糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽性程度和陽性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷。天津正規(guī)糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
PAS染色的臨床意義:1.紅細(xì)胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),有時(shí)陽性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比增高,陽性反應(yīng)的程度也很強(qiáng)。有時(shí)紅細(xì)胞也呈陽性反應(yīng)。②缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),有時(shí)陽性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比也較高。有時(shí)紅細(xì)胞也可呈陽性反應(yīng)。③巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血和白血病等疾病時(shí),幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng),有時(shí)*個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng)天津口碑好的糖原染色試劑盒廠家直銷再糖原染色,可鑒別是糖原還是其他多糖類物質(zhì)。
GUS染色步驟:1.將準(zhǔn)備好的材料浸泡在GUS染色液中,于25-37℃保溫1小時(shí)至過夜。2.葉片等綠色材料轉(zhuǎn)入70%乙醇中脫色2-3次,至陰性對(duì)照材料呈白色。3.肉眼或顯微鏡下觀察,白色背景上的藍(lán)色小點(diǎn)即為GUS表達(dá)位點(diǎn)。注:用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和部位的不同而異。例如,擬南芥的根、花和葉片以及幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片(1-3mm)。當(dāng)操作大的組織和樣品時(shí),可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞。
糖原及粘液染色法注意事項(xiàng):1、糖原的固定要及時(shí),而且標(biāo)本要新鮮。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時(shí)可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧俊F浯慰紤]堿性品紅本身,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,但不同批號(hào),其效果就可能不同,應(yīng)特別引起注意。腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽性。
網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,對(duì)疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗(yàn)的重要指標(biāo),尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置。網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,大量堆積時(shí)則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。植物材料在選擇時(shí)須盡可能不損傷植物體或所需要的部分。江西咨詢糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
在滴加染液時(shí),務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費(fèi)試劑。天津正規(guī)糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個(gè)方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,打開應(yīng)是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕?,若成團(tuán)或沒有氣味,則不能用,配制時(shí)使用的容器、藥勺、稱藥天平與稱藥紙等必須潔凈、無污染。新配制好的Schiff劑為無色透明液體[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用時(shí)取一份恢復(fù)到室溫即可。沈洪武等通過對(duì)比染色發(fā)現(xiàn),冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,室溫高時(shí)氧化時(shí)間適當(dāng)縮短;如果染色時(shí)環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時(shí)間長(zhǎng),可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽性。因此,室溫較高時(shí)可適當(dāng)縮短反應(yīng)時(shí)間。天津正規(guī)糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家