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天津褐藻寡糖添加量

來源: 發(fā)布時間:2023-02-21

馬尾藻是我國南海常見的大型經(jīng)濟褐藻,也是褐藻多糖的重要來源。褐藻多糖及其降解產(chǎn)物—褐藻寡糖,具有眾多生物活性,在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、化妝品等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。以采自海南瓊海海域的孤囊馬尾藻為研究對象,探究了一種有效提取褐藻多糖和酶解制備褐藻寡糖的方法,并對制備的褐藻多糖及寡糖進行純化、結(jié)構(gòu)分析和活性評價。研究結(jié)果如下:采用超聲波輔助熱堿法,通過響應(yīng)面優(yōu)化獲得孤囊馬尾藻多糖的比較好提取工藝,在超聲功率500W、料液比1:25、提取時間5.95h、提取溫度82.27℃、NaOH質(zhì)量分數(shù)3.87%的條件下粗多糖得率為41.23%±0.98%。采用TCA沉淀法除蛋白,粗多糖的蛋白去除率達到81.93%,多糖保留率92.17%;優(yōu)化了H2O2氧化法除色素工藝,在H2O2濃度1.5%、70℃條件下脫色6h時,脫色率達到91.23%,多糖保留率為85.32%。采用DEAE-52離子交換層析柱對初步純化后的多糖進一步分離純化,獲得SOP1、SOP2和SOP3三個多糖組分,并明確了它們的分子量、純度以及總糖、還原糖、蛋白、硫酸根和糖醛酸的含量。采用自主分離的產(chǎn)褐藻膠裂解酶類芽孢桿菌新種,發(fā)酵制備粗酶液,發(fā)酵液酶活為15.20U/ml。褐藻寡糖水溶性好,易于被吸收利用,也是重要的信號分子,能夠參與植物的生長調(diào)節(jié)和誘導抗病的過程。天津褐藻寡糖添加量

AOS促進植物體內(nèi)胼胝質(zhì)的沉積對噴施AOS和ddH2O的擬南芥葉片進行苯胺藍染色,結(jié)果顯示,AOS處理的葉片葉脈處有明顯的熒光現(xiàn)象,說明AOS可以促進胼胝質(zhì)的積累,抵抗病原菌的入侵。AOS激發(fā)SA信號通路對AOS和ddH2O處理后的本氏煙葉片進行液相色譜測定,結(jié)果顯示,AOS處理的葉片中SA的含量相對較高;接種PVX后,葉片中的SA的合成進一步增加。同時,利用qRT-PCR檢測了AOS處理后SA合成途徑中的兩個關(guān)鍵基因ICS和PAL的表達水平,結(jié)果表明ICS基因的表達水平明顯高于對照,而PAL基因的表達水平與對照相比并無明顯差別,說明AOS主要通過ICS途徑誘導SA的合成。利用qRT-PCR技術(shù)檢測SA信號通路中的標志基因的表達水平,發(fā)現(xiàn)NPR1、PR1a的表達水平明顯提高。上述結(jié)果說明,AOS可以促進SA的積累,并激發(fā)SA信號通路。山東褐藻寡糖顆粒價格褐藻寡糖誘導植物體內(nèi)產(chǎn)生各種抗性物質(zhì)來緩解逆境因素對植物造成的損傷,從而達到抗逆的目的。

    美國復雜碳水化合物研究中心的主任Albersheim等提出了寡糖素這個概念,他認為低濃度的寡糖是一種信號分子,可以與作物相互作用,對作物的生長、發(fā)育和繁殖等起調(diào)控作用,抵Z病原微生物的侵染通過在調(diào)節(jié)過程中積累抗病物質(zhì)。褐藻寡糖是從植物和病菌中提取的低聚糖,對植物種子萌發(fā)、根系生長和枝條伸長有促進作用,來源也非常普遍,開發(fā)應(yīng)用的潛在可能性大,可以改善現(xiàn)階段設(shè)施內(nèi)作物生產(chǎn)過程中化肥等的過度使用給人類和環(huán)境帶來的巨大危害。植物生長表現(xiàn)為,植物細胞體積的增加、植物細胞分裂以及組織特性的發(fā)育過程。細胞分裂過程中的動力和擴張的分子機制主要依賴糖類等碳水化合物來提供能量。糖信號是決定植物生長發(fā)育的中心,與其他信號網(wǎng)絡(luò)連接,控制細胞增殖和擴張。植物的生長發(fā)育還依賴于蛋白質(zhì)的合成,而糖和環(huán)境信號對mRNA翻譯的調(diào)控至關(guān)重要。

從植物生長與抵抗逆境的特性出發(fā),利用外源性寡糖對其進行作用,通過檢測植物生長指標和抗逆指標變化,來研究寡糖在植物促生長與誘導抗逆過程中的作用機制。一方面對褐藻寡糖在植物促生長與抗逆領(lǐng)域的作用機理進行表征,另一方面,也希望能夠通過此研究獲得具有優(yōu)良生物功能活性的寡糖制劑,為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)抗災(zāi)減災(zāi)做出貢獻。選擇三種來源(褐藻膠、果膠、殼聚糖)的不同分子量大小的九種寡糖片段進行研究。利用植物的促生長和抗逆指標進行篩選,獲得了一種既具有明顯的促生長作用,又具有抗逆作用的寡糖片段,為褐藻寡糖HZ3,經(jīng)過質(zhì)譜分析,其組分是以二、三糖為主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。第二部分是利用植物的植株、愈傷組織和懸浮細胞為材料,建立起寡糖促生長的綜合性的驗證方法。對植株分別選擇了雙子葉植物豌豆和單子葉植物玉米,利用寡糖浸種,分別考察在種子萌發(fā)與幼苗生長初期其體內(nèi)蛋白酶、淀粉酶和激S含量的變化,結(jié)合種子與植株的生長指標,探討寡糖的促生長作用機理。褐藻寡糖對植物的抗逆機制是通過誘導作用實現(xiàn)的。

探討褐藻寡糖作用機理, 將褐藻寡糖溶液均勻噴施到煙C葉面后置 于(4±1)℃下進行低溫脅迫, 間隔不同時間檢測相關(guān)指標。 研究發(fā)現(xiàn), 濃度是影響褐藻寡糖抗凍性能的重要因素。 0 .05%, 0.20 %和 0.30 %褐藻寡糖具有誘導激發(fā)因子作用, 能夠誘導煙C CAT 、SOD 和 POD 活力提高, 去除體內(nèi)產(chǎn)生的氧 自由基, 保護細胞膜和葉綠素結(jié)構(gòu), 減少煙C葉片損傷, 提高煙C耐低溫能力, 其中以 0 .20 %褐藻寡糖誘導效果比較好; 0 .10%褐藻寡糖具有抗凍保護劑作用, 在 24 h 內(nèi)煙C各項指標均沒有明顯變化, 可保護細胞免受低溫傷害, 但 48 h 時凍壞指標增強, 其保護作用減弱或者消失;高濃度 1 .00 %褐藻寡糖具有毒副作用, 在煙C細胞表面形成較強滲透勢, 胞內(nèi)物 質(zhì)外滲嚴重, 煙C細胞結(jié)構(gòu)受到破壞, 加速低溫下煙C葉片損傷。 褐藻膠寡糖對植物來說也是一種重要的信號分子,能夠參與植物的生長調(diào)節(jié)和誘導抗病過程。河南褐藻寡糖吸收

褐藻膠寡糖(AOS)使毒死蜱對小麥幼苗的傷害有明顯緩解作用,增強植物對毒死蜱脅迫的抗性。天津褐藻寡糖添加量

    對初步純化的褐藻膠裂解酶進行了酶學性質(zhì)研究,酶的適反應(yīng)條件為50℃、pH8,在4~40℃、pH6~8范圍內(nèi)酶活力較穩(wěn)定;Ca2+、Mg2+和Fe2+等離子對該酶有促進作用,EDTA、Ba2+、Zn2+等有抑制作用。通過優(yōu)化獲得褐藻膠的好酶解條件,在底物濃度、加酶量、體系、45℃條件下反應(yīng)32h時,還原糖生成量為。以提取的褐藻多糖為原材料,按照此酶解工藝大量制備褐藻寡糖,通過Bio-GelP2凝膠色譜柱分離純化,得到不同聚合度的7個寡糖組分F1-F7,TLC分析結(jié)果顯示,其聚合度在1-7之間。去除自由基結(jié)果表明,褐藻多糖和寡糖都具有較強的抗氧化活性。自由基去除率隨著糖濃度的增加而增強,在寡糖濃度、多糖濃度±±。多糖、寡糖濃度為±±。在相對濕度為85%和62%的環(huán)境下,褐藻多糖和褐藻寡糖都表現(xiàn)出較強的吸濕能力,褐藻寡糖更佳。在干燥環(huán)境下,褐藻多糖和寡糖都表現(xiàn)出很強的保濕效果,36h時褐藻寡糖的保濕率達到。抑菌結(jié)果顯示,褐藻寡糖對白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌均具有較好的抑菌作用,褐藻多糖對白色念珠菌具有抑菌效果,對另3種細菌無抑制。 天津褐藻寡糖添加量

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