無血清細胞凍存液，含多種保護劑成分。一些保護劑，易于穿透細胞，避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞，同時另一些保護劑不能穿透細胞，但可以在冰晶形成之前，優(yōu)先結(jié)合細胞外的水分子，降低細胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進入細胞的數(shù)量，為多種保護劑組合，在細胞內(nèi)外進行雙重保護，較大提高了細胞復(fù)蘇存活率。無血清細胞凍存液不含牛血清，無動物源組份。2-8℃即可穩(wěn)定保存，無需冷凍，即取即用。凍存細胞，無需程序降溫。凍存細胞復(fù)蘇率在90%以上。無血清快速細胞凍存液，是一種新型的快速凍存細胞的保護液，可將細胞置于-80^C直接冷凍保存。蕪湖正規(guī)無血清細胞凍存液產(chǎn)品介紹

無血清快速細胞凍存液凍存細胞復(fù)蘇方法：1、從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2、待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。3、離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4、清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。5、加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6、鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。蘇州無血清細胞凍存液銷售廠家無血清凍存液用途：置于-20℃保存，有效期為3年。

對于很多科研汪來說，細胞是脆弱又重要的寶貝之一，承擔(dān)著重要的實驗數(shù)據(jù)希望。尤其是在凍存復(fù)蘇的時候，經(jīng)常會因為一些小細節(jié)導(dǎo)致問題。比如：沒有控制好細胞的生長密度細胞的密度對細胞的生存質(zhì)量有著重要的影響，畢竟它們是一群又不能擠著了也不能孤獨的嬌貴寶寶。密度過高會讓細胞沒有足夠的生存空間，密度過低會讓細胞無法互相連接健康生長。建議大家在細胞接種前，一定要調(diào)整好適合細胞生長的濃度，提高細胞的存活率。溫度控制不達標(biāo)慢凍快融是細胞凍存復(fù)蘇的*關(guān)鍵詞之一

細胞凍存注意事項：1、細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml－15m培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。2、復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。3、加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是1％。所以如果你的凍存液的濃度是10％DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。

細胞凍存步驟說明：配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;取對數(shù)生長期的細胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。去除PBS，加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;離心1000rpm，5min;去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù)，調(diào)節(jié)存液中細胞的較終密度為5×106/ml~1×107/ml;將細胞分裝入凍存管中，每管1~1.5ml;在凍存管上標(biāo)明細胞的名稱，凍存時間及操作者;凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當(dāng)溫度達-25℃以下時，可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。同時另一些保護劑不能穿透細胞。杭州無血清細胞凍存液直銷價

凍存要求發(fā)生改變，因為凍存細胞要進行臨床應(yīng)用。蕪湖正規(guī)無血清細胞凍存液產(chǎn)品介紹

細胞凍存液的操作步驟：1.配置含10%DMSO或凡士林、10～20%小牛血清的凍存細胞培養(yǎng)液;2.取對數(shù)成長期的體細胞，除去舊細胞培養(yǎng)液，用PBS清理。3.除去PBS，添加適量蛋白酶(遮蓋細胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長發(fā)育的體細胞消化吸收出來;4.抽濾1000rpm，5min;5.除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細胞培養(yǎng)液，用塑料吸管輕輕地吹打使體細胞勻稱，記數(shù)，調(diào)整凍存液中體細胞的較后相對密度為5牙周106/ml～1牙周107/ml;6.將體細胞分裝進凍存管中，每管1～1.5ml;7.在凍存管上標(biāo)出體細胞的名字，凍存時間及作業(yè)者;8.凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序流程為減溫速度-1～-2℃/min;當(dāng)溫度達-25℃下列時，可升至-5℃～-10℃/min;到-100℃時，則可快速滲入液態(tài)氮中。也可將配有體細胞的凍存管放進-20℃電冰箱2h，隨后放進-70℃電冰箱中留宿，取下凍存管，移進液氮容器內(nèi)。蕪湖正規(guī)無血清細胞凍存液產(chǎn)品介紹