無(wú)血清細(xì)胞凍存液相對(duì)于含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)有：1.即用型，無(wú)需現(xiàn)配，直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型，適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞。3.無(wú)需程序降溫，可直接放置-80℃凍存，操作簡(jiǎn)單。4.不含血清，較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清，批次間差異小。6.無(wú)需液氮，-80℃冰箱長(zhǎng)期凍存。7.可培養(yǎng)板整板凍存，例如雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)可節(jié)省篩選過(guò)程。無(wú)血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分，含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。含血清，細(xì)胞污染(細(xì)菌、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高。南京正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液直銷價(jià)

無(wú)血清細(xì)胞凍存液：1.逐滴加入5-7mL的預(yù)熱的培養(yǎng)基到15mL的離心管中，加入的同時(shí)輕輕混勻。2.室溫（15-25°C）以300xg離心5分鐘。3.吸出培養(yǎng)基，使細(xì)胞沉淀完好無(wú)損。使用2mL血清移液管輕輕將細(xì)胞沉淀重懸于1mL的培養(yǎng)基中。小心保持細(xì)胞作為聚集體。4.將0.5mL的細(xì)胞混合物轉(zhuǎn)移到含有培養(yǎng)基的預(yù)包被的6孔板的培養(yǎng)孔中（例如，每個(gè)冷凍管可以鋪板兩個(gè)孔）。注意：鋪板多少孔可能需要根據(jù)凍存的細(xì)胞聚集體數(shù)量進(jìn)行調(diào)整。通常在復(fù)蘇后，要比在常規(guī)的傳代鋪板更多的細(xì)胞聚集體數(shù)量。將培養(yǎng)板放入37°C培養(yǎng)箱?？焖偾昂笞笥业膿u晃培養(yǎng)板數(shù)次，將細(xì)胞聚集體分布均勻。24小時(shí)內(nèi)不要移動(dòng)培養(yǎng)板。正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家將要凍存的細(xì)胞懸液，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)后離心。

細(xì)胞凍存液的操作步驟：1.配置含10%DMSO或凡士林、10～20%小牛血清的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液;2.取對(duì)數(shù)成長(zhǎng)期的體細(xì)胞，除去舊細(xì)胞培養(yǎng)液，用PBS清理。3.除去PBS，添加適量蛋白酶(遮蓋細(xì)胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長(zhǎng)發(fā)育的體細(xì)胞消化吸收出來(lái);4.抽濾1000rpm，5min;5.除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液，用塑料吸管輕輕地吹打使體細(xì)胞勻稱，記數(shù)，調(diào)整凍存液中體細(xì)胞的較后相對(duì)密度為5牙周106/ml～1牙周107/ml;6.將體細(xì)胞分裝進(jìn)凍存管中，每管1～1.5ml;7.在凍存管上標(biāo)出體細(xì)胞的名字，凍存時(shí)間及作業(yè)者;8.凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序流程為減溫速度-1～-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃下列時(shí)，可升至-5℃～-10℃/min;到-100℃時(shí)，則可快速滲入液態(tài)氮中。

無(wú)血清細(xì)胞凍存液，含多種保護(hù)劑成分。一些保護(hù)劑，易于穿透細(xì)胞，避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞，同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞，但可以在冰晶形成之前，優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子，降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽(yáng)離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量，為多種保護(hù)劑組合，在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù)，較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。無(wú)血清細(xì)胞凍存液不含牛血清，無(wú)動(dòng)物源組份。2-8℃即可穩(wěn)定保存，無(wú)需冷凍，即取即用。凍存細(xì)胞，無(wú)需程序降溫。凍存細(xì)胞復(fù)蘇率在90%以上。凍存液成分由原來(lái)血清變?yōu)闊o(wú)血清，無(wú)動(dòng)物源成分。

細(xì)胞凍存液的操作步驟：1.配置含10%DMSO或凡士林、10～20%小牛血清的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液;2.取對(duì)數(shù)成長(zhǎng)期的體細(xì)胞，除去舊細(xì)胞培養(yǎng)液，用PBS清理。3.除去PBS，添加適量蛋白酶(遮蓋細(xì)胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長(zhǎng)發(fā)育的體細(xì)胞消化吸收出來(lái);4.抽濾1000rpm，5min;5.除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液，用塑料吸管輕輕地吹打使體細(xì)胞勻稱，記數(shù)，調(diào)整凍存液中體細(xì)胞的較后相對(duì)密度為5牙周106/ml～1牙周107/ml;6.將體細(xì)胞分裝進(jìn)凍存管中，每管1～1.5ml;7.在凍存管上標(biāo)出體細(xì)胞的名字，凍存時(shí)間及作業(yè)者;8.凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序流程為減溫速度-1～-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃下列時(shí)，可升至-5℃～-10℃/min;到-100℃時(shí)，則可快速滲入液態(tài)氮中。也可將配有體細(xì)胞的凍存管放進(jìn)-20℃電冰箱2h，隨后放進(jìn)-70℃電冰箱中留宿，取下凍存管，移進(jìn)液氮容器內(nèi)?？焖賰龃婕床恍枰?jīng)過(guò)梯度降溫，直接將細(xì)胞放入-80 ℃冰箱24h。南京正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液直銷價(jià)

從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管，立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。南京正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液直銷價(jià)

凍存細(xì)胞注意事項(xiàng)：凍存細(xì)胞系以備將來(lái)之用時(shí)，必須遵守以下原則。我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說(shuō)明，以便獲得較佳結(jié)果。在細(xì)胞處于生長(zhǎng)期密度達(dá)到70-90%的情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存，并且細(xì)胞傳代盡可能靠前。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請(qǐng)注意較佳凍存條件取決于所用細(xì)胞系。細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器，使溫度每分鐘大約降低1°C。必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO或者甘油等冷凍保護(hù)劑。南京正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液直銷價(jià)