支原體污染后的細(xì)胞是否應(yīng)該直接丟棄還是嘗試重新培養(yǎng),這取決于多種因素,包括細(xì)胞的重要性、污染的程度、以及是否有有效的方法來清*支原體。以下是一些處理支原體污染的常見方法:
1. 直接丟棄:對(duì)于非重要的細(xì)胞,如果培養(yǎng)中的細(xì)胞、WCB的細(xì)胞等,可以采取直接將培養(yǎng)物與用過的培養(yǎng)基滅活后丟棄的方式。
2. 使用支原體清除劑:支原體清除劑處理細(xì)胞,作用濃度為25μg/ml,兩周可以清*支原體。
3. 使用支原體清*培養(yǎng)基:每2~3天更換一次新鮮培養(yǎng)液,并用無菌的PBS洗滌細(xì)胞,處理15天后進(jìn)行支原體檢測(cè),以確定支原體是否被完全去除。
4. 支原體去除試劑:這是一種混合制劑,可以通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關(guān)蛋白合成來取得良好的支原體清*效果,且對(duì)細(xì)胞無傷害
支原體污染之后是直接丟棄還是重新培養(yǎng)?溫州支原體檢測(cè)方法等溫?cái)U(kuò)增
支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)中普遍的問題之一,細(xì)胞庫中或正在使用的細(xì)胞中,支原體的污染率約為15%-35%。并對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的生理和代謝造成諸多影響:
01/ 爭(zhēng)奪營養(yǎng):支原體的污染會(huì)阻礙細(xì)胞生長和增殖
02/ 改變蛋白質(zhì)、RNA 或 DNA 合成的水平
03/ 改變基因表達(dá)、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和形態(tài)
04/ 損害膜和細(xì)胞器
05/ 導(dǎo)致突變和染色體變化
06/ 時(shí)間、金錢和有價(jià)值的細(xì)胞丟失:支原體的污染會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失以及研究時(shí)間損失
07/ 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不可靠性
08/ 生物安全問題
細(xì)胞培養(yǎng)支原體去除試劑價(jià)格支原體檢測(cè)假陰性的原因?
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體檢測(cè)出現(xiàn)假陰性結(jié)果可能由以下原因引起:
1. 樣本質(zhì)量問題:如果采集的樣本中含有抑制劑或者樣本在處理、存儲(chǔ)過程中出現(xiàn)問題,可能會(huì)影響PCR反應(yīng),導(dǎo)致假陰性。
2. 技術(shù)或操作問題:實(shí)驗(yàn)操作中的誤差,如樣本處理不當(dāng)、試劑配制錯(cuò)誤、儀器設(shè)備問題等,都可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
3. 檢測(cè)方法的局限性:某些檢測(cè)方法可能存在靈敏度或特異性不足的問題,導(dǎo)致無法準(zhǔn)確檢測(cè)到病原體。
4. 培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的影響:培養(yǎng)法的靈敏度容易受到培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的影響,如果培養(yǎng)條件不適宜,可能導(dǎo)致支原體無法生長或生長緩慢,從而檢測(cè)不到。
5. 支原體種類問題:不是所有的支原體種類都能通過培養(yǎng)法檢測(cè)到,某些特定種類的支原體可能無法在常用的培養(yǎng)基中生長,導(dǎo)致漏檢。
需要定期檢測(cè)支原體污染的客戶主要包括以下幾類:
1. 生物醫(yī)藥企業(yè):生產(chǎn)涉及細(xì)胞培養(yǎng)的生物制品的公司,包括疫苗、生物藥物、基因產(chǎn)品等。
2. 細(xì)胞公司:進(jìn)行細(xì)胞產(chǎn)品的研發(fā)和生產(chǎn)的企業(yè),需要確保所用細(xì)胞的安全性和有效性。
3. 科研機(jī)構(gòu):從事細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳學(xué)等研究的學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu),需要保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4. 臨床單位:使用細(xì)胞技術(shù)進(jìn)行的醫(yī)院或診所,需要確保用細(xì)胞的質(zhì)量。
5. 細(xì)胞庫:保存和供應(yīng)細(xì)胞株的細(xì)胞庫,需要對(duì)細(xì)胞資源進(jìn)行定期檢測(cè)以保證其無污染。
6. 生物技術(shù)公司:提供生物技術(shù)服務(wù)的公司,如細(xì)胞培養(yǎng)、基因編輯等,需要確保服務(wù)過程中細(xì)胞的質(zhì)量。
細(xì)胞庫支原體檢測(cè)的必要性?
支原體是一類細(xì)菌,由于缺乏細(xì)胞壁,具有靈活的膜結(jié)構(gòu)。這使得支原體的形態(tài)多變,很難在高倍顯微鏡下識(shí)別。并且能夠抵抗壓力、溫度、滲透壓和脫水,對(duì)許多針對(duì)細(xì)胞壁合成的常見抗*素具有抗性。它們的體積非常小,直徑通常在0.15~0.3μm,因此能夠輕易地穿過過濾系統(tǒng)。支原體能在哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中可以高濃度生長,而不引起明顯的混濁或其他可見的污染跡象。
支原體通過特殊的前端細(xì)胞器與宿主細(xì)胞結(jié)合。支原體前端細(xì)胞器富含粘附素,可以附著在真核細(xì)胞上并穿透宿主細(xì)胞。支原體缺乏剛性細(xì)胞壁,可能有助于其與宿主細(xì)胞膜融合,并交換其膜和細(xì)胞質(zhì)成分。支原體的對(duì)細(xì)胞的毒性包括支原體侵襲性、分泌的致病酶和一些膜成分等都能夠有效地侵犯宿主。
支原體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的方法?上海支原體去除試劑價(jià)格
支原體檢測(cè)的樣本用什么合適?溫州支原體檢測(cè)方法等溫?cái)U(kuò)增
支原體是細(xì)胞外生存的 小微生物,是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.2~0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲形、分枝狀等多種態(tài)。
1、支原體存在于我們周圍,他可能就如塵埃一樣存在于我們的環(huán)境中
2、可透過一般的濾膜,所以不要寄希望于過濾可以清楚支原體污染的液體
支原體對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的污染發(fā)生率高,據(jù)估計(jì)平均發(fā)生率在60%左右。同時(shí)又非常隱秘,早期不容易被發(fā)現(xiàn),除非用特異性和靈敏度都非常高的檢測(cè)試劑盒。支原體因?yàn)閭€(gè)頭小,能穿過0.22微米濾器,并且在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)會(huì)潛在的擴(kuò)散。支原體污染使得用被污染的細(xì)胞樣本做的實(shí)驗(yàn)完全失去意義和價(jià)值。
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