可以通過pas染色計(jì)算糖原含量嗎:PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì).具體現(xiàn)象例舉:陽性反應(yīng),胞漿呈紅色,陰性反應(yīng),胞漿呈無色;在正常血片中RBC不染色;PLT染成深紅色;中性粒細(xì)胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細(xì)胞有陽性顆粒;單核細(xì)胞的胞漿染成淡紅色,可含有細(xì)小或粗大陽性顆粒;少數(shù)淋巴細(xì)胞的胞漿內(nèi)含有少許小的淡紅色或紅色顆粒;正常骨髓的幼稚細(xì)胞和有核RBC都不染色;巨核細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.巨核細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.顏色深淺與濃度相關(guān)~過碘酸溶液和蘇木素溶液濃度更低,不宜過染。福建正規(guī)糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘。(7)脫水、透明、封蓋。結(jié)果:糖原呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏試劑。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,攪拌加熱沸騰,待冷卻至50℃過濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉。置于暗處,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩、過濾,此時(shí)溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差北京口碑好的糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)糖類從組織化學(xué)技術(shù)角度來分,可分為多糖、中性粘液物質(zhì)。
注意事項(xiàng):染色前:①切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。②撈片時(shí),較好一張玻片撈一個(gè)組織,組織較好位于玻片的中間,美觀的同時(shí)也利于脫蠟(有時(shí)二甲苯的液面低于組織片的時(shí)候,達(dá)不到脫蠟的目的)。③石蠟切片脫蠟到水時(shí),一定要注意組織切片脫蠟務(wù)必要徹底(脫蠟時(shí)間不能太少)以使脫蠟后的組織達(dá)到真正的“干凈”。否則剩余的未脫干凈的石蠟粘附在組織表面,在染色時(shí)染色液未能充分與組織接觸,較終導(dǎo)致染色效果不佳,甚至染不上顏色。④在染色過程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙,以避免脫蠟時(shí)把標(biāo)簽紙也浸沒,致使標(biāo)簽紙上的膠黏到玻片上,造成染色不佳。
糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽性程度和陽性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷。應(yīng)該盡可能割取生活著的組織塊,并隨即投入固定液。
染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶,屬水解酶類,相當(dāng)穩(wěn)定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物,其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測出來。由于絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此這個(gè)基因被普遍應(yīng)用于基因調(diào)控的研究中。根據(jù)GUS基因檢測所用的底物不同,可以選擇三種檢測方法:組織化學(xué)法、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測法較高)。其中較為常用的是組織化學(xué)法。腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽性。江西口碑好的糖原染色試劑盒廠家現(xiàn)貨
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醫(yī)院檢驗(yàn)中心糖原染色操作規(guī)程:1.雪夫氏試劑:400m1蒸餾水煮沸除去C02,逐漸加堿性品紅2.08溶解后,待冷卻至60℃,加1mm01兒HCl40ml,再加偏重亞硫酸鈉(NaHSO:)4g,次日加活性碳1.5g,放置半天后過濾。配好后液體為無色透明,保存于4℃冰箱中。2.過碘酸作用液:過碘酸1g溶于蒸餾水100ml中,或取過碘酸鉀(1tI04)0。698加蒸餾水100ml,微加熱使溶解,再加濃硝酸0.3m1,置冰箱中保存。3.固定液:95%乙醇90ml與甲醛10m1混勻。4.20g/l甲基綠:甲基綠2g溶于100m1蒸餾水。[操作]_x005f_x005f_x005f_x000c_(1)新鮮或陳舊血片、骨髓片于固定液內(nèi)10分鐘。(2)水洗數(shù)次后,對(duì)照片先用唾液消化30分鐘,也可在同一片,在其中間用蠟筆劃界,一半做對(duì)照,另一半做測定。(3)水洗后,滴加過碘酸數(shù)滴于涂片上,作用10分鐘后,再水洗數(shù)次。福建正規(guī)糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)