眾所周知，RNA提取是一項(xiàng)困難的工作。常見的挑戰(zhàn)包括RNA降解、低產(chǎn)率和/或純度以及DNA污染。此外，不同的樣品類型有自己獨(dú)特的特性，需要特別注意。例如，微生物(如革蘭氏陽(yáng)性/陰性細(xì)菌、菌類、古生菌等)的細(xì)胞壁堅(jiān)硬，不易被化學(xué)和酶解。其他樣本類型，如糞便和植物含有壓制劑(如多酚類、腐殖酸/黃腐酸、單寧酸等)，可與RNA共沉淀，并可壓制下游分析，如RT-qPCR。RNA是不穩(wěn)定的，極易降解。許多樣品含有高水平的RNase，會(huì)快速降解RNA。為了使之較小化，較好在采集時(shí)穩(wěn)定樣本中的RNA。常用的樣品穩(wěn)定方法包括液氮快速冷凍、干冰乙醇浴或-80°C冷凍室。然而，這些方法也有缺點(diǎn)，如核酸的凍融損傷，并不是所有的研究人員在采集樣品時(shí)都能立即使用這些方法。RNA提取試劑：TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染。無錫RNA提取試劑報(bào)價(jià)

RNA提取試劑盒原理：該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速，簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)有效的方法，可從全血，哺乳動(dòng)物細(xì)胞，細(xì)菌細(xì)胞和菌類細(xì)胞中分離總RNA。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細(xì)胞并滅活核糖核酸酶。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團(tuán)結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上，同時(shí)使污染物通過柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫，不用酚提取或醇沉淀。RNA提取試劑盒特點(diǎn)：1、快速程序在25-40分鐘內(nèi)提供高質(zhì)量的總RNA。2、即用型RNA，可在絕大多數(shù)下游應(yīng)用，例如RT-PCR，cDNA合成，NorthernBlotting，Differentialdisplay，PrimerExtension，mRNAselection。3、適用樣品：全血，哺乳動(dòng)物細(xì)胞，細(xì)菌細(xì)胞和菌類細(xì)胞（樣品起始量：300μl全血，10^7個(gè)哺乳動(dòng)物細(xì)胞，10^9個(gè)細(xì)菌細(xì)胞和10^8個(gè)菌類細(xì)胞?？偣部梢允褂迷撛噭┖羞M(jìn)行50次標(biāo)準(zhǔn)提取?？俁NA的產(chǎn)量可達(dá)30μg。產(chǎn)量可能因樣品類型而異。）金華RNA提取試劑廠家直銷快速程序在25-40分鐘內(nèi)提供高質(zhì)量的總RNA。

RNA提取試劑注意事項(xiàng)：1、需自備氯仿，異丙醇，DEPC，75%乙醇(DEPC水配制)，和DEPC水。2、所有離心管，泵頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時(shí)以去除RNA酶，其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜，然后滅菌，烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級(jí)水中，處理過夜，滅菌即成DEPC水。3、使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細(xì)胞或組織差一些。因?yàn)樵诩?xì)胞或組織凍融過程中一些細(xì)胞或組織內(nèi)的RNase會(huì)被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時(shí)抽提RNA，推薦先加入適量TRIReagent，并裂解樣品后凍存。

RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長(zhǎng)鏈狀分子。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構(gòu)成。在細(xì)胞中，RNA種類繁多。根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同，RNA主要分三類，即tRNA、rRNA，以及mRNA。mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板；tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者；rRNA是組成核糖體的部分，而核糖體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所。細(xì)胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA，像是組成剪接體（spliceosome）的snRNA，負(fù)責(zé)rRNA成型的snoRNA，以及參與RNAi作用的miRNA與siRNA等，可調(diào)節(jié)基因表達(dá)。再采集樣本之后馬上加入 DNA/RNA Shield，可以快速降解掉 RNase 等蛋白物質(zhì)。

Trizol是一種總RNA抽提試劑，內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì)，能迅速裂解細(xì)胞，壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進(jìn)行提取組織或細(xì)胞中的RNA。原理:在勻質(zhì)化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時(shí)能破壞細(xì)胞及溶解細(xì)胞成分。加入氯仿離心后，裂解液分層成水相和有機(jī)相。RNA存在于水相中。水相轉(zhuǎn)移后，RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后，用乙醇可從中間相沉淀得到DNA，加入異丙醇沉淀可從有機(jī)相得到蛋白質(zhì)。異硫氰酸胍氯化銫超速離心法:原理：使用蛋白質(zhì)變性劑異硫氰酸胍有效壓制RNA酶的活性，經(jīng)過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質(zhì)，進(jìn)行密度梯度超速離心，RNA沉淀于管底，而DNA與蛋白質(zhì)在上清液中。使用這種方法，不但能得到高質(zhì)量的RNA，而且能同時(shí)分離出細(xì)胞染色體DNA。tRNA是mRNA上堿基序列（即遺傳密碼子）的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者。金華正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹

細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn)：試劑盒可用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞或者組織樣品的提取。無錫RNA提取試劑報(bào)價(jià)

血漿/血清中miRNA提取試劑盒：是專門針對(duì)血清、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的，利用吸附柱法從血清、血漿樣品中簡(jiǎn)單快捷提取高純度高質(zhì)量的miRNA。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結(jié)合液miRBP2具有高效裂解及提取效果。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質(zhì)膜材料，對(duì)RNA尤其是smallRNA（<200nt）具有結(jié)合能力，與常用的抗凝劑（包括肝素、EDTA、檸檬酸鈉、草酸鈉）兼容，得到的miRNA可直接用于RT-PCR和Northern雜交等后續(xù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作。普通植物總ＲＮＡ提取試劑盒：采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱，可以從普通植物的根、莖、葉中快速提取總RNA，30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程，提取的總RNA純度高，沒有DNA和蛋白質(zhì)的污染，適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot雜交等實(shí)驗(yàn)?？俁NA吸附柱保證RNA提取速度快，提取效率高。高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質(zhì)，提取RNA的純度高，產(chǎn)量大。無錫RNA提取試劑報(bào)價(jià)