利用高效安全無污染的生物制劑褐藻寡糖外源噴施黃瓜幼苗,將黃瓜幼苗分為噴施組和未噴施組;再配制不同濃度(0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.5%、)的褐藻寡糖溶液噴施黃瓜幼苗。對(duì)黃瓜幼苗的生長指標(biāo),抗氧化酶活性及抗氧化酶相關(guān)基因、WRKY基因家族對(duì)褐藻寡糖應(yīng)答情況進(jìn)行測(cè)定。旨在探究不同濃度褐藻寡糖對(duì)黃瓜的生長、產(chǎn)量及品質(zhì)的影響,對(duì)褐藻寡糖對(duì)作物促進(jìn)作用的機(jī)理進(jìn)行了初步研究,探索WRKY轉(zhuǎn)錄因子和褐藻寡糖在黃瓜生長中的重要功能及作用機(jī)制。結(jié)果如下:褐藻寡糖促進(jìn)黃瓜幼苗生長發(fā)育,主要表現(xiàn)為生物量(株高、莖粗)隨著濃度的升高呈增長趨勢(shì),葉片數(shù)增多。與未噴施組相比,噴施組生物量均有所改善。對(duì)果期產(chǎn)量也有所提高。褐藻寡糖噴施后,果期的品質(zhì)均有所提高。其中維生素C含量0.1%濃度處理升高明顯,是未噴施組的1.34倍。可溶性蛋白含量0.5%濃度處理效果好是未噴施組的1.59倍??扇苄蕴呛繚舛葹?.2%、0.3%效果好,兩組均是未噴施組的1.39倍。根據(jù)糖酸比分析,幾組處理0.2%、0.3%效果好。褐藻寡糖是一種由褐藻多糖(褐藻膠)經(jīng)過裂合酶降解而獲得的小分子量片段。黑龍江褐藻寡糖護(hù)膚
選擇三種來源(褐藻膠、果膠、殼聚糖)的不同分子量大小的九種寡糖片段進(jìn)行研究。利用植物的促生長和抗逆指標(biāo)進(jìn)行篩選,獲得了一種既具 有明顯的促生長作用,又具有抗逆作用的寡糖片段,為褐藻寡糖 HZ3,經(jīng)過質(zhì)譜分析,其組分是以二、三糖為主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。本研究第二部分是利用植物的植株、愈傷組織和懸浮細(xì)胞為材料,建立起寡糖促生長的綜合性的驗(yàn)證方法。對(duì)植株分別選擇了雙子葉植物豌豆和單子葉植物玉米,利用寡糖浸種,分別考察在種子萌發(fā)與幼苗生長初期其體內(nèi)蛋白酶、淀粉酶和激S含量的變化,結(jié)合種子與植株的生長指標(biāo),探討寡糖的促生長作用機(jī)理。云南褐藻寡糖給藥器褐藻寡糖可以促進(jìn)大麥生長等提高植物的抗凍能力,促進(jìn)植物種子萌發(fā)和根部生長。
因此褐藻寡糖對(duì)植物的抗逆機(jī)制是通過誘導(dǎo)作用實(shí)現(xiàn)的。 誘導(dǎo)植物體內(nèi)產(chǎn)生各種抗性物質(zhì)來緩解逆境因素對(duì)植物造成的損傷,從而達(dá)到抗 逆的目的。為了研究褐藻寡糖與細(xì)胞的結(jié)合機(jī)制與作用規(guī)律,利用激光共聚焦技術(shù)對(duì)標(biāo) 記的寡糖與細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合,觀察其動(dòng)態(tài)結(jié)合過程,研究發(fā)現(xiàn),褐藻寡糖能夠 與植物的細(xì)胞壁進(jìn)行結(jié)合,又可以穿過細(xì)胞壁進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部與細(xì)胞膜進(jìn)行結(jié)合。 通過將蛋白酶以及蛋白變性劑 SDS 對(duì)膜蛋白進(jìn)行處理后研究發(fā)現(xiàn)能夠?qū)烟堑?結(jié)合產(chǎn)生影響。表明褐藻寡糖的結(jié)合是與膜上的蛋白有關(guān)。通過封閉細(xì)胞膜上的 鈣離子通道,對(duì)其進(jìn)行阻斷后結(jié)合寡糖,研究發(fā)現(xiàn),褐藻寡糖與細(xì)胞膜的結(jié)合與 鈣離子通道無關(guān)。
對(duì)花葉病毒,通過將寡糖作用于病毒與植株的侵染過程、體內(nèi)復(fù)制階段進(jìn)行誘導(dǎo)抗病毒研究,發(fā)現(xiàn)褐藻寡糖可以明顯提高植株的抗病毒能力,同時(shí)還能直接作用于病毒,在體外對(duì)其進(jìn)行鈍化,降低傳染幾率,達(dá)到抗病毒的效果。對(duì)抗白色粉末病研究,通過體外和體內(nèi)兩條途徑對(duì)白色粉末病菌進(jìn)行抗病能力的檢測(cè),發(fā)現(xiàn)褐藻寡糖不能抑制白色粉末病菌的生長,而是通過提高植株的體內(nèi)抗逆酶類,達(dá)到抗病的效果,其對(duì)白色粉末病的好防效為4d,比三唑酮的好防效減少了2d,縮短了白色粉末病的治L時(shí)間,降低了的損傷。對(duì)植物果實(shí)的抗病保鮮的研究,發(fā)現(xiàn)褐藻寡糖能夠改變草莓的呼吸過程,減少水分散失,降低外界對(duì)其造成的損傷。9d后仍能保留一定的鮮度品質(zhì)。 較低濃度的褐藻寡糖能促進(jìn)高粱種子萌發(fā)及幼苗生長,提高高粱葉片葉綠素的合成速率。
研究發(fā)現(xiàn),寡糖對(duì)豌豆和玉米的促生長作用不同。對(duì)雙子葉植物豌豆,以0.15%褐藻寡糖效果比較好,第7d根和芽干重的增長率分別為79.2%和53.5%,是通過促進(jìn)激S含量、蛋白酶和脂肪酶的活力來促進(jìn)種子萌發(fā)和幼苗的生長;對(duì)單子葉植物玉米,以0.20%褐藻寡糖效果比較好,第7d根和芽干重的增長率分別為140%和143.8%,是通過促進(jìn)激S含量、脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶共同作用來促進(jìn)種子萌發(fā)和幼苗生長。通過對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)和繼代培養(yǎng)的研究,發(fā)現(xiàn),此褐藻寡糖具有激S的作用,在極低的濃度下能夠誘導(dǎo)愈傷組織的產(chǎn)生,并能夠在有2,4-D的培養(yǎng)基中促進(jìn)愈傷組織的誘導(dǎo)和生長。對(duì)懸浮細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn),0.03%寡糖能夠明顯增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)的激S含量,從而對(duì)細(xì)胞的生長進(jìn)行調(diào)控。褐藻寡糖為從海洋生物中提取的生物多糖,使用時(shí)無需安全間隔區(qū)。河北褐藻寡糖的種類
褐藻寡糖在植物誘導(dǎo)抗病中有重要作用,因?yàn)楹衷骞烟羌ぐl(fā)植物體內(nèi)相關(guān)抗病信號(hào)通路,從而引起植物抗病。黑龍江褐藻寡糖護(hù)膚
寡糖片段的比對(duì)選擇:對(duì)來源于植物細(xì)胞壁的寡糖-果膠寡糖、植物致病病菌細(xì)胞壁或蝦蟹殼的寡糖-殼寡糖和海洋藻類的寡糖-褐藻寡糖進(jìn)行促進(jìn)植物生長和誘導(dǎo)植物抗逆活性的篩選,獲得具有開發(fā)與應(yīng)用前景的寡糖片段。促生長活性與機(jī)理研究:將篩選出的褐藻寡糖應(yīng)用于植物植株、愈傷組織和懸浮細(xì)胞的生長調(diào)節(jié),探討了褐藻寡糖促生長的作用機(jī)制,為在植物促生長領(lǐng)域的開發(fā)應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)??鼓嫘阅軠y(cè)試與機(jī)理表征:將不同濃度的褐藻寡糖片段進(jìn)行植物抗逆性研究。探討褐藻寡糖在低溫、干旱、病害時(shí)對(duì)植物的誘導(dǎo)抗逆作用,探討褐藻寡糖在誘導(dǎo)植物抗逆性產(chǎn)生過程中的作用機(jī)理,為褐藻寡糖在植物抗逆領(lǐng)域的開發(fā)應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。寡糖與植物細(xì)胞的結(jié)合部位及影響因素:利用激光共聚焦顯微技術(shù)研究褐藻寡糖與植物細(xì)胞的結(jié)合過程,并通過多種物質(zhì)對(duì)標(biāo)記寡糖的競(jìng)爭(zhēng)性抑制,證明寡糖與植物細(xì)胞的結(jié)合與作用部位,初步探討褐藻寡糖與植物細(xì)胞的結(jié)合與信號(hào)傳導(dǎo)過程。 黑龍江褐藻寡糖護(hù)膚
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