鼠尾膠原的生物礦化和TEM觀察:果凍樣Ⅰ型膠原蛋白膠體初始浸泡在礦化液中時呈微白色;礦化2d后,膠體的顏色逐漸加深至乳白色;礦化6d后,隨著羥基磷灰石晶體礦化長入膠原纖維內(nèi)部,膠體顏色加深至純白色,并在膠體表面沉積了一層薄薄的羥基磷灰石鈣晶體,予鑷子夾起,其表層羥基磷灰石鈣晶體破碎散落。TEM表征顯示:礦化2d后,Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔周期性條紋結(jié)構(gòu)逐漸模糊,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維內(nèi)部,膠原纖維部分礦化,沿著膠原纖維生長,忖度變深;礦化6d后,Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔D-Band結(jié)構(gòu)完全消失,膠原纖維內(nèi)部可以看到黑色羥基磷灰石晶體,嵌入膠原纖維縱向生長。當(dāng)鼠尾Ⅰ型膠原纖維完全礦化時,由于整條膠原纖維都被羥基磷灰石鈣晶體占據(jù),膠原纖維呈現(xiàn)黑色,選區(qū)衍射斑圖符合羥基磷灰石表征。成纖維細(xì)胞膠原凝膠復(fù)合物有著良好的生物學(xué)特性。蘇州正規(guī)鼠尾膠原推薦廠家
膠原蛋白是脊椎動物和無脊椎動物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚、筋、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,不論來源于哪一種動物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,有脯氨酸和羥脯氨酸。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,膠原蛋白分為20幾個亞型。但較為常見的為Ι、Π、ΙΙΙ型膠原蛋白,即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。蘇州正規(guī)鼠尾膠原推薦廠家開蓋在超凈臺上過夜晾干,也可以在室溫放置1小時后。
除了讓細(xì)胞更好貼上去,鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,這樣可以在培養(yǎng)皿中一定程度上模擬身體內(nèi)部的生長環(huán)境,讓細(xì)胞在更真實(shí)地條件下進(jìn)行生長。當(dāng)然,除了這些,耗子尾汁還能做到很多事情,只需要打開網(wǎng)站——知網(wǎng),輸入鼠尾膠原蛋白就能看到,例如鼠尾膠原蛋白可用于制備防皺保濕或美白產(chǎn)品,制作止血海綿敷料等各種用途。NO.3鼠尾DNA除了從整條鼠尾中提取的鼠尾膠原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制備「耗子尾汁」的好材料。這類「耗子尾汁」通常用來鑒別耗子的基因型,對于轉(zhuǎn)基因小鼠而言,如果無法通過毛色來分辨動物的基因型,往往會選用經(jīng)典的PCR法。
膠原蛋白的提取方法:酶法提?。好阜ㄌ崛∈抢玫鞍酌甘鼓z原溶解,水解條件溫和,反應(yīng)速率快,提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結(jié)構(gòu),蛋白純度高,理化性質(zhì)穩(wěn)定,且無環(huán)境污染。酶法提取常用的蛋白酶有:胃蛋白酶、胰蛋白酶或者復(fù)合酶。工藝可選擇一步法,即利用酶液直接提?。欢椒?,即先用酸或者堿進(jìn)行初步提取,然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO預(yù)處理革屑,然后用堿性蛋白酶提取膠原的水解產(chǎn)物。CabezaL.F.T等[7]先用胃蛋白酶,再用堿性蛋白酶提取了2種不同的膠原水解產(chǎn)物。趙蒼碧等[2]采用胃蛋白酶和無花果蛋白酶消化法從牛腱中提取膠原蛋白,探討了酶和酶的加入量對提取結(jié)果的影響,給出了酶對膠原提取較佳工藝配比,酶與牛腱的質(zhì)量比為0.1時效果較佳,而使用無花果蛋白酶時,0.01的配比較佳。制備鼠尾膠原:重復(fù)步驟2、3,直至尾腱量夠用。
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用:鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運(yùn)輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,培養(yǎng)7天時進(jìn)行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接;同一細(xì)胞任意兩點(diǎn)纖毛擺動頻率是相同的;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的.結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,為今后研究鼻內(nèi)用藥對纖毛清理功能的影響提供了良好的方法和途徑。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。深圳正規(guī)鼠尾膠原廠家直銷
鼠尾膠原醋酸溶解:氯仿的量約為膠原溶液的10%。蘇州正規(guī)鼠尾膠原推薦廠家
膠原蛋白的適用征狀:1、由于工作勞累,睡眠不足形成的皮膚晦暗無光、發(fā)黃、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀。2、由于年齡、太陽輻射因素引起的皮膚松弛、下垂、皺紋、干燥等皮膚衰老現(xiàn)象。3、由于體內(nèi)異常黑色素分泌旺盛,大量沉積皮膚表面,肌膚不能及時代謝出異常黑色素,形成各種色斑。4、由于長期戶外活動及皮膚保養(yǎng)不當(dāng)使膚質(zhì)受到損傷,過早出現(xiàn)細(xì)紋,皮膚干燥、脫皮、、毛孔粗大等不良癥狀。5、由于內(nèi)分泌功能紊亂,皮膚膚質(zhì)差、皮膚發(fā)油、發(fā)暗,易長青春痘留下的色印、色素沉著等。6、由于生活無規(guī)律,吸煙等因素,造成的黑眼圈,眼袋等問題。7.長期電腦旁工作,電腦輻射造成脫發(fā),內(nèi)分泌紊亂問題。蘇州正規(guī)鼠尾膠原推薦廠家