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四川褐藻寡糖檢測(cè)方法

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-05-17

    褐藻寡糖應(yīng)用于翅堿蓬種子的萌發(fā)和抗逆中,研究了褐藻寡糖對(duì)翅堿蓬種子萌發(fā)和不同鹽度下抗鹽脅迫能力的影響。結(jié)果表明,褐藻寡糖可有效提高翅堿蓬種子的萌發(fā)率,由清水對(duì)照組的66.67%提升至0.02mg/mL的78.33%,同時(shí)萌發(fā)的幼芽中可溶性糖含量也有較大提升;經(jīng)褐藻寡糖處理,鹽脅迫下翅堿蓬種子的萌發(fā)率、萌發(fā)芽長(zhǎng)有明顯的提升,翅堿蓬幼芽中游離脯氨酸含量提升,在200mmol/L及以上鹽濃度下效果尤為明顯。結(jié)果顯示種子在褐藻寡糖的作用下抗鹽脅迫能力提高,在黃河三角洲的高鹽環(huán)境中可促進(jìn)翅堿蓬幼苗的生長(zhǎng)和抗逆能力的提升。翅堿蓬是黃河三角洲地區(qū)重要的耐鹽草本植物,但在當(dāng)前的應(yīng)用中存在著種植成活率低的問題,尤其是幼苗移植生長(zhǎng)時(shí)期,幼苗后續(xù)成活率低,浪費(fèi)了大量的人力物力財(cái)力。在翅堿蓬的生活史中,種子萌發(fā)和幼芽生長(zhǎng)是基礎(chǔ)的部分,這兩個(gè)階段的生長(zhǎng)狀況關(guān)系到翅堿蓬后續(xù)移植成活率的高低。褐藻寡糖在生命體內(nèi)具有重要的作用,其作為信號(hào)分子對(duì)植物的誘導(dǎo)抗逆和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)作用正逐步的深入。四川褐藻寡糖檢測(cè)方法

   寡糖片段的比對(duì)選擇:對(duì)來源于植物細(xì)胞壁的寡糖-果膠寡糖、植物致病病菌細(xì)胞壁或蝦蟹殼的寡糖-殼寡糖和海洋藻類的寡糖-褐藻寡糖進(jìn)行促進(jìn)植物生長(zhǎng)和誘導(dǎo)植物抗逆活性的篩選,獲得具有開發(fā)與應(yīng)用前景的寡糖片段。促生長(zhǎng)活性與機(jī)理研究:將篩選出的褐藻寡糖應(yīng)用于植物植株、愈傷組織和懸浮細(xì)胞的生長(zhǎng)調(diào)節(jié),探討了褐藻寡糖促生長(zhǎng)的作用機(jī)制,為在植物促生長(zhǎng)領(lǐng)域的開發(fā)應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)??鼓嫘阅軠y(cè)試與機(jī)理表征:將不同濃度的褐藻寡糖片段進(jìn)行植物抗逆性研究。探討褐藻寡糖在低溫、干旱、病害時(shí)對(duì)植物的誘導(dǎo)抗逆作用,探討褐藻寡糖在誘導(dǎo)植物抗逆性產(chǎn)生過程中的作用機(jī)理,為褐藻寡糖在植物抗逆領(lǐng)域的開發(fā)應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。寡糖與植物細(xì)胞的結(jié)合部位及影響因素:利用激光共聚焦顯微技術(shù)研究褐藻寡糖與植物細(xì)胞的結(jié)合過程,并通過多種物質(zhì)對(duì)標(biāo)記寡糖的競(jìng)爭(zhēng)性抑制,證明寡糖與植物細(xì)胞的結(jié)合與作用部位,初步探討褐藻寡糖與植物細(xì)胞的結(jié)合與信號(hào)傳導(dǎo)過程。云南褐藻寡糖公司褐藻寡糖能夠作為信號(hào)調(diào)節(jié)分子作用于植物,促進(jìn)植物的生長(zhǎng),此研究為海洋活性寡糖的開發(fā)開辟了新的途徑。

   從植物生長(zhǎng)與抵抗逆境的特性出發(fā),利用外源性寡糖對(duì)其進(jìn)行作用,通過檢測(cè)植物生長(zhǎng)指標(biāo)和抗逆指標(biāo)變化,來研究寡糖在植物促生長(zhǎng)與誘導(dǎo)抗逆過程中的作用機(jī)制。一方面對(duì)褐藻寡糖在植物促生長(zhǎng)與抗逆領(lǐng)域的作用機(jī)理進(jìn)行表征,另一方面,也希望能夠通過此研究獲得具有優(yōu)良生物功能活性的寡糖制劑,為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)抗災(zāi)減災(zāi)做出貢獻(xiàn)。選擇三種來源(褐藻膠、果膠、殼聚糖)的不同分子量大小的九種寡糖片段進(jìn)行研究。利用植物的促生長(zhǎng)和抗逆指標(biāo)進(jìn)行篩選,獲得了一種既具有明顯的促生長(zhǎng)作用,又具有抗逆作用的寡糖片段,為褐藻寡糖HZ3,經(jīng)過質(zhì)譜分析,其組分是以二、三糖為主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。第二部分是利用植物的植株、愈傷組織和懸浮細(xì)胞為材料,建立起寡糖促生長(zhǎng)的綜合性的驗(yàn)證方法。對(duì)植株分別選擇了雙子葉植物豌豆和單子葉植物玉米,利用寡糖浸種,分別考察在種子萌發(fā)與幼苗生長(zhǎng)初期其體內(nèi)蛋白酶、淀粉酶和激S含量的變化,結(jié)合種子與植株的生長(zhǎng)指標(biāo),探討寡糖的促生長(zhǎng)作用機(jī)理。

   褐藻寡糖噴施后,黃瓜果實(shí)的抗氧化酶G-POD4基因表達(dá)水平上升,T2組是CK組的倍。噴施組SOD1基因表達(dá)水平均升高,其中T3組較CK組升高了倍,效果明顯。褐藻寡糖噴施后,分別檢測(cè)葉片和根中WRKY家族轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)變化。在黃瓜葉片中,第Ⅰ類WRKY家族基因,WRKY2、WRKY4、WRKY23、WRKY39響應(yīng)褐藻寡糖表達(dá)上調(diào),第Ⅱ類WRKY家族基因有15個(gè)基因響應(yīng)褐藻寡糖表達(dá)上調(diào),第Ⅲ類WRKY家族基因基因中WRKY20、WRKY22、WRKY34、WRKY35在12h或24h出現(xiàn)表達(dá)上調(diào)的峰值。在黃瓜根中,第Ⅰ類WRKY家族基因,WRKY2、WRKY23、WRKY39響應(yīng)褐藻寡糖表達(dá)上調(diào),第Ⅱ類基因中有14個(gè)基因響應(yīng)褐藻寡糖表達(dá)上調(diào),第Ⅲ類WRKY家族基因有6個(gè)基因響應(yīng)褐藻寡糖表達(dá)上調(diào)。褐藻寡糖在誘導(dǎo)植物抗病活性方面,能夠激發(fā)植物體的防御活性,提高植物的生命活力及抗病性能。

    前寡糖在植物促生長(zhǎng)與誘導(dǎo)抗逆領(lǐng)域研究的現(xiàn)狀,本研究選擇不同來 源、不同分子量大小的褐藻寡糖、果膠寡糖和殼寡糖的寡糖片段,通過促生長(zhǎng)與 抗逆作用對(duì)其生物活性進(jìn)行比對(duì)篩選。以促進(jìn)植物種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)作為寡糖 片段的促生長(zhǎng)指標(biāo),以大豆子葉法測(cè)定誘導(dǎo)產(chǎn)生植保素的合成作為寡糖片段的抗 逆指標(biāo),對(duì)寡糖種類、分子量水平和濃度大小與促生長(zhǎng)和抗逆效應(yīng)的影響進(jìn)行研 究,以獲得具有優(yōu)良的促生長(zhǎng)與抗逆性能的寡糖片段。褐藻寡糖 HZ3 在濃度為 0.1%時(shí)對(duì)豌豆促生長(zhǎng)效果為明顯,能夠明顯的促進(jìn)豌 豆根和芽的生長(zhǎng),增加根和芽的干重。褐藻寡糖在植物誘導(dǎo)抗病中有重要作用,因?yàn)楹衷骞烟羌ぐl(fā)植物體內(nèi)相關(guān)抗病信號(hào)通路,從而引起植物抗病。天津褐藻寡糖 植物鹽堿

褐藻膠寡糖(AOS)使毒死蜱對(duì)小麥幼苗的傷害有明顯緩解作用,增強(qiáng)植物對(duì)毒死蜱脅迫的抗性。四川褐藻寡糖檢測(cè)方法

    褐藻寡糖對(duì)煙C葉片葉綠素含量的影響葉綠素是高等植物進(jìn)行光合作用的主要成分,葉綠素?fù)p失或者破壞會(huì)嚴(yán)重影響植物生長(zhǎng)發(fā)育進(jìn)程,在某種程度上葉綠素含量多少表征著植物健康程度。圖3和圖4是煙C葉片中葉綠素a和葉綠素b在噴施褐藻寡糖后的變化結(jié)果。研究發(fā)現(xiàn):經(jīng)過6h低溫脅迫,水處理組葉綠素a和b含量分別下降了23.9%和6.0%,隨著時(shí)間延長(zhǎng),2種葉綠素含量繼續(xù)減少,48h后分別只有對(duì)照的51.2%和78.3%,說明在低溫脅迫下,水處理組葉綠素受到低溫?fù)p傷破壞,且隨著時(shí)間延長(zhǎng),破壞不斷加劇。在2種葉綠素中,葉綠素a比葉綠素b更容易受到低溫破壞。噴施了0.05%~0.30%褐藻寡糖后進(jìn)行低溫脅迫,煙C葉片葉綠素a和b含量比水處理組有不同程度升高,表明此濃度范圍內(nèi)寡糖能夠減輕低溫對(duì)葉綠素的損傷,其中以0.20%寡糖溶液效果明顯,但0.10%褐藻寡糖處理組在48h時(shí)葉綠素a和b的含量都有較大幅度下降,表明葉綠素受到破壞損傷;高濃度1.00%褐藻寡糖對(duì)煙C起破壞作用,與對(duì)照組相比,葉綠素a和b含量都有較大幅度減少,隨時(shí)間延長(zhǎng),二者含量繼續(xù)降低,表明煙C葉綠素?fù)p傷加劇。四川褐藻寡糖檢測(cè)方法

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