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來源: 發(fā)布時間:2022-09-08

外泌體項目獲批學科方向:從統(tǒng)計來看,與前年相似外泌體立項集中的領(lǐng)域還是一些病癥學,近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成,耐藥性,檢測等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer(IF=10.679)上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號通路在女性食管ai中促進維持ai癥干細胞樣細胞的動態(tài)平衡。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch(IF=5.646)上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運p-STAT3可促進結(jié)直腸ai細胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的一篇文章則研究了腹腔灌洗液中細胞外囊泡相關(guān)的miRNA作為子宮內(nèi)膜ai分子標志物的可能性。此外,在神經(jīng)系統(tǒng)和精神疾病,中醫(yī)學及其他領(lǐng)域也有不少外泌體相關(guān)項目中標。外泌體提取試劑直銷價外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術(shù)已被許多臨床科研機構(gòu)普遍地應用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷形成了一種全新的細胞間信息傳遞系統(tǒng),影響細胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進程密切相關(guān)。溫州正規(guī)外泌體提取試劑價格

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研究中研究人員發(fā)現(xiàn),胃病細胞周圍富含TAM。TAM以M2極化表型為特征,并促進胃病細胞在體外和體內(nèi)的遷移。此外,研究人員發(fā)現(xiàn)M2衍生的外泌體決定了TAMs介導的遷移活動。通過使用質(zhì)譜方法,研究人員確定載脂蛋白E(ApoE)是M2巨噬細胞衍生的外泌體中高度特異性和有效的蛋白質(zhì)。ApoE是一種M2特異性且高度豐富的來源于M2外泌體的蛋白質(zhì),是決定胃病細胞遷移潛力的主要驅(qū)動因素。然而,來自ApoE-/-的小鼠M2巨噬細胞的外泌體在體外和體內(nèi)對胃病細胞的遷移沒有顯著影響。在機制上,M2巨噬細胞衍生的外泌體介導ApoE啟動的PI3K-Akt信號通路,并在TAM和受體胃病細胞之間進行細胞間轉(zhuǎn)移,促進細胞骨架的遷移??偟膩碚f,該研究發(fā)現(xiàn)外泌體介導的功能性ApoE蛋白從TAM轉(zhuǎn)移到一些病癥細胞,促進了胃病細胞的遷移。合肥正規(guī)外泌體提取試劑價格外泌體的提取方法:磁珠免疫法。

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外泌體的提取、分離方法:梯度密度離心法。研究發(fā)現(xiàn),外泌體的密度在1.1~1.19kg·L-1之間,因此,可以采用密度梯度離心法來分離外泌體。該方法是將超速離心結(jié)合蔗糖密度梯度或蔗糖墊結(jié)合,原理是先除去非囊泡物質(zhì),再通過梯度密度濃縮提取外泌體,該方法可以得到相對較為純凈的外泌體。傳統(tǒng)的梯度密度方法通常需要離心16h,但是2012年,研究者[15]使用了62~90h才分離出某些確切囊泡,因此,該方法可能不足以沉淀所有的外泌體。如果離心時間不充足,污染物質(zhì)可能和外泌體保持在相同的密度層,特別是這個密度范圍又比較寬。

外泌體研究的主要應用:外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生長與侵襲。一些病癥。一些病癥轉(zhuǎn)移。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血?。ˋML)細胞的增殖、遷移和壓制細胞凋亡。治病靶標。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,從而特異性高效靶向至胰腺病細胞,以明顯降低RAS活化、病細胞增殖和轉(zhuǎn)移過程。免疫。β細胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細胞外,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細胞,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。心血管。外泌體介導miR-155從平滑肌細胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細胞導致了內(nèi)皮細胞的損傷促進動脈硬化。分子標記。疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、菌類性肝炎、藥物性肝損傷和肝細胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量。

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外泌體的提取方法:1、色譜法。色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關(guān)系而對溶質(zhì)進行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進入凝膠孔,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,首先被流動相洗脫出來;小分子可進入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強地滯留,更慢地被洗脫出。分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,應用不普遍。2、超濾離心。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質(zhì),利用不同截留相對分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對樣品進行選擇性分離,便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效,且不影響外泌體的生物活性,是提取細胞外泌體的一種新方法。外泌體的分離純化一直是科研工作者關(guān)注的問題,獲得高純度的外泌體對后續(xù)的研究至關(guān)重要。合肥正規(guī)外泌體提取試劑價格

在體內(nèi)參與細胞通訊、細胞遷移、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程,與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關(guān)。溫州正規(guī)外泌體提取試劑價格

外泌體提?。?、過濾。超濾膜也可用于分離外泌體。根據(jù)外泌體的大小,從蛋白質(zhì)和其他大分子中分離外泌體。較常見的過濾膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔徑,可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌體,也有設(shè)計成微柱多孔硅纖毛結(jié)構(gòu)以分離40-100nm外泌體:不過,該方法由于過濾膜的粘附,可能會損失外泌體,并且過濾時的壓力和剪切力,可能會使外泌體變形受損。2、基于聚合物的沉淀技術(shù)?;诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合,在4℃溫育并低速離心。用于聚合物沉淀的較常見聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。用這種聚合物沉淀具有許多優(yōu)點,包括對分離的外泌體影響小、pH中性等。目前大多數(shù)快速分離外泌體的商品化試劑盒都是基于此方法。然而基于聚合物的沉淀方法可能會同時分離非囊泡污染物(包括脂蛋白)而且,聚合物材料的混雜可能會影響下游分析。溫州正規(guī)外泌體提取試劑價格

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