支原體預防的主要成分通常是指用于預防支原體污染的抗*素或化學試劑。在細胞培養(yǎng)中,預防支原體污染的措施包括在培養(yǎng)基中添加抗*素,以及采取其他預防措施來保持實驗室環(huán)境的清潔和無菌操作。以下是一些用于預防支原體污染的主要成分:
1. 四環(huán)素類抗*素:這類抗*素對支原體具有抑制作用,常用于治*和預防支原體感*。
2. 大環(huán)內酯類抗*素:例如羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素等,用于治*肺炎支原體感*。
3. 喹諾酮類藥物:如氧氟沙星、司帕沙星等,也用于治*肺炎支原體感*。
4. 其他抗*素:例如氨基糖苷類、氯霉素等,對支原體有較小的抑制作用。
細胞培養(yǎng)過程中支原體污染怎么預防?細胞支原體預防價格
支原體污染一旦發(fā)生,不僅對細胞培養(yǎng)造成嚴重影響,甚至可能導致實驗結果失真。而且支原體污染在細胞培養(yǎng)實驗中相當常見。因此,預防措施是確保細胞培養(yǎng)環(huán)境和實驗結果可靠性的重要手段。
01/ 良好的無菌技術及實驗操作,保證操作不會引入新的污染
02/ 保持實驗空間的清潔
03/ 確保從可靠的來源獲取細胞,減少不同細胞之間的交叉?zhèn)魅?/span>
04/ 防止交叉污染
05/ 減少氣溶膠生成
06/ 謹慎使用抗*素
07/ 定期支原體篩查
08/ 丟棄或處理受到支原體污染的細胞
09/ 保持良好的記錄
蘇州細胞支原體預防現貨支原體檢測方法LAMP法?
方法
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靈敏度
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優(yōu)勢
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劣勢
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培養(yǎng)法
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☆☆☆
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ü 便捷
ü 便宜
ü 金標準
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ü 費勞力
ü 耗時長
ü 需要特定的培養(yǎng)基
ü 特定支原體種類需要特定的培養(yǎng)基
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DNA染色
(DAPI or Hoescht)
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☆
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ü 迅速
ü 便捷
ü 便宜
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ü 可能難以判讀結果
ü 無法鑒別支原體種屬
ü 可能假陽性可能性
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間接染色
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☆☆☆
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ü 迅速
ü 便宜
ü 易檢測
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ü 費時
ü 需要細胞系指示
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ELISA
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☆☆
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ü 迅速
ü 客觀,易判讀結果
ü 可以鑒別支原體種屬
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ü 受抗體限制
ü 價格高
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免疫染色
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☆☆
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ü 迅速
ü 可檢測支原體種屬
ü 價格略高
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ü 可檢測的支原體種屬有限
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放射自顯影
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☆☆
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ü 迅速
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ü 難以判讀結果
ü 無法鑒別支原體種屬
ü 費勞力
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生物發(fā)光
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☆☆
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ü 迅速
ü 便捷
ü 便宜
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ü 難以判讀結果
ü 無法鑒別支原體種屬
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PCR
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☆☆☆
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ü 便宜
ü 迅速
ü 具有特異性
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ü 可能假陽性可能性
ü 檢測特異性依賴引物特異性
ü 需要提取DNA
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Real-Time PCR
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☆☆☆
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ü 便捷
ü 迅速
ü 具有特異性
ü 結果可靠
ü 高通量
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ü 可能假陽性可能性
ü 檢測特異性依賴引物特異性
ü 需要提取DNA
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LAMP
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☆☆
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ü 便捷
ü 無需DNA提取
ü *需10min左右的實驗操作時間
ü 具有特異性
ü 高通量
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ü 可能假陽性可能性
ü 檢測特異性依賴引物特異性
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細胞培養(yǎng)中支原體污染會對實驗結果產生多方面的影響,具體包括:
1. 細胞生長受影響:支原體污染可能導致細胞生長速度減慢,甚至停滯。
2. 細胞形態(tài)改變:支原體感*的細胞可能會出現形態(tài)的改變,如細胞體積增大、形態(tài)不規(guī)則等。
3. 細胞功能改變:支原體污染會影響細胞的代謝、增殖、分化等生理功能。
4. 細胞產物改變:支原體感*可能影響細胞產生的蛋白質、細胞因子等生物活性物質的表達和分泌。
5. 實驗結果不準確:支原體污染會干擾實驗結果的準確性,導致實驗數據不可靠。
6. 實驗重復性差:支原體污染的細胞培養(yǎng)批次間差異大,影響實驗的重復性。
7. 影響后續(xù)實驗:支原體污染的細胞培養(yǎng)產物用于后續(xù)實驗,如轉染、基因編輯等,可能會影響實驗效果。
8. 影響細胞培養(yǎng)產物的質量:支原體污染會影響細胞培養(yǎng)產物的質量,如疫苗、生物制品等。
9. 增加研究成本:支原體污染需要花費額外的時間和成本進行檢測、處理和重復實驗。
支原體去除試劑會影響細胞的生長狀態(tài)嘛?
qPCR法,即定量聚合酶鏈式反應(Quantitative Polymerase Chain Reaction)法,是一種高度靈敏和特異的分子生物學技術,用于檢測和定量DNA序列。在支原體檢測中,qPCR法的原理主要包括以下幾個步驟:
1. DNA提?。菏紫葟拇郎y樣本中提取DNA,這可能包括細胞培養(yǎng)上清液或組織樣本中的支原體DNA。
2. 設計特異性引物:針對支原體的保守DNA序列,如16S rRNA基因,設計特異性的DNA引物。
3. 熒光標記探針:使用熒光標記的探針,該探針與目標DNA序列互補,能夠在PCR擴增過程中與擴增的DNA結合。
4. Ct值確定:Ct值(閾值循環(huán)數)是指在PCR反應中,熒光信號強度超過預定閾值的循環(huán)次數。Ct值越低,表示樣本中支原體DNA的量越多。
5. 定量分析:通過標準曲線法或相對定量法,將Ct值轉換為支原體DNA的定量結果。
qPCR法的優(yōu)勢在于其高靈敏度和特異性,能夠檢測到非常低水平的支原體污染,并且可以在短時間內提供結果,這對于需要快速檢測的生物制品生產和細胞培養(yǎng)質量控制非常重要
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細胞培養(yǎng)支原體污染怎么去除?細胞支原體預防價格
細胞培養(yǎng)中如果污染了支原體,會有以下幾種影響:
1. 細胞生長受影響:支原體污染會導致細胞生長速度減慢,甚至停止生長。細胞可能會變圓,從培養(yǎng)瓶壁脫落。
2. 細胞形態(tài)變化:雖然某些細胞在支原體污染后形態(tài)變化不明顯,但有些細胞會出現體積增大,細胞碎片增多,培養(yǎng)瓶中細胞間隙出現膜狀沉積等現象。
3. 代謝和功能改變:支原體污染會影響細胞的代謝和功能,例如培養(yǎng)液中的精氨酸被大量消耗,引起細胞蛋白質、DNA、rRNA、mRNA的合成障礙。支原體活動還可能引起培養(yǎng)液成分和pH值的變化。
4. 實驗結果受影響:使用被支原體污染的細胞進行實驗會嚴重影響實驗結果,因為支原體會抑制細胞生長,導致染色體畸變,細胞膜抗原性改變,細胞復蘇后存活率降低等。
5. 細胞培養(yǎng)環(huán)境的污染:一株污染的細胞可能成為實驗室的污染源,對工作區(qū)域以及培養(yǎng)箱和液氮罐造成污染,進而污染其他細胞,導致其他細胞繼發(fā)性污染。
6. 科研結果的重復性問題:由于支原體污染,某些實驗結果可能能在支原體陽性的細胞中得到,導致科研結果的重復性受到影響
細胞支原體預防價格