可靠性和準(zhǔn)確性。3.低毒性和無(wú)刺激性：小動(dòng)物***成像熒光染料在使用過(guò)程中對(duì)小動(dòng)物的生理功能和行為沒(méi)有明顯的影響，具有較低的毒性和無(wú)刺激性，保證了實(shí)驗(yàn)的可靠性和動(dòng)物的福利。4.多功能性：該染料可以用于多...

1.DiD，DiO，DiI，DiR和DiS細(xì)胞膜染色液制備（1）配置DMSO或EtOH儲(chǔ)存液：儲(chǔ)存液用DMSO或EtOH配置濃度1～5mM。注意：未使用的儲(chǔ)存液保存在-20°C，避免反復(fù)凍融。（2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無(wú)血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲(chǔ)存液，配制濃度為1～5μM的工作液。注意：工作液的**終濃度是根據(jù)不同細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)來(lái)配制?？梢詮耐扑]濃度的十倍以上尋找比較好條件。 2.懸浮細(xì)胞染色（1）懸浮細(xì)胞密度為1×106/mL加入到工作液中。（2）在37℃培養(yǎng)細(xì)胞2～20分鐘，不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時(shí)間不同。（3）染色細(xì)胞試管在1000～1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。...

使用螢火蟲(chóng)熒光素酶（Fluc）作為報(bào)告基因和 D-熒光素作為底物的生物發(fā)光成像（BLI）是目前應(yīng)用*****的技術(shù)。將總信號(hào)強(qiáng)度相對(duì)于 D-熒光素注射后的時(shí)間進(jìn)行繪制，以生成時(shí)間-強(qiáng)度曲線。除了峰值信號(hào)外，還確定注射 D-熒光素后固定時(shí)間點(diǎn)（5、10、15 和 20 分鐘）的信號(hào)作為峰值信號(hào)的替代。給定時(shí)間-強(qiáng)度曲線中的信號(hào)針對(duì)曲線中的峰值信號(hào)進(jìn)行歸一化，以表示 D-熒光素注射后時(shí)間變化的模式[3]。每克體重注射 10 μL D-熒光素（腹膜內(nèi)或靜脈注射）儲(chǔ)備液：對(duì)于 20 g 小鼠，標(biāo)準(zhǔn) 150 mg/kg 注射通常約為 200 μL。在室溫下解凍 D-熒光素（鉀鹽或鈉鹽）并溶解在 dPBS...

羅丹明123一種可對(duì)活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。羅丹明123可透過(guò)細(xì)胞膜且在活細(xì)胞的線粒體內(nèi)聚集，并發(fā)出黃綠色熒光。羅丹明123***用作檢測(cè)線粒體膜電位，也常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與羅丹明123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性，此熒光染料被應(yīng)用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的ATP。羅丹明123的比較大激發(fā)波長(zhǎng)為507nm，比較大發(fā)射波長(zhǎng)為525nm。在熒光顯微鏡下觀察，呈現(xiàn)黃綠色熒光。 一：工作液配制用緩沖液或者預(yù)熱的培養(yǎng)液直接稀釋儲(chǔ)存液到需要的工作液濃度（1～20μM），充分混勻。具體的工作液濃度使用者要根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行調(diào)整?！咀⒁狻浚簩?duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，要控制好總體稀釋倍數(shù)，DMSO在...

D-熒光素是熒光素酶 (Luc) 的天然底物，可催化螢火蟲(chóng)產(chǎn)生典型的黃綠色光。該反應(yīng)的 560 nm 化學(xué)發(fā)光在幾秒鐘內(nèi)達(dá)到峰值，當(dāng)?shù)孜餆晒馑剡^(guò)量時(shí)，光輸出與熒光素酶濃度成正比。熒光素酶 (luc) 基因是用于研究和藥物篩選的流行報(bào)告基因?；瘜W(xué)發(fā)光技術(shù)幾乎沒(méi)有背景，使得 luc 報(bào)告基因成為檢測(cè)低水平基因表達(dá)的理想選擇。標(biāo)準(zhǔn)閃爍計(jì)數(shù)器可以可靠地測(cè)量低至 0.02 pg 的熒光素酶。除了作為基因表達(dá)報(bào)告者的作用外，熒光素酶還常用于極其靈敏的 ATP 檢測(cè)中[1]。我們提供螢火蟲(chóng)熒光素酶 (HY-P1004)、熒光素游離酸 (HY-12591A) 及其水溶性鈉鹽 (HY-12591) 和鉀鹽 (H...

羅丹明屬于呫噸族。與市場(chǎng)上的許多其他染料相比，羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性，使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們?cè)诰酆衔锛{米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測(cè)、活細(xì)胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染料的衍生物也用作：分子開(kāi)關(guān)，病毒表面修飾，化學(xué)傳感器，硫醇。不同類型的染料通過(guò)它們各自的取代基（R1、R2、R3、R4和G）來(lái)區(qū)分。由于它們的差異，這些熒光染料在溶液中也表現(xiàn)出不同的光物理特性（例如不同的熒光壽命和發(fā)射比較大值）。氨基被剛性化的羅丹明染料無(wú)論溫度范圍如何都表現(xiàn)出高量子產(chǎn)率，而在每個(gè)氮處具有兩個(gè)烷基取代基的那些表現(xiàn)出活化的內(nèi)...

南京星葉生物科技有限公司各類熒光染料 多肽、蛋白、抗體標(biāo)記：5(6)-FAM5(6)-FAM5-FAM6-FAM5(6)-FAM,SE5-FAM,SE6-FAM,SE5(6)-TAMRA5-TAMRA6-TAMRA5(6)-TAMRA,SE5-TAMRA,SE6-TAMRA,SE5-ROX6-ROX5-ROX,SE6-ROX,SE***成像：脂溶性熒光染料CY3NHSesterCY3amineCY3maleimideCY3azideCY3COOHCY3alkyneCY3hydrazideCY3ThiolCY5amineCY5NHSesterCY5maleimideCY5azideCY...

熒光染料在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中具有廣泛的應(yīng)用1、細(xì)胞膜標(biāo)記：可以使用熒光染料標(biāo)記細(xì)胞膜，以觀察和研究細(xì)胞膜的動(dòng)態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。2、染色體和DNA標(biāo)記：用熒光染料標(biāo)記染色體或DNA，可以觀察和分析DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、修復(fù)等過(guò)程3、蛋白質(zhì)標(biāo)記：通過(guò)熒光染料標(biāo)記蛋白質(zhì)，可以研究蛋白質(zhì)的相互作用、定位和運(yùn)動(dòng)等特性。4、細(xì)胞器標(biāo)記：使用特定波長(zhǎng)的熒光染料可以標(biāo)記和可視化細(xì)胞中的線粒體、溶酶體等細(xì)胞器。5、神經(jīng)科學(xué)應(yīng)用：熒光染料在神經(jīng)科學(xué)中也有廣泛應(yīng)用，如標(biāo)記神經(jīng)元和突觸，觀察神經(jīng)信號(hào)的傳遞等。6、基因表達(dá)分析：通過(guò)熒光染料標(biāo)記基因表達(dá)產(chǎn)物，可以定量分析基因的表達(dá)水平和細(xì)胞中的分布情況。Super Flour 系列熒光...

染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一類親脂性熒光染料家族，用于標(biāo)記細(xì)胞膜和疏水性組織。這是一類環(huán)境敏感型熒光染料，當(dāng)它們與膜結(jié)合或者與親脂性生物分子(例如蛋白質(zhì)，雖然在水中其熒光強(qiáng)度很弱)結(jié)合時(shí)，其熒光強(qiáng)度***增強(qiáng)。它們具有很高的淬滅系數(shù)，偏光依賴性和很短的激發(fā)壽命。一旦應(yīng)用于細(xì)胞中，這種染料會(huì)在細(xì)胞內(nèi)質(zhì)膜中逐步擴(kuò)散，導(dǎo)致在其比較好濃度條件下，將整個(gè)細(xì)胞染色。它們不同的熒光顏色：DiI（橙色熒光）、DiO（綠色熒光）、DiD（紅色熒光）、DiR（深紅色熒光），為活細(xì)胞多色彩熒光成像分析和流式細(xì)胞術(shù)提供了一種便捷的工具。DiO和DiI可以分別與標(biāo)準(zhǔn)的FITC和TRITC濾光器一同使用...

第二種***使用的DNA染色方法是Hoechst染料，**初由化學(xué)公司HoechstAG生產(chǎn)。Hoechst33258、Hoechst33342和Hoechst34580都是鄰苯二甲酰亞胺，具有向A-T富集區(qū)插入的趨勢(shì)，因此后者不常使用。與DAPI相似，此類染料受到紫外線激發(fā)并在455nm下發(fā)射比較大值，在無(wú)結(jié)合狀態(tài)下變?yōu)?10–540nm。Hoechst染料還具有細(xì)胞滲透作用，因此可用于固定細(xì)胞和活細(xì)胞。與DAPI不同是，Hoechst染料毒性更低。DNA染色劑碘化丙啶無(wú)法透過(guò)細(xì)胞膜。在細(xì)胞培養(yǎng)中，因?yàn)樵撊旧珓o(wú)法進(jìn)入完好的細(xì)胞內(nèi)，所以常常被用來(lái)區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。碘化丙啶也是一種結(jié)合劑，但...

3.粘壁細(xì)胞的染色（1）使粘壁的細(xì)胞在無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。（2）從培養(yǎng)基中移走蓋玻片，吸走過(guò)量培養(yǎng)液，將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。（3）在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液，輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。（4）在37℃培養(yǎng)細(xì)胞2～20分鐘，不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時(shí)間不同。（5）吸干染料工作液，用培養(yǎng)液洗蓋玻片2～3次，每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞，培養(yǎng)5～10分鐘，然后吸干培養(yǎng)基。 4.顯微鏡檢測(cè)（1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS濾光器的選擇參見(jiàn)表1。（2）多色染料的同時(shí)檢測(cè)，濾光器按照以下設(shè)定：a)DiI和DiO＝OmegaXF52，Chroma51004；b)DiI和D...

Hoechst33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低。用于細(xì)胞核染色時(shí)，推薦的Hoechst33258工作濃度為0.5-10μg/ml。儲(chǔ)存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。注意事項(xiàng)：Hoechst33258對(duì)人體有害，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液?？篃晒獯銣绶馄?P0126)可以向碧云天訂購(gòu)。為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作注意事項(xiàng)：Hoechst33342對(duì)人體有一定刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。為減緩熒光淬滅可以使...

其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)常用染料生物染料在細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組分鑒定中有著廣泛的應(yīng)用，除細(xì)胞膜研究外，我們經(jīng)常也會(huì)對(duì)一些其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)及成分進(jìn)行探索，例如線粒體、溶酶體、蛋白質(zhì)、細(xì)胞核等，而對(duì)于不同的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有不同的染料進(jìn)行染色細(xì)胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液（DAPIStainingSolution）常用于細(xì)胞核染色，可將細(xì)胞核染成藍(lán)色。鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）是細(xì)胞骨架的染色神器，羅丹明標(biāo)記的Phalloidin（TRITC-Phalloidin）可將細(xì)胞染成橙紅色，DAPI與Phalloidin染色液是研究細(xì)胞形態(tài)變化時(shí)經(jīng)常用到的兩種共染的試劑，染色效果可見(jiàn)A1-E1用TRIT...

Hoechst33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低。用于細(xì)胞核染色時(shí)，推薦的Hoechst33258工作濃度為0.5-10μg/ml。儲(chǔ)存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。注意事項(xiàng)：Hoechst33258對(duì)人體有害，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液?？篃晒獯銣绶馄?P0126)可以向碧云天訂購(gòu)。為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作注意事項(xiàng)：Hoechst33342對(duì)人體有一定刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。為減緩熒光淬滅可以使...

一、體外生物發(fā)光試驗(yàn)熒光素試劑的制備：D-熒光素，鉀鹽，無(wú)菌純水，完全培養(yǎng)基（自行配置）1、用無(wú)菌水制備100X熒光素原液（15mg/ml），輕輕顛倒搖動(dòng)至熒光素完全溶解?；靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2、將D-luciferin，potassiumsalt溶解于預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基中制備成濃度為150μg/ml的工作液。用組織培養(yǎng)基1∶100稀釋儲(chǔ)存液，配置工作液(終濃度150μg/mL)3、去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基圖像分析前，向細(xì)胞培養(yǎng)板中添加1×熒光素工作液，然后進(jìn)行圖像分析-注射器濾膜過(guò)濾除菌，0.2μm注：成像前在37℃下對(duì)細(xì)胞進(jìn)行短時(shí)間孵育可增強(qiáng)信號(hào)。異硫氰酸熒光素含有一個(gè)異硫氰酸...

羅丹明屬于呫噸族。與市場(chǎng)上的許多其他染料相比，羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性，使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們?cè)诰酆衔锛{米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測(cè)、活細(xì)胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染料的衍生物也用作：分子開(kāi)關(guān)，病毒表面修飾，化學(xué)傳感器，硫醇。不同類型的染料通過(guò)它們各自的取代基（R1、R2、R3、R4和G）來(lái)區(qū)分。由于它們的差異，這些熒光染料在溶液中也表現(xiàn)出不同的光物理特性（例如不同的熒光壽命和發(fā)射比較大值）。氨基被剛性化的羅丹明染料無(wú)論溫度范圍如何都表現(xiàn)出高量子產(chǎn)率，而在每個(gè)氮處具有兩個(gè)烷基取代基的那些表現(xiàn)出活化的內(nèi)...

一：染色液制備1、配制儲(chǔ)液：儲(chǔ)液用無(wú)水DMSO或無(wú)水EtOH配制，濃度1~5mM。注：未使用的儲(chǔ)液建議分裝后儲(chǔ)存在-20℃，避免反復(fù)凍融。2、工作液制備：用合適的緩沖液（如：無(wú)血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲(chǔ)液，配制濃度為1~5μM的工作液。注：工作液**終濃度建議根據(jù)不同細(xì)胞系和實(shí)驗(yàn)體系來(lái)優(yōu)化。建議從推薦濃度的10倍范圍內(nèi)開(kāi)始比較好濃度的摸索。二：懸浮細(xì)胞染色1、加入適當(dāng)體積的染色工作液重懸細(xì)胞，使其密度為1×106/mL。2、37℃孵育細(xì)胞2~20min，不同的細(xì)胞比較好培養(yǎng)時(shí)間不同?？梢?0min作為起始孵育時(shí)間，之后優(yōu)化體系以得到均一的標(biāo)記效果。3、孵育結(jié)束，1000~1500rp...