細胞外基質:為了獲得體內衍生的仿生基質,從心臟末端抽取全血,離心后取上層血液與預提取的EVs混合,進行自凝集。通過壓縮將自凝混合物制備成一定形狀的血源性水凝膠(AH)。通過SEM觀察發(fā)現(xiàn)EVs附著在纖維上,因而說明AH與Evs可成功結合(圖3A,B)。檢測ALP活性和鈣濃度發(fā)現(xiàn)兩者都隨時間增加,持續(xù)到AH降解完畢,說明含EV的AH具有緩慢、漸進的釋放特性(圖3C,D)。然后建立共培養(yǎng)體系,比較AH、AH+E-EVs、AH+L-EVs、AH+C-EVs(AH與E-EVs、L-EVs復合)對BMSCs活力、增殖、遷移、成骨分化的影響(圖3E-K),結果表明AH與E-EVs具有協(xié)同作用,可促進BMSCs的增殖和遷移,并且AH與E-Evs的聯(lián)合應用可以促進早期骨形成。纖連蛋白與細胞外結構域的連接啟動細胞內信號通路,并通過一組銜接分子如肌動蛋白與細胞骨架結合。廈門細胞外基質膠廠家供應
細胞外基質層粘連蛋白:(laminin,LN)LN也是一種大型的糖蛋白,與Ⅳ型膠原一起構成基膜,是胚胎發(fā)育中出現(xiàn)較早的細胞外基質成分。LN分子由一條重鏈(α)和二條輕鏈(β、γ)借二硫鍵交聯(lián)而成,外形呈十字形,三條短臂各由三條肽鏈的N端序列構成。每一短臂包括二個球區(qū)及二個短桿區(qū),長臂也由桿區(qū)及球區(qū)構成。LN分子中至少存在8個與細胞結合的位點。例如,在長臂靠近球區(qū)的。鏈上有IKVAV五肽序列可與神經(jīng)細胞結合,并促進神經(jīng)生長。鼠LNα1鏈上的RGD序列,可與αvβ3整合素結合?,F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)7種LN分子,8種亞單位(α1,α2,α3,β1,β2,β3,γ1,γ2),與FN不同的是,這8種亞單位分別由8個結構基因編碼。南京長沙細胞外基質膠細胞外基質并非像過去認為的起惰性支持物的作用,或將細胞連接在一起,形成組織、部位。
細胞外基質的作用:細胞外基質不只具有連接、支持、保水、抗壓及保護等物理學作用,而且對細胞的基本生命活動發(fā)揮較全的生物學作用。影響細胞的存活、生長與死亡正常真核細胞,除成熟血細胞外,大多須粘附于特定的細胞外基質上才能克制凋亡而存活,稱為定著依賴(anchoragedependence)。例如,上皮細胞及內皮細胞一旦脫離了細胞外基質則會發(fā)生程序性死亡。此現(xiàn)象稱為凋亡(anoikis,aGreekwordmeaning“homelessness”)不同的細胞外基質對細胞增殖的影響不同。例如,成纖維細胞在纖粘連蛋白基質上增殖加快,在層粘連蛋白基質上增殖減慢;而上皮細胞對纖粘連蛋白及層粘連蛋白的增殖反應則相反。部位細胞的增殖喪失了定著依賴性,可在半懸浮狀態(tài)增殖。
根據(jù)膠原的結構和功能可將其分為:1.錨絲狀膠原(collagenofaachoringfilament)Ⅶ型膠原屬此組,其肽鏈三螺旋長達1530個氨基酸,中間穿插許多非膠原序列。兩條前膠原肽鏈的羧基端肽端-端重疊交聯(lián)形成二聚體,多個二聚體以羧基端交聯(lián)區(qū)為中心側-側聚集成錨絲狀纖維。這一纖維的兩個氨基端肽連接到基地膜的某種分子上起錨定作用,故名。2.三螺旋區(qū)不連續(xù)的纖維相關性膠原(fibrilassociatedcollagenswithintenruptedtriplehelices;FACIT)這一組包括Ⅸ、Ⅻ、ⅩⅣ、ⅩⅥ及ⅩⅨ型膠原,而且其數(shù)目還不斷增加。其本身不形成纖維,但與纖維性膠原纖維的表面相連。目前對這一組膠原的確切功能及組織、細胞分布尚不了解。ⅩⅣ型曾被稱為粗纖維調節(jié)素(undulin),但現(xiàn)在認為其特征性結構為膠原三螺旋,故名ⅩⅣ型膠原。大量合成的腎臟細胞外基質取代了腎小球各功能細胞的空間。
結構:細胞外基質的成分由固有細胞在細胞內產生,并通過胞吐作用分泌到細胞外基質中。一旦被分泌到胞外,它們就會與現(xiàn)有基質聚集在一起。細胞外基質由纖維蛋白和糖胺聚糖(GAGs)交聯(lián)形成的網(wǎng)狀物組成。蛋白聚糖糖胺聚糖(GAGs)是碳水化合物聚合物,主要附著在細胞外基質蛋白上形成蛋白聚糖(透明質酸是一個明顯的例外,見下文)。蛋白聚糖具有吸引帶正電荷的鈉離子(Na+)的凈負電荷,鈉離子通過滲透作用吸引水分子,保持細胞外基質和固有細胞水分充足。蛋白聚糖也有助于在細胞外基質中捕獲和儲存生長因子。承擔控制、植物性調節(jié)、免疫防御功能等作用。杭州細胞外基質膠價格
導致腎小球內腎臟細胞外基質合成異常增加。廈門細胞外基質膠廠家供應
如何理解細胞外基質影響細胞的粘附過程:參與細胞的遷移細胞外基質可以控制細胞遷移的速度與方向,并為細胞遷移提供“腳手架”.例如,纖粘連蛋白可促進成纖維細胞及角膜上皮細胞的遷移;層粘連蛋白可促進多種部位細胞的遷移.細胞的趨化性與趨觸性遷移皆依賴于細胞外基質.這在胚胎發(fā)育及創(chuàng)傷愈合中具有重要意義.細胞的遷移依賴于細胞的粘附與細胞骨架的組裝.細胞粘附于一定的細胞外基質時誘導粘著斑的形成,粘著斑是聯(lián)系細胞外基質與細胞骨架“鉚釘”.由于細胞外基質對細胞的形狀、結構、功能、存活、增殖、分化、遷移等一切生命現(xiàn)象具有較全的影響,因而無論在胚胎發(fā)育的形態(tài)發(fā)生、部位形成過程中,或在維持成體結構與功能完善(包括免疫應答及創(chuàng)傷修復等)的一切生理活動中均具有不可忽視的重要作用。廈門細胞外基質膠廠家供應