支原體污染后的細(xì)胞是否應(yīng)該直接丟棄還是嘗試重新培養(yǎng),這取決于多種因素,包括細(xì)胞的重要性、污染的程度、以及是否有有效的方法來(lái)清*支原體。以下是一些處理支原體污染的常見方法:
1. 直接丟棄:對(duì)于非重要的細(xì)胞,如果培養(yǎng)中的細(xì)胞、WCB的細(xì)胞等,可以采取直接將培養(yǎng)物與用過(guò)的培養(yǎng)基滅活后丟棄的方式。
2. 使用支原體清除劑:支原體清除劑處理細(xì)胞,作用濃度為25μg/ml,兩周可以清*支原體。
3. 使用支原體清*培養(yǎng)基:每2~3天更換一次新鮮培養(yǎng)液,并用無(wú)菌的PBS洗滌細(xì)胞,處理15天后進(jìn)行支原體檢測(cè),以確定支原體是否被完全去除。
4. 支原體去除試劑:這是一種混合制劑,可以通過(guò)抑制DNA和支原體生長(zhǎng)所必須的相關(guān)蛋白合成來(lái)取得良好的支原體清*效果,且對(duì)細(xì)胞無(wú)傷害
支原體檢測(cè)的應(yīng)用場(chǎng)景?南京細(xì)胞支原體去除現(xiàn)貨
支原體是一類細(xì)菌,由于缺乏細(xì)胞壁,具有靈活的膜結(jié)構(gòu)。這使得支原體的形態(tài)多變,很難在高倍顯微鏡下識(shí)別。并且能夠抵抗壓力、溫度、滲透壓和脫水,對(duì)許多針對(duì)細(xì)胞壁合成的常見抗*素具有抗性。它們的體積非常小,直徑通常在0.15~0.3μm,因此能夠輕易地穿過(guò)過(guò)濾系統(tǒng)。支原體能在哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中可以高濃度生長(zhǎng),而不引起明顯的混濁或其他可見的污染跡象。
支原體通過(guò)特殊的前端細(xì)胞器與宿主細(xì)胞結(jié)合。支原體前端細(xì)胞器富含粘附素,可以附著在真核細(xì)胞上并穿透宿主細(xì)胞。支原體缺乏剛性細(xì)胞壁,可能有助于其與宿主細(xì)胞膜融合,并交換其膜和細(xì)胞質(zhì)成分。支原體的對(duì)細(xì)胞的毒性包括支原體侵襲性、分泌的致病酶和一些膜成分等都能夠有效地侵犯宿主。
廣州支原體預(yù)防試劑現(xiàn)貨細(xì)胞培養(yǎng)中污染了支原體會(huì)怎么樣?
支原體預(yù)防的策略主要包括以下幾個(gè)方面:
1. 控制污染源:通過(guò)定期檢測(cè)和去除細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染,確保細(xì)胞培養(yǎng)體系內(nèi)無(wú)支原體存在,從而獲得準(zhǔn)確有效的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
2. 改善無(wú)菌操作技術(shù):通過(guò)提高實(shí)驗(yàn)人員的操作技術(shù)和意識(shí),避免在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中引入支原體污染。
3.使用無(wú)菌設(shè)備和耗材:使用無(wú)菌的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備和耗材,如無(wú)菌培養(yǎng)基、血清等,減少支原體污染的風(fēng)險(xiǎn)。
4. 定期消毒和清潔:對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行定期的消毒和清潔,包括工作臺(tái)、培養(yǎng)箱等,以減少支原體的潛在污染。
5. 使用預(yù)防性試劑:使用專門針對(duì)支原體的預(yù)防性試劑,如加入細(xì)胞培養(yǎng)基中的預(yù)防劑、超凈臺(tái)噴霧、水浴鍋預(yù)防和細(xì)胞培養(yǎng)箱水盤預(yù)防等,以預(yù)防支原體污染。
支原體污染和黑膠蟲污染是兩種不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)污染,它們具有各自的特點(diǎn)和區(qū)別:
支原體污染:在相差顯微鏡下,支原體呈暗色微小顆粒位于細(xì)胞表面和細(xì)胞之間。
黑膠蟲污染:在高倍鏡下,被黑膠蟲污染的細(xì)胞膜會(huì)變得模糊不清,邊界不清晰,有粗糙感。
污染的影響:
支原體污染:可能導(dǎo)致細(xì)胞增殖緩慢,甚至從培養(yǎng)器皿脫落,影響細(xì)胞的DNA、RNA及蛋白表達(dá)。
黑膠蟲污染:與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)性生長(zhǎng),開始時(shí)對(duì)細(xì)胞沒有什么影響,但當(dāng)數(shù)量多時(shí),細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)受到影響直至死亡。
污染的來(lái)源:
支原體污染:可能來(lái)源于工作環(huán)境的污染、操作者本身、培養(yǎng)基的污染、交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染以及用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或部位的污染。
黑膠蟲污染:可能來(lái)源于細(xì)胞本身的污染或從動(dòng)物取材時(shí)的污染,也可能通過(guò)培養(yǎng)箱空氣進(jìn)行污染。
對(duì)于同一個(gè)樣品,為什么一步法恒溫試劑盒檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性,而PCR檢測(cè)為陰性呢?
目前有 210 +種不同種類的支原體分布于人類、動(dòng)物、昆蟲和植物中,其中 20 +種在細(xì)胞培養(yǎng)中被發(fā)現(xiàn)為污染物。支原體在實(shí)驗(yàn)室中的傳播來(lái)源多種多樣,主要來(lái)源包括實(shí)驗(yàn)室人員、胎牛血清(FBS)或新生牛血清(NBS)、以及由豬來(lái)源的胰蛋白酶溶液。此外,來(lái)自其他實(shí)驗(yàn)室或商業(yè)供應(yīng)商的細(xì)胞培養(yǎng)物、培養(yǎng)基、污染的試劑;非無(wú)菌供應(yīng)品、培養(yǎng)基和溶液;實(shí)驗(yàn)室人員;培養(yǎng)箱;液氮;空氣顆粒和氣溶膠;抗*素的過(guò)度使用;細(xì)胞培養(yǎng)器皿的不正確密封;以及其他的支原體細(xì)胞培養(yǎng)物等都可能成為支原體的傳播途徑。
支原體預(yù)防主要是什么成分?廣州細(xì)胞支原體去除現(xiàn)貨
支原體檢測(cè)PCR法和LAMP方法的優(yōu)劣勢(shì)比較。南京細(xì)胞支原體去除現(xiàn)貨
細(xì)胞培養(yǎng)中,支原體檢測(cè)的重要性體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:
1. 高污染發(fā)生率:支原體對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的污染發(fā)生率非常高,據(jù)估計(jì)平均發(fā)生率在60%左右。
3. 隱匿性強(qiáng):支原體污染具有很高的隱匿性,早期不容易被發(fā)現(xiàn),除非使用特異性和靈敏度都非常高的專業(yè)檢測(cè)試劑盒。
3. 影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果:支原體污染會(huì)改變細(xì)胞的生理性質(zhì),影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。細(xì)胞培養(yǎng)物一旦被支原體污染,會(huì)改變細(xì)胞DNA、RNA及蛋白表達(dá),導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確、不穩(wěn)定。
4. 難以通過(guò)肉眼或常規(guī)方法發(fā)現(xiàn):支原體污染無(wú)法通過(guò)肉眼檢查細(xì)胞來(lái)發(fā)現(xiàn),也不能通過(guò)向培養(yǎng)基中加入抗*素控制。
5. 對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)數(shù)據(jù)可靠性的影響:支原體污染會(huì)降低細(xì)胞系的有效性,使得細(xì)胞培養(yǎng)數(shù)據(jù)失去可靠性,無(wú)法為生命科學(xué)研究提供有意義的數(shù)據(jù)。
6. 預(yù)防和控制污染的必要性:定期進(jìn)行支原體檢測(cè)是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行自我質(zhì)量監(jiān)控的必要組成部分,有助于及時(shí)發(fā)現(xiàn)并控制污染,保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。
7. 避免細(xì)胞株受損:支原體污染可能導(dǎo)致細(xì)胞株受損,影響細(xì)胞株的質(zhì)量和研究?jī)r(jià)值。及時(shí)檢測(cè)和清*支原體污染有助于保護(hù)珍貴的細(xì)胞資源
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