細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。為什么要進行細胞凍存？連續(xù)培養(yǎng)的細胞系容易發(fā)生遺傳漂變，有限細胞系較終會發(fā)生衰老，所有培養(yǎng)的細胞都易受到微生物污染，即使運轉情況較好的實驗室也會遇到設備故障的問題。由于已建立的細胞系是一種寶貴資源，更換細胞系成本高昂，而且耗費時間，因此，十分有必要將細胞冷凍起來長期保存。除此之外，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。度保存的無血清凍存液緩慢加入離心后的細胞沉淀中。寧波無血清細胞凍存液供應商

細胞凍存是細胞培養(yǎng)技術中細胞進行保種并長期保存的常用方法，其中細胞凍存液，作為細胞凍存時必須使用的一種溶液，不光光是說只是用來進行細胞的保存，在細胞的購買、寄贈、交換和運送過程中也起著關鍵作用，因此選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細胞，細胞內和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，能導致細胞內發(fā)生機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等，從而引起細胞死亡。而細胞凍存液就相當于細胞的保護劑，在凍存細胞時將細胞懸浮于凍存液中，可使冰點降低，提高細胞膜對水的通透性，在緩慢的凍結條件下，能使細胞內水份在凍結前透出細胞，可以防止或減少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。這樣就使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，在需要時直接復蘇就可恢復細胞活性。寧波無血清細胞凍存液供應商無血清凍存液用途：置于-20℃保存，有效期為3年。

細胞凍存液的作用是什么？滲透性冷凍保護劑：可以滲透到細胞內，一般是一些小分子物質，主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。非滲透性冷凍保護劑：不能滲透到細胞內，一般是些大分子物質，主要包括聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及Hetastarch等。冷凍保護劑同溶液中的水分子結合，發(fā)生水合作用，弱化水的結晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成，同時冷凍保護劑可以通過在細胞內外維持一定的摩爾濃度，降低細胞內外未結冰溶液中電解質的濃度，使細胞免受溶質的損傷。滲透性冷凍保護劑的保護機制是在細胞冷凍懸液完全凝固之前，滲透到細胞內，在細胞內外產(chǎn)生一定的摩爾濃度，降低細胞內外未結冰溶液中電解質的濃度，從而保護細胞免受高濃度電解質的損傷同時。細胞內水分也不會過分外滲，避免了細胞過分脫水皺縮。

復蘇方：法1）從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2）待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。3）離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4）清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。5）加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。6）鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。

無血清快速細胞凍存液，是一種新型的快速凍存細胞的保護液，可將細胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動物來源的血清成分，能夠有效提高細胞凍存活率和復蘇活力，減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細胞安全，能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細胞的凍存需求。注意事項:請選擇對數(shù)生長期細胞進行凍存;凍存液加入細胞后，請盡快放入-80C冰箱凍存;3.本產(chǎn)品凍存細胞可以在-80°C冰箱保存3年以上;4.若需長期凍存細胞，請轉移至液氮罐中貯存;凍存液中含DMSO成分，為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套。從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。成都無血清細胞凍存液廠家直銷

無血清細胞凍存液：凍存細胞復蘇率在90%以上。寧波無血清細胞凍存液供應商

細胞凍存和復蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內冰晶的產(chǎn)生，從而使細胞產(chǎn)生內源性的機械損傷，引起細胞內環(huán)境滲透壓，PH，電解質等的改變，進而促使細胞死亡。在過去的幾十年中，科研工作者將培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例配制成凍存液，并配合手工使細胞從4℃，-20℃，-80℃到液氮中逐步轉移使其達到“慢凍”的效果。但這種自制的凍存液儲存時間一般比較短，不能滿足時間跨度大的實驗項目的需求。且這樣人力和時間成本大，人手操作的誤差和血清制品的批間差也給實驗結果帶來了不穩(wěn)定性。寧波無血清細胞凍存液供應商