馬尾藻是我國(guó)南海常見的大型經(jīng)濟(jì)褐藻,也是褐藻多糖的重要來源。褐藻多糖及其降解產(chǎn)物—褐藻寡糖,具有眾多生物活性,在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、化妝品等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。以采自海南瓊海海域的孤囊馬尾藻為研究對(duì)象,探究了一種有效提取褐藻多糖和酶解制備褐藻寡糖的方法,并對(duì)制備的褐藻多糖及寡糖進(jìn)行純化、結(jié)構(gòu)分析和活性評(píng)價(jià)。研究結(jié)果如下:采用超聲波輔助熱堿法,通過響應(yīng)面優(yōu)化獲得孤囊馬尾藻多糖的比較好提取工藝,在超聲功率500W、料液比1:25、提取時(shí)間5.95h、提取溫度82.27℃、NaOH質(zhì)量分?jǐn)?shù)3.87%的條件下粗多糖得率為41.23%±0.98%。采用TCA沉淀法除蛋白,粗多糖的蛋白去除率達(dá)到81.93%,多糖保留率92.17%;優(yōu)化了H2O2氧化法除色素工藝,在H2O2濃度1.5%、70℃條件下脫色6h時(shí),脫色率達(dá)到91.23%,多糖保留率為85.32%。采用DEAE-52離子交換層析柱對(duì)初步純化后的多糖進(jìn)一步分離純化,獲得SOP1、SOP2和SOP3三個(gè)多糖組分,并明確了它們的分子量、純度以及總糖、還原糖、蛋白、硫酸根和糖醛酸的含量。采用自主分離的產(chǎn)褐藻膠裂解酶類芽孢桿菌新種,發(fā)酵制備粗酶液,發(fā)酵液酶活為15.20U/ml。褐藻寡糖噴后6小時(shí)內(nèi)遇雨補(bǔ)噴，本品不要與堿性農(nóng)藥等物質(zhì)混用。福建褐藻寡糖凝膠婦

    對(duì)初步純化的褐藻膠裂解酶進(jìn)行了酶學(xué)性質(zhì)研究,酶的適反應(yīng)條件為50℃、pH8,在4～40℃、pH6～8范圍內(nèi)酶活力較穩(wěn)定;Ca2+、Mg2+和Fe2+等離子對(duì)該酶有促進(jìn)作用,EDTA、Ba2+、Zn2+等有抑制作用。通過優(yōu)化獲得褐藻膠的好酶解條件,在底物濃度、加酶量、體系、45℃條件下反應(yīng)32h時(shí),還原糖生成量為。以提取的褐藻多糖為原材料,按照此酶解工藝大量制備褐藻寡糖,通過Bio-GelP2凝膠色譜柱分離純化,得到不同聚合度的7個(gè)寡糖組分F1-F7,TLC分析結(jié)果顯示,其聚合度在1-7之間。去除自由基結(jié)果表明,褐藻多糖和寡糖都具有較強(qiáng)的抗氧化活性。自由基去除率隨著糖濃度的增加而增強(qiáng),在寡糖濃度、多糖濃度±±。多糖、寡糖濃度為±±。在相對(duì)濕度為85%和62%的環(huán)境下,褐藻多糖和褐藻寡糖都表現(xiàn)出較強(qiáng)的吸濕能力,褐藻寡糖更佳。在干燥環(huán)境下,褐藻多糖和寡糖都表現(xiàn)出很強(qiáng)的保濕效果,36h時(shí)褐藻寡糖的保濕率達(dá)到。抑菌結(jié)果顯示,褐藻寡糖對(duì)白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌均具有較好的抑菌作用,褐藻多糖對(duì)白色念珠菌具有抑菌效果,對(duì)另3種細(xì)菌無抑制。 安徽褐藻寡糖如何食用褐藻寡糖是褐藻膠的降解產(chǎn)物，是一種無支鏈陰離子寡糖，由β-D-甘露糖醛酸和古羅糖醛酸構(gòu)成。

   從植物生長(zhǎng)與抵抗逆境的特性出發(fā)，利用外源性寡糖對(duì)其進(jìn)行作用，通過檢測(cè)植物生長(zhǎng)指標(biāo)和抗逆指標(biāo)變化，來研究寡糖在植物促生長(zhǎng)與誘導(dǎo)抗逆過程中的作用機(jī)制。一方面對(duì)褐藻寡糖在植物促生長(zhǎng)與抗逆領(lǐng)域的作用機(jī)理進(jìn)行表征，另一方面，也希望能夠通過此研究獲得具有優(yōu)良生物功能活性的寡糖制劑，為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)抗災(zāi)減災(zāi)做出貢獻(xiàn)。選擇三種來源（褐藻膠、果膠、殼聚糖）的不同分子量大小的九種寡糖片段進(jìn)行研究。利用植物的促生長(zhǎng)和抗逆指標(biāo)進(jìn)行篩選，獲得了一種既具有明顯的促生長(zhǎng)作用，又具有抗逆作用的寡糖片段，為褐藻寡糖HZ3，經(jīng)過質(zhì)譜分析，其組分是以二、三糖為主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。第二部分是利用植物的植株、愈傷組織和懸浮細(xì)胞為材料，建立起寡糖促生長(zhǎng)的綜合性的驗(yàn)證方法。對(duì)植株分別選擇了雙子葉植物豌豆和單子葉植物玉米，利用寡糖浸種，分別考察在種子萌發(fā)與幼苗生長(zhǎng)初期其體內(nèi)蛋白酶、淀粉酶和激S含量的變化，結(jié)合種子與植株的生長(zhǎng)指標(biāo)，探討寡糖的促生長(zhǎng)作用機(jī)理。

    為了研究褐藻寡糖與細(xì)胞的結(jié)合機(jī)制與作用規(guī)律，利用激光共聚焦技術(shù)對(duì)標(biāo)記的寡糖與煙c細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合，觀察其動(dòng)態(tài)結(jié)合過程，研究發(fā)現(xiàn)，褐藻寡糖能夠與植物的細(xì)胞壁進(jìn)行結(jié)合，又可以穿過細(xì)胞壁進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部與細(xì)胞膜進(jìn)行結(jié)合。通過將蛋白酶以及蛋白變性劑SDS對(duì)膜蛋白進(jìn)行處理后研究發(fā)現(xiàn)能夠?qū)烟堑慕Y(jié)合產(chǎn)生影響。表明褐藻寡糖的結(jié)合是與膜上的蛋白有關(guān)。通過封閉細(xì)胞膜上的鈣離子通道，對(duì)其進(jìn)行阻斷后結(jié)合寡糖，研究發(fā)現(xiàn)，褐藻寡糖與細(xì)胞膜的結(jié)合與鈣離子通道無關(guān)。 褐藻寡糖水溶性好，易于被吸收利用，也是重要的信號(hào)分子，能夠參與植物的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)和誘導(dǎo)抗病的過程。

    褐藻寡糖對(duì)CAT活性的影響植物遭受低溫傷害時(shí),過氧化氫酶系統(tǒng)首先受到破壞損傷,造成體內(nèi)過氧化氫去除鏈條斷裂、積累增加,由于過氧化氫積累可以嚴(yán)重?fù)p害植物細(xì)胞膜和其它代謝酶類,因此CAT活力能夠反映植物去除過氧化氫能力強(qiáng)弱和植物遭受損程度大小。圖6為煙C葉片CAT活力變化。由圖可知,水處理組在低溫脅迫后,短時(shí)間內(nèi)CAT活力迅速下降,隨著時(shí)間延長(zhǎng),植物體內(nèi)抗逆反應(yīng)啟動(dòng),會(huì)增加CAT生成以去除積累的過氧化氫,因此CAT含量又緩慢升高。噴施寡糖后進(jìn)行低溫脅迫,0.05%,0.20%,0.30%ADO組中煙CCAT活力變化規(guī)律相似:短時(shí)間內(nèi)均能夠誘導(dǎo)煙CCAT活力迅速升高,12h達(dá)到高峰,且峰值都高于空白對(duì)照,隨著時(shí)間延長(zhǎng),CAT活力又緩慢下降,以0.20%褐藻寡糖的誘導(dǎo)效果好;0.10%褐藻寡糖處理組在6～24h之內(nèi)CAT含量與對(duì)照相比變化較小,但48h煙C葉片CAT活力迅速下降,說明CAT受到破壞而活力降低。高濃度1.00%褐藻寡糖組經(jīng)過相同時(shí)間低溫脅迫,其CAT活力均低于水處理組,說明1.00%褐藻寡糖對(duì)煙C產(chǎn)生了毒副作用,加劇了煙C葉片損傷。幼苗葉中葉綠素含童增高葉片凈光合速率、胞間濃度、氣孔導(dǎo)度和蒸騰速率增加。內(nèi)蒙古褐藻寡糖凝膠

褐藻寡糖作為一種信號(hào)分子，還參與調(diào)節(jié)植物的生長(zhǎng)發(fā)育能調(diào)控生物合成過程從而保護(hù)果實(shí)品質(zhì)提高果實(shí)的產(chǎn)量。福建褐藻寡糖凝膠婦

    褐藻寡糖在植物生長(zhǎng)中的使用，可以增強(qiáng)植物對(duì)外界環(huán)境的適應(yīng)能力，對(duì)提高作物產(chǎn)量及品質(zhì)也具有非常重要的意義，同時(shí)褐藻寡糖本身在環(huán)境中自然降解，無殘留無污染，可以減少化肥和農(nóng)藥的使用，提高了環(huán)保效益。由于褐藻寡糖是由褐藻膠降解得到的小分子量片段，不同的降解方法或不同的降解酶會(huì)導(dǎo)致褐藻寡糖的分子量大小不同，分子量大小的不同可能會(huì)在促進(jìn)植物生長(zhǎng)方面有不同的效果。而目前有關(guān)于褐藻寡糖促進(jìn)植物生長(zhǎng)的研究比較少，且目前未有關(guān)于不同分子量褐藻寡糖促進(jìn)植物生長(zhǎng)的報(bào)道。黃瓜是我國(guó)重要的蔬菜作物，促進(jìn)生長(zhǎng)的環(huán)保肥料的研發(fā)和應(yīng)用對(duì)黃瓜的生產(chǎn)實(shí)踐具有重要的意義。本研究通過探究不同分子量的褐藻寡糖在促進(jìn)黃瓜幼苗的生長(zhǎng)方面的作用，旨在發(fā)掘褐藻寡糖更多的生物功能。 福建褐藻寡糖凝膠婦

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