染色的原理和臨床意義:在同一張涂片上進行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色等。反應的原理基本上同各自的染色原理,同一張涂片上的細胞要分別在兩種不同的基質液中作用一定時間,較后復染、顯微鏡觀察。酯酶雙染色可同時觀察兩種不同的白血病細胞,因此在鑒別白血病類型方面明顯優(yōu)于單項染色。急性粒-單核細胞白血病該染色法在急性粒-單核細胞白血病的同一張涂片上可分別出現(xiàn)α-NBE染色和NAS-DCE染色陽性反應的細胞,甚至少數(shù)病例在單個細胞內同時出現(xiàn)以上兩種酯酶染色的雙重陽性反應,因此酯酶雙染色反應在急性粒-單核細胞白血病的診斷上具有獨特價值。本試劑盒常用于常規(guī)組織切片染色,對于細胞、極其薄的切片。浙江如何使用糖原染色試劑盒生產廠家
糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經過碘酸氧化,產生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應稱為碘酸-雪夫(PAS)反應。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO42H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,一般可用3個月,變黃則失效。上海如何使用糖原染色試劑盒銷售廠家特殊染色是為了顯示與確定組織或細胞中的正常結構或病理過程中出現(xiàn)的異常物質。
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:PAS染色時需于暗處加蓋反應,染色時間10~20min(染色時間長短取決于試劑的質量和環(huán)境溫度,SO濃度高,染色時間適當縮短;環(huán)境溫度高,染色時間也應適當縮短,反之則需適當延長反應時間)。染色過程中不能接觸伊紅,以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時,較好作消化對照,即取兩張連續(xù)切片,其中一張脫蠟至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后與不經消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如經消化處理的切片染色陰性,不經消化處理的切片染色陽性,即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,不能保存,因此,必須現(xiàn)配現(xiàn)用,用過一次即應廢棄。各種試劑必須是化學純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。
糖原染色生物技術優(yōu)勢:(1)擁有針對不同組織的特殊固定液;(2)擁有日本進口的各種染料,保證切片染色效果;(3)擁有千錘百煉的專業(yè)人才隊伍,保證實驗快速、有效的完成。實驗樣本要求:(1)植物材料在選擇時須盡可能不損傷植物體或所需要的部分;(2)動物材料取用時需對動物施以麻醉,常用的麻醉劑有氯仿和,或將動物殺死后迅速取出所需要的組織;(3)取材必須新鮮,這一點對于從事細胞生物學研究尤為重要,應該盡可能割取生活著的組織塊,并隨即投入固定液,固定液與組織塊的體積比應在10:1;(4)切取材料時刀要銳利,避免因擠壓細胞使其受到損傷;(5)切取的材料應小而薄,便于固定液迅速滲入內部。一般厚度不超過3mm,大小不超過5×5m㎡。在肝糖原染色中用10%甲醛液固定肝組織。
糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,它能氧化糖類及有關物質中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結合成一種品紅化合物,產生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細胞內其他物質,使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關鍵的步驟。PAS技術是很少可檢測不同種類的黏液物質(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。適用于教學和科研上的核染色質染色,也可用于黏蛋白染色(如軟骨的黏多糖)。天津咨詢糖原染色試劑盒廠家供應
幫助鑒別白血病細胞和腺骨髓轉移的腺細胞,腺細胞呈陽性反應。浙江如何使用糖原染色試劑盒生產廠家
糖原染色法:染色原理細胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過碘酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無色品紅結合后呈現(xiàn)紫紅色,沉積在細胞內多糖所在之處。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加過碘酸溶液,氧化5min;3.蒸餾水洗10min;4.滴加Schiff試劑,侵染10-20min;5.傾去Schiff試劑,流水沖洗10min;6.滴加蘇木素染色液,染核1-2min;7.流水沖洗5min;8.酸性乙醇分化液分化浙江如何使用糖原染色試劑盒生產廠家