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來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-06-05

鼠尾膠原:含細(xì)胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,并放置于冰浴中。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時(shí)需要測定pH值)。加入760μL的細(xì)胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。本品在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠,在操作過程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存,切勿凍存,有效期一年。鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞(特別是上皮細(xì)胞)貼壁的作用。寧波正規(guī)鼠尾膠原廠家推薦

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實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果。方法制作鼠尾膠原,觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。結(jié)果無鼠尾膠原時(shí),前庭毛細(xì)胞懸浮于外液,不宜封接;有鼠尾膠原時(shí),前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,易于封接和長時(shí)間(約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長時(shí)程記錄,并且制作簡便,成本低廉。寧波正規(guī)鼠尾膠原廠家推薦鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,pH 7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠。

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膠原蛋白的適用征狀:1、由于工作勞累,睡眠不足形成的皮膚晦暗無光、發(fā)黃、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀。2、由于年齡、太陽輻射因素引起的皮膚松弛、下垂、皺紋、干燥等皮膚衰老現(xiàn)象。3、由于體內(nèi)異常黑色素分泌旺盛,大量沉積皮膚表面,肌膚不能及時(shí)代謝出異常黑色素,形成各種色斑。4、由于長期戶外活動(dòng)及皮膚保養(yǎng)不當(dāng)使膚質(zhì)受到損傷,過早出現(xiàn)細(xì)紋,皮膚干燥、脫皮、、毛孔粗大等不良癥狀。5、由于內(nèi)分泌功能紊亂,皮膚膚質(zhì)差、皮膚發(fā)油、發(fā)暗,易長青春痘留下的色印、色素沉著等。6、由于生活無規(guī)律,吸煙等因素,造成的黑眼圈,眼袋等問題。7.長期電腦旁工作,電腦輻射造成脫發(fā),內(nèi)分泌紊亂問題。

酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度檢測鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,其生物力學(xué)強(qiáng)度極差,一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE,結(jié)果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對(duì)分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶,另一條帶的相對(duì)分子質(zhì)量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中。礦化2、6d后,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察。制備鼠尾膠原(兩個(gè)同學(xué)一組操作)。

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膠原蛋白的功效:1.膠原蛋白可以作為一種補(bǔ)鈣食品,膠原蛋白的特征氨基酸羥基脯氨酸是血漿中運(yùn)輸鈣到骨細(xì)胞的運(yùn)載工具,骨細(xì)胞中的骨膠原是羥基磷灰石的粘合劑,它與羥基磷灰石共同構(gòu)成了骨骼的主體。因此,只要攝入足夠的膠原蛋白,就能保證正常機(jī)體鈣質(zhì)的攝入量,膠原蛋白可制成補(bǔ)鈣的保健食品。2.膠原蛋白在人體運(yùn)動(dòng)鍛煉的過程中,可以促使身體消耗大量脂肪達(dá)到的效果。但需要注意的是膠原蛋白本身是沒有作用的,它只能在運(yùn)動(dòng)呢鍛煉是增加脂肪的消耗量。3.膠原蛋白是身體免疫作用中負(fù)責(zé)重要功能的阿米巴細(xì)胞清掃異物的感知器,因此對(duì)預(yù)防疾病很有幫助??商岣呙庖邫C(jī)能、克制細(xì)胞、活化細(xì)胞機(jī)能、活化筋骨、治好關(guān)節(jié)炎及酸痛。膠原蛋白按其應(yīng)用可以分為食品級(jí)、一般級(jí)、醫(yī)藥級(jí)。開封鼠尾膠原廠家供應(yīng)

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鼠尾Ⅰ型膠原:選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié)。目前,臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植。其中,人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無機(jī)礦物材料[1-2],由于不含自體骨組織中的有機(jī)大分子Ⅰ型膠原蛋白,其臨床療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于自體骨組織。但是,自體骨移植和同種異體骨移植均來源于人類自身骨組織,數(shù)量有限,難以滿足臨床需要。因此,研發(fā)與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,成為全世界骨組織工程學(xué)者孜孜以求的目標(biāo)。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物,在分子結(jié)構(gòu)上,羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板,呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙,沿著膠原纖維的長軸縱向礦化生長[3]。本研究仿生天然骨組織的分子結(jié)構(gòu),酸解提取鼠尾肌腱的Ⅰ型膠原蛋白,重構(gòu)形成Ⅰ型膠原纖維,然后將Ⅰ型膠原纖維放置在礦化液中模擬人體內(nèi)骨生物礦化,通過透射電子顯微鏡(TEM)和電子衍射觀察羥基磷灰石鈣晶體在膠原纖維內(nèi)部的骨生物礦化。寧波正規(guī)鼠尾膠原廠家推薦