酵母RNA的提取方法：濃鹽法。酵母菌外層是厚達(dá)1.2μm的細(xì)胞壁，其化學(xué)成分是葡聚糖（30-40%）和甘露聚糖（30%），此外，脂類(lèi)8.5-13.5%，蛋白質(zhì)6-8%，還含有幾丁質(zhì)，酵母菌的葡聚糖，分子是為240000道爾頓，是一種分枝聚合物，葡聚糖與甘露糖之間由蛋白質(zhì)維系起來(lái)。近10%的甘露聚糖的側(cè)鏈通過(guò)磷酸二酯鍵與磷酸邊接，所有這些連接方式都使得酵母提取物首要的也是關(guān)鍵的是如何破壞細(xì)胞壁。破壁方法有自溶破壁、酶法破壁等多種方法，而用高濃度鹽溶液處理，同時(shí)加熱，以改變細(xì)胞的通透性，就可以使核酸從細(xì)胞內(nèi)釋放出來(lái)。由于RNA鈉鹽易溶于水,在含鹽的菌體溶液中,RNA有較高的溶解度,這樣,通過(guò)控制溫度使蛋白質(zhì)變性沉淀,通過(guò)離心將RNA及蛋白質(zhì)和脫核酵母菌體分離,從而達(dá)到提取之目的。其中食鹽起到自溶促進(jìn)劑，以及防腐與脫臭的作用?？俁NA提取試劑：提取的總RNA完整性好，無(wú)蛋白和DNA污染，可用于各種分子生物學(xué)常規(guī)實(shí)驗(yàn)。青島RNA提取試劑廠家推薦

RNA提取試劑的選擇：選擇合適的提取試劑是較重要的一步。好的提取試劑在確保成功的同時(shí)，操作方便且經(jīng)濟(jì)實(shí)用。對(duì)于動(dòng)物組織、簡(jiǎn)單的植物材料、各種微生物、培養(yǎng)細(xì)胞的totalRNA提取，Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市，進(jìn)一步豐富了TakaraRNA提取的產(chǎn)品線。該產(chǎn)品采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解系統(tǒng)，無(wú)需苯酚氯仿抽提等步驟，簡(jiǎn)單快捷。組織或細(xì)胞裂解后，提取操作光需20分鐘便可完成。廈門(mén)RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn)：有效分離和提取細(xì)胞質(zhì)RNA，與細(xì)胞核RNA。

病毒RNA提取試劑盒可以快速?gòu)娜?、血清、血漿、口腔拭子等生物液體中提取病毒RNA。在此試劑盒中，使用了核酸助沉劑--carrierRNA。核酸助沉劑不光有利于微量RNA的沉淀，同時(shí)也可以減少RNA的降解。本試劑盒操作簡(jiǎn)捷方便。30-40min就可以完成一個(gè)樣品的提取，得到純凈的RNA。RNA可以使用RT-PCR,real-timeqPCR,Northernblot,Dotblot,poly(A)+selection,體外翻譯，和分子克隆等實(shí)驗(yàn)。此外，裂解液VLS也是病毒RNA樣品的一個(gè)很好的保存液。儲(chǔ)存在裂解液中的病毒RNA（在病毒樣品中加入3倍體積裂解液后劇烈渦旋裂解樣品）可以在-20℃情況下穩(wěn)定至2個(gè)月；在-80℃情況穩(wěn)定半年;同時(shí)，儲(chǔ)存在裂解液中的樣品在運(yùn)輸過(guò)程中，也可以在4℃穩(wěn)定一日；-20℃穩(wěn)定一周。

RNA提?。褐饕噭㏕rizol是一種新型總RNA抽提試劑，內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì)，能迅速破碎細(xì)胞，壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶。1.Trizol試劑含有苯酚，具有毒性和刺激性，注重操作。2.RNase污染的主要來(lái)源是操作過(guò)程中手和空氣中的浮沉，注重配帶手套，樣品盡可能蓋嚴(yán)。3.細(xì)胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全會(huì)降低較后得率，因?yàn)橐徊糠諶NA會(huì)殘留在未裂解的細(xì)胞中。細(xì)胞裂解之后要看不見(jiàn)顆粒狀物質(zhì)（結(jié)締組織和骨除外）。在清洗和裂解細(xì)胞時(shí)較好在低溫下操作，防止在操作過(guò)程中釋放的內(nèi)源RNase降解了RNA。4.酵母和一些細(xì)菌由于細(xì)胞壁的特別結(jié)構(gòu)，可以加入Trizol試劑同時(shí)加入無(wú)RNase的玻璃珠并劇烈振蕩，使細(xì)胞裂解充分。2-8℃避光保存一年。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn)：用途植物RNA提取試劑可從植物Chemicalbook組織。

RNA是核糖核酸，DNA是脫氧核酸。區(qū)別：紫外吸收：核酸的λm＝260nm，堿基展開(kāi)程度越大，紫外吸收就越厲害。當(dāng)A＝1時(shí)，DNA：50ug/ml，RNA和單鏈DNA：40ug/ml，寡核苷酸：20ug/ml。用A260/A280還可來(lái)表示核酸的純度。沉降速度：對(duì)于拓?fù)洚悩?gòu)體（核苷酸數(shù)目相同的核酸），其沉降速度從達(dá)到小依次為：RNA;超螺旋DNA>解鏈環(huán)狀DNA;松弛環(huán)狀DNA;線形DNA也就是在離心管中較上層是線形DNA，較下面是RNA。電泳：核苷酸、核酸均可以進(jìn)行電泳，泳動(dòng)速度主要由分子大小來(lái)決定，因此，電泳是測(cè)定核酸分子量的好方法。DNA分子量測(cè)定較直接的方法：用適當(dāng)濃度的EB（溴嘧啶）染色DNA，可以將其他形式的DNA變成線形DNA，用電鏡測(cè)出其長(zhǎng)度，按B-DNA模型算出bp數(shù)，根據(jù)核苷酸的平均分子量就可計(jì)算出DNA的分子量。拭子RNA提取試劑的選擇？應(yīng)有較高的提取得率。貴陽(yáng)正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商

細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn)：方便快捷的離心柱操作方式。青島RNA提取試劑廠家推薦

動(dòng)物組織總RNA提?。?、盡量選取新鮮的組織，如果不是新鮮的（較好在三個(gè)月之內(nèi)-80℃冰箱或者在液氮中凍存的。在剪取組織時(shí)，不要拿到室溫直接剪取，一定要放到冰盒上，盡量避免反復(fù)凍融。2、用干凈的剪刀鑷子剪取一小塊組織，剪取樣本時(shí)盡量剪組織中心的部位，或者先將大塊的組織先從中間切開(kāi)，然后再在新鮮切口的位置剪取樣本。取下的組織要充分的剪碎，將剪碎的組織放到無(wú)RNA酶的EP管中，加入裂解液，剪碎的組織要充分接觸裂解液，準(zhǔn)備勻漿。3、正常組織選取綠豆粒大?。?0~60mg）的組織進(jìn)行勻漿，如果組織中含有大量的蛋白、脂肪或者是緊密的纖維組織比如肝臟等，適當(dāng)增減剪取組織的量（可選10~20mg）。4、如果提取的是魚(yú)肌肉，蝦肉，海蜇等含水分較多的組織時(shí)則應(yīng)當(dāng)適當(dāng)提高樣本量用量（推薦100~200mg）。5、條件允許的情況下，動(dòng)物組織使用高通道組織勻漿機(jī)勻漿后即可直接進(jìn)行提取步驟，如沒(méi)有該設(shè)備。6、較后提取后得到的RNA一定要立即放到冰盒上，以減少RNA的降解。青島RNA提取試劑廠家推薦