眾所周知,RNA提取是一項(xiàng)困難的工作。常見的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染。此外,不同的樣品類型有自己獨(dú)特的特性,需要特別注意。例如,微生物(如革蘭氏陽性/陰性細(xì)菌、菌類、古生菌等)的細(xì)胞壁堅(jiān)硬,不易被化學(xué)和酶解。其他樣本類型,如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等),可與RNA共沉淀,并可壓制下游分析,如RT-qPCR。RNA是不穩(wěn)定的,極易降解。許多樣品含有高水平的RNase,會(huì)快速降解RNA。為了使之較小化,較好在采集時(shí)穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室。然而,這些方法也有缺點(diǎn),如核酸的凍融損傷,并不是所有的研究人員在采集樣品時(shí)都能立即使用這些方法。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點(diǎn):針對(duì)植物材料獨(dú)特配置,操作更簡(jiǎn)單、流程更優(yōu)化。石家莊RNA提取試劑供應(yīng)商
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇會(huì)影響RNA的使用。將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,室溫放置1~2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。南京成都RNA提取試劑植物RNA提取試劑:提取的總RNA純度極高,沒有蛋白和其他雜質(zhì)的污染。
總RNA快速提取試劑盒背景資料;EpiQuik?總RNA分離快速試劑盒為從哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織中分離總RNA提供了一種快速、簡(jiǎn)單和經(jīng)濟(jì)有效的方法。洗滌劑用于溶解細(xì)胞和滅活核糖核酸酶。特殊的高鹽緩沖系統(tǒng)允許蛋白質(zhì)/DNA被去除,RNA結(jié)合到自旋柱的玻璃纖維基質(zhì)上,同時(shí)污染物通過柱。雜質(zhì)被有效地沖洗掉,純凈的RNA被洗脫。該試劑盒純化的RNA適用于多種常規(guī)應(yīng)用,包括RT-PCR、cDNA合成、northernblotting、差異顯示、引物延伸和mRNA選擇??俁NA快速提取試劑盒描述:本試劑盒包含了直接從培養(yǎng)細(xì)胞或組織中成功分離RNA所需的所有試劑。經(jīng)過裂解、結(jié)合和洗滌后,使用特殊設(shè)計(jì)的柱可以很容易地回收高達(dá)10個(gè)氧化格的RNA。然后,總RNA準(zhǔn)備用于各種下游應(yīng)用。
RNA充當(dāng)遺傳物質(zhì):其實(shí)RNA并不是只能干這些臟活累活,實(shí)際上,它也是可以充當(dāng)遺傳物質(zhì)的。病菌的遺傳物質(zhì)大多都是RNA,比如,這次的病菌的遺傳物質(zhì)就是RNA。不過,如今具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的生物,它們的遺傳物質(zhì)基本上都是DNA。而科學(xué)家認(rèn)為,其實(shí)較早的生物,其實(shí)都是以RNA作為遺傳物質(zhì)的。這個(gè)假說也被叫做RNA世界假說。其實(shí)這個(gè)也很好理解,我們都知道RNA和DNA都有堿基,而且就是利用的堿基互補(bǔ)原則來完成任務(wù)的。DNA要完成生命活動(dòng)就指導(dǎo)RNA。因此,只要RNA能夠完成類似于DNA的自我復(fù)制,那么就可以作為遺傳物質(zhì)。RNA提取試劑注意事項(xiàng):如皮膚接觸TRIReagent,請(qǐng)立即用大量去垢劑和水沖洗。
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢(shì)核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個(gè)月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2-8°C可以保存一周,-20°C條件下可以保存1年。RNA半衰期比較短,容易降解,建議提取后盡快進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),如反轉(zhuǎn)錄成cDNA,NorthernBlot等。RNA提取試劑:在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。太原RNA提取試劑進(jìn)貨價(jià)
拭子RNA提取試劑的選擇?拭子樣本的量與提取的核酸量成正比,提高核酸得率,可通過增加樣本量來實(shí)現(xiàn)。石家莊RNA提取試劑供應(yīng)商
RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。無論是人、動(dòng)物、植物還是細(xì)菌組織,該方法對(duì)少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果。TRIpure試劑操作上的簡(jiǎn)單性允許同時(shí)處理多個(gè)樣品,所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染,故而能夠作RNA印跡分析、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護(hù)分析和分子克隆等。和進(jìn)口品牌實(shí)驗(yàn)對(duì)照顯示,公司的產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)達(dá)到甚至超過了進(jìn)口產(chǎn)品的質(zhì)量。石家莊RNA提取試劑供應(yīng)商