總RNA的定義:總RNA=mRNA+tRNA+rRNA,即:總RNA就是指mRNA、tRNA、rRNA的總和。這是在還沒有發(fā)現lncRNA等microRNA的時候的概念。但是卻被各大公司默認的概念,一直延續(xù)至今。所以各位可以去各大公司的網站,看一看總RNA提取試劑盒案例提供的RNA電泳圖,只有表示總RNA的2條帶——28s和18s;表示microRNA的5s帶,要不沒有,要不很弱。那么mRNA在哪里呢?從RNA電泳圖上能不能看到呢?真正成熟的mRNA,主要集中在28s和18s之間和上下的熒光背景(一般每條基因mRNA量很少,所以,整體一般看不到明顯帶,只表現為28s和18s中間和上下的連續(xù)的涂抹帶)。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。成都正規(guī)RNA提取試劑生產廠家
RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性。無論是人、動物、植物還是細菌組織,該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。TRIpure試劑操作上的簡單性允許同時處理多個樣品,所有的操作可以在一小時內完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染,故而能夠作RNA印跡分析、斑點雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護分析和分子克隆等。和進口品牌實驗對照顯示,公司的產品質量已經達到甚至超過了進口產品的質量~上海RNA提取試劑廠家供應RNA提取試劑注意事項:間層用乙醇沉淀可回收DNA。
石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒(離心柱型):原理簡介:改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA(RNA)從硅基質膜上洗脫。試劑盒特點:1、離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。2、結合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨有的MRL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程,提取RNA純度更高~
RNA提取試劑的選擇:對于富含多糖多酚的植物類組織提取是個難點,Takara精心研發(fā)的柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以輕松解決這個問題。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以高效地從各種簡單的植物組織材料(葉片、莖、幼苗等)、富含多糖多酚的植物組織材料(果實、種子等)、菌類提取高純度的TotalRNA,適用范圍普遍。按照標準流程,本試劑盒可以有效地提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可選步驟提取得到包含SmallRNA(<200nt)的TotalRNA。試劑盒中包含了RNA提取所需的全部試劑,無需額外購買其它試劑~RNA提取試劑注意事項:TRIReagent含有毒物質苯酚,避免接觸皮膚或吸入。
游離RNA(cfRNA)提取試劑盒:采用有機試劑法提取血清/血漿中游離總RNA?;诒竟咎赜械牧呀?結合液配方,結合新型硅基膜填料,能高效的吸附樣本中的總RNA,尤其是對小于200nt包括miRNA、siRNA和snRNA在內的smallRNA有更強的吸附結合能力。提取得到的總RNA純度高,無蛋白污染。特點:1、更高的樣本體積處理能力:可從新鮮或凍存的血清/血漿中高效富集純化游離RNA,樣本處理體積從0.2~1.0mL范圍內靈活選取。2、更高的小RNA富集效率:采用patent試劑配方,對小于200nt的smallRNA有更高的結合純化能力。3、操作簡單快速:一小時內可完成所有操作。以及參與RNAi作用的miRNA與siRNA等,可調節(jié)基因表達。成都正規(guī)RNA提取試劑生產廠家
細胞質和細胞核RNA提取試劑盒特點:細胞質RNA不含DNA,直接用于RT-PCR/qRT-PCR。成都正規(guī)RNA提取試劑生產廠家
細胞外RNA(exRNA)已成為研究界的新寵。近年來,人們在血漿或血清樣本中成功檢測到疾病相關的exRNA,使其有望成為非侵入性的生物標志物。然而,從血漿或血清中分離exRNA仍頗具挑戰(zhàn)性,這一方面是因為exRNA豐度低,另一方面是因為血液中的污染物會壓制PCR。商品化的試劑盒能簡化和加速exRNA提取過程,已成為循環(huán)exRNA研究不可缺少的工具。然而,這些試劑盒的提取效率如何,是否能去除血漿中的污染物,是否會偏向特定的RNA,都沒有經過評估,而這類評估對于結果解釋和實驗之間的比較都很關鍵。成都正規(guī)RNA提取試劑生產廠家