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徐州正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-08-25

拭子RNA提取試劑的選擇?拭子樣本的量與提取的核酸量成正比,如果要提高核酸得率,也可通過增加樣本量來實(shí)現(xiàn)。一般先取一根拭子的涮洗液樣本,然后進(jìn)行提取,如結(jié)果不理想可考慮增加樣本量或重新采樣。但如果增加樣本量或重新采樣還不能得到滿意結(jié)果,應(yīng)及時(shí)考慮更換試劑盒。目前國內(nèi)常用的拭子核酸提取試劑有Q、Biog等。根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn),Q和T品牌試劑盒的拭子RNA提取得率(一根口腔拭子在口咽部來回刮擦10次)在0.5-3.5ug。同樣處理的口咽拭子,Biog試劑盒的提取得率在1-4ug,基本上都能滿足下游PCR相關(guān)實(shí)驗(yàn)的要求。血漿/血清RNA提取試劑盒:總RNA吸附柱保證RNA提取速度快,提取效率高。徐州正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家

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RNA提取:預(yù)備工作RNA酶(Rnase)是導(dǎo)致RNA降解較主要的物質(zhì)。此酶非常穩(wěn)定,在一些極端的條件下只可暫時(shí)失活,但限制因素去除后又迅速恢復(fù)活性。常規(guī)高溫高壓滅菌方法和蛋白壓制劑不能使所有的Rnase完全失活。1.它普遍存在于人的皮膚上,因此制備RNA時(shí)必須戴手套。2.RNase的又一污染源是取液器。根據(jù)取液器制造商的要求對(duì)取液器進(jìn)行處理。一般情況下采用以DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的內(nèi)部和外部,可基本達(dá)到要求。3.塑料制品、玻璃和金屬物品的處理。徐州正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家血漿/血清RNA提取試劑盒:高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質(zhì),提取RNA的純度高,產(chǎn)量大。

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Trizol法是一種新型總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞,壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶。雖然Trizol里面含有RNA酶壓制劑的,1ml的Trizol一般較多只能裂解100mg的組織。但是如果組織過量,Trizol無法完全浸潤組織無法完全裂解組織,多余組織內(nèi)的RNA酶等物質(zhì)會(huì)導(dǎo)致RNA的降解。這是RNA降解的很重要的原因。同時(shí),由于RNA容易降解,在實(shí)驗(yàn)過程中一般都要求口罩的,避免組織的污染。同時(shí)選用的無RNA酶的進(jìn)口泵頭、EP管以及DEPC水,在提取過程中,一定要時(shí)刻提醒自已RNaseFree-RNaseFree-RNaseFree,實(shí)驗(yàn)就成功一半啦~加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機(jī)相。

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DNA和RNA的鑒別染色:利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA。吖啶橙作為一種熒光染料已被用于染色固定,非固定細(xì)胞核酸,或作溶酶體的一種標(biāo)記。觀察死亡細(xì)胞熒光變色性變化以及區(qū)別分裂細(xì)胞和靜止細(xì)胞群體。雖然測定DNA和RNA含量時(shí)較難獲得好的重復(fù)性結(jié)果,但該方法已被許多實(shí)驗(yàn)室普遍采用。RNA是核糖核酸,DNA是脫氧核酸。區(qū)別:溶解性:都溶于水而不溶于乙醇,因此,常用乙醇來沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚來沉淀RNA。在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶 K、溶菌酶等)。太原正規(guī)RNA提取試劑

細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):有效分離和提取細(xì)胞質(zhì)RNA,與細(xì)胞核RNA。徐州正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家

昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將50~300mg昆蟲組織放入10~15mL塑料離心管中,加入1mL溶液A,然后用勻漿器勻漿5~20秒。勻漿時(shí)會(huì)產(chǎn)生泡沫,但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎昆蟲組織,硯磨完后加入1mL溶液A。注意:溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能會(huì)產(chǎn)生沉淀,使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。將勻漿物或硯磨物轉(zhuǎn)移至干凈的1.5mL塑料離心管中(可以不必轉(zhuǎn)移非液體的細(xì)胞碎片)。在離心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自備氯仿,在振蕩器上振蕩30秒混勻,此時(shí)溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時(shí)必須使管底溶液震蕩起來。室溫12000rmp離心3~5分鐘,兩相間將有約5-10毫米厚的細(xì)胞破碎物。將上清液(約0.6mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中,下層有機(jī)相和中間層含有DNA、蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì),避免觸及或吸取。較好留下100μL上清液不取。加入等體積的溶液C,充分顛倒混勻。徐州正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家

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