特染的應(yīng)用價值:現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍,但由于這些技術(shù)要求一定的實驗條件以及所需的試劑價格較為昂貴,對于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無需復(fù)雜的實驗條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡單的優(yōu)勢,在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價值。比如,當(dāng)細胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當(dāng)組織中出現(xiàn)均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,用組織化學(xué)技術(shù)區(qū)別起來很簡單,所以組織化學(xué)技術(shù),雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個很有實用價值的技術(shù)。0.5%過碘酸水溶液5分鐘。或1%過碘酸95%酒精溶液。江蘇口碑好的糖原染色試劑盒直銷價
糖原染色(過碘酸-雪夫反應(yīng))原理多糖中乙二醇基經(jīng)過碘酸氧化成二醛基與無色品紅結(jié)合,形成紫紅色化合物。沉積于含糖原的胞漿中。結(jié)果:胞漿中出現(xiàn)彌散狀,顆粒狀,塊狀紅色為陽性。無紅色顆粒為陰性_x005f_x005f_x005f_x000c_臨床意義1、正常血細胞的染色反應(yīng)粒系:原粒細胞糖原含量很低,隨著細胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟階段糖原含量十分豐富。淋巴細胞:糖原常凝聚成顆粒或塊狀。巨核細胞-血小板系統(tǒng):PAS反應(yīng)呈粗大的紫色顆?;驁F塊。正常紅系:陰性。對疾病診斷的意義白血病類型的鑒別:急性粒細胞白血?。涸剂<毎赎幮曰蛉蹶栃苑磻?yīng),以彌散性為主;急性淋巴細胞白血病原、幼淋巴細胞多呈粗顆粒、塊狀陽性反應(yīng)。江蘇口碑好的糖原染色試劑盒直銷價巨幼紅細胞貧血、溶血性貧血、再障的幼紅細胞PAS染色為陰性。
糖原pas染色液配制及使用方法:1、常規(guī)固定,常采用10%的福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片直接入蒸餾水。3、自來水沖洗2~3min,再用蒸餾水浸洗2次。4、入過碘酸溶液,室溫放置,一般不宜超過10min。5、自來水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室溫陰暗處浸染。7、自來水沖洗10min。8、入蘇木素染色液,染細胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x005f_x005f_x000c_10、自來水沖洗10~15min,更換蒸餾水清洗,使其返藍。11、逐級常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。
糖原及粘液染色法注意事項:1、糖原的固定要及時,而且標(biāo)本要新鮮。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧俊F浯慰紤]堿性品紅本身,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,但不同批號,其效果就可能不同,應(yīng)特別引起注意腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽性。
糖原及粘液染色法注意事項:1、糖原的固定要及時,而且標(biāo)本要新鮮。2、如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,因無水酒精滲透較慢,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果較佳,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,使用時可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧?。其次考慮堿性品紅本身,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,但不同批號,其效果就可能不同,應(yīng)特別引起注意。對臨床樣本進行染色,以便樣本的進一步篩查和檢測。安徽品質(zhì)好的糖原染色試劑盒
冷凍切片染色時間盡量要短。江蘇口碑好的糖原染色試劑盒直銷價
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實驗材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來自我室實驗材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3過碘酸溶液0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時,過濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h。江蘇口碑好的糖原染色試劑盒直銷價