AOS增強植株對致病疫霉的抗性用100μg/mLAOS分別噴施擬南芥和本氏煙,24h后,接種致病疫霉。結(jié)果顯示與噴施ddH2O的植株相比,AOS處理的葉片接種部位的水漬及葉片的黃化程度明顯降低,檢測致病疫霉菌絲的生長量也明顯低于對照,表明AOS也可以增強植株對致病疫霉的抗性。AOS誘導(dǎo)植物早期免疫應(yīng)答反應(yīng)對噴施AOS和ddH2O的本氏煙葉片進行相關(guān)免疫反應(yīng)的檢測。結(jié)果顯示,在氣孔開度方面,與ddH2O處理的對照組相比,AOS處理的本氏煙葉片的氣孔開度明顯較低,表明AOS通過調(diào)節(jié)葉片表面氣孔的開合抑制病原菌的入侵。分別于2h、4h、8h、24h和48h時,對噴施AOS和ddH2O的本氏煙葉片進行DAB和NBT組織化學(xué)染色,發(fā)現(xiàn)噴施ddH2O的葉片染色程度較淺,而噴施AOS的葉片染色程度較深,且在24h時染色深。qRT-PCR檢測ROS合成基因RbohA、RbohB以及去除基因SOD、APX和CAT表達(dá)水平,顯示RbohB基因表達(dá)量明顯上調(diào),CAT基因表達(dá)量明顯下降,說明AOS可以通過抑制CAT基因和促進RbohB基因的表達(dá),提高過氧化氫的積累。褐藻寡糖可以誘導(dǎo)植物氣孔關(guān)閉，有效抑制病原菌侵染宿主。廣西藥品褐藻寡糖

    褐藻寡糖對煙C細(xì)胞內(nèi)游離脯氨酸含量的影響研究發(fā)現(xiàn),幾乎所有逆境脅迫都能夠造成植物體內(nèi)游離脯氨酸積累。在植物體內(nèi),脯氨酸是作為1種滲透保護劑參與植物抗逆過程,緩解植物因低溫傷害造成的滲透脅迫,因此檢測植物體內(nèi)游離內(nèi)脯氨酸含量,可以在一定程度上判斷植物遭受逆境脅迫危害程度。圖5是煙C葉片游離脯氨酸含量變化。由圖可知,水處理組經(jīng)低溫脅迫后,游離脯氨酸含量短時間內(nèi)劇烈增加,6h時為空白對照的4倍,隨著低溫處理時間延長,游離脯氨酸積累加劇,48h后是空白對照的11.8倍。噴施寡糖后進行低溫脅迫,0.05%～0.30%褐藻寡糖能夠明顯降低煙草體內(nèi)游離脯氨酸積累,0.10%褐藻寡糖在24h以內(nèi)效果比較好,但48h時游離脯氨酸含量明顯升高。1.00%褐藻寡糖短時間內(nèi)使煙C葉片內(nèi)游離脯氨酸含量劇烈增加,隨著時間延長積累不斷加劇,表明較高濃度褐藻寡糖溶液會對煙C細(xì)胞產(chǎn)生毒副作用,低溫下更加劇了細(xì)胞損傷破壞。江西殼寡糖vs褐藻寡糖褐藻寡糖可以作為誘抗劑能夠誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗逆性能，還能夠調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育。

   低溫逆境時，寡糖處理能迅速增強其抗逆酶類，對引起細(xì)胞損傷的物質(zhì)進行去除，提高植物的抗逆能力。干旱逆境，通過寡糖作用，能夠使其體內(nèi)的抗旱指標(biāo)明顯增強，如ABA的含量升高明顯，對干旱下植株的生長狀態(tài)進行調(diào)控，降低干旱脅迫對植株的損傷，達(dá)到誘導(dǎo)抗旱的目的。抗病性能的提高，通過檢測煙C花葉病毒和病對植株的致病作用。對煙C花葉病毒，通過將寡糖作用于病毒與植株的侵染過程、體內(nèi)復(fù)制階段進行誘導(dǎo)抗病毒研究，發(fā)現(xiàn)褐藻寡糖可以明顯提高植株的抗病毒能力，同時還能直接作用于病毒，在體外對其進行鈍化，降低傳染幾率，達(dá)到抗病毒的效果。體外和體內(nèi)兩條途徑對病菌進行抗病能力的檢測，發(fā)現(xiàn)褐藻寡糖不能抑制病菌的生長，而是通過提高植株的體內(nèi)抗逆酶類，達(dá)到抗病的效果，其對煙C病的比較好防效為4d，比三唑酮的比較好防效減少了2d，縮短了病的治好時間，降低了煙C的損傷。對植物果實的抗病保鮮的研究，發(fā)現(xiàn)褐藻寡糖能夠改變草莓的呼吸過程，減少水分散失，降低外界對其造成的損傷。因此褐藻寡糖對植物的抗逆機制是通過誘導(dǎo)作用實現(xiàn)的。誘導(dǎo)植物體內(nèi)產(chǎn)生各種抗性物質(zhì)來緩解逆境因素對植物造成的損傷，從而達(dá)到抗逆的目的。

    褐藻寡糖對POD及其同工酶的影響POD是植物體內(nèi)重要抗逆酶類之一,能夠催化乙烯生物合成,參與氧自由基消除反應(yīng),其活力高低通常是表征植物抗逆性能關(guān)鍵指標(biāo)之一。噴施ADO后進行低溫脅迫,濃度為0.05%,0.20%,0.30%ADO組能夠顯著提高POD活力,同工酶譜帶寬度增加,顏色加深,表明POD含量受到ADO誘導(dǎo)而增加;并且0.20%和0.30%濃度組還能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生POD同工酶新譜帶,以0.20%濃度ADO誘導(dǎo)效果好;0.10%濃度ADO組24h內(nèi)POD變化幅度較小且處于較低水。48h后迅速升高,表明葉片內(nèi)氧自由基含量升高,細(xì)胞開始受到損傷;高濃度1.00%ADO組隨低溫脅迫時間延長細(xì)胞損傷加劇,POD活力不斷降低。褐藻寡糖能夠作為信號調(diào)節(jié)分子作用于植物，促進植物的生長，此研究為海洋活性寡糖的開發(fā)開辟了新的途徑。

    褐藻寡糖應(yīng)用于翅堿蓬種子的萌發(fā)和抗逆中，研究了褐藻寡糖對翅堿蓬種子萌發(fā)和不同鹽度下抗鹽脅迫能力的影響。結(jié)果表明，褐藻寡糖可有效提高翅堿蓬種子的萌發(fā)率，由清水對照組的66.67%提升至0.02mg/mL的78.33%，同時萌發(fā)的幼芽中可溶性糖含量也有較大提升；經(jīng)褐藻寡糖處理，鹽脅迫下翅堿蓬種子的萌發(fā)率、萌發(fā)芽長有明顯的提升，翅堿蓬幼芽中游離脯氨酸含量提升，在200mmol/L及以上鹽濃度下效果尤為明顯。結(jié)果顯示種子在褐藻寡糖的作用下抗鹽脅迫能力提高，在黃河三角洲的高鹽環(huán)境中可促進翅堿蓬幼苗的生長和抗逆能力的提升。翅堿蓬是黃河三角洲地區(qū)重要的耐鹽草本植物，但在當(dāng)前的應(yīng)用中存在著種植成活率低的問題，尤其是幼苗移植生長時期，幼苗后續(xù)成活率低，浪費了大量的人力物力財力。在翅堿蓬的生活史中，種子萌發(fā)和幼芽生長是基礎(chǔ)的部分，這兩個階段的生長狀況關(guān)系到翅堿蓬后續(xù)移植成活率的高低。較低濃度的褐藻寡糖能促進高粱種子萌發(fā)及幼苗生長，提高高粱葉片葉綠素的合成速率。福建藥品褐藻寡糖

褐藻寡糖能夠改變草莓的呼吸過程，減少水分散失，降低外界對其造成的損傷。廣西藥品褐藻寡糖

    植物在生長發(fā)育的過程中會遭受多種病害的脅迫,造成產(chǎn)量和品質(zhì)下降。植物免疫誘抗劑又稱“植物疫苗”,可以通過誘導(dǎo)植物自身的免疫系統(tǒng)激發(fā)防御應(yīng)答反應(yīng),增強植物抗病性;且能減少化學(xué)農(nóng)藥的使用,降低對人和環(huán)境的危害。寡糖類誘抗劑是一類具有生物調(diào)節(jié)功能的碳水化合物,能在較低的濃度下被植物細(xì)胞表面的免疫識別受體所識別進而激發(fā)PTI,誘導(dǎo)植物產(chǎn)生一系列的免疫應(yīng)答,增強植物的抗病能力。前期,我們利用褐藻膠裂解酶Aly2降解褐藻膠得到褐藻膠寡糖。在此基礎(chǔ)上,以本氏煙和擬南芥為供試植物,以馬鈴薯X病毒、煙C花葉病毒和致病疫霉為防治對象,對AOS在誘導(dǎo)植物抵抗病害過程中發(fā)揮的作用及其分子機制進行研究。 廣西藥品褐藻寡糖

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