外泌體的提取、分離方法：開發(fā)高效、快速、穩(wěn)定，并且保持外泌體結(jié)構(gòu)和生物功能完整性的方法，是目前外泌體應(yīng)用于臨床的基礎(chǔ)和前提。從細(xì)胞上清和體液中提取分離外泌體的方法很多，但是外泌體的純度和產(chǎn)量卻和分離方法息息相關(guān)。通常分離步驟少、產(chǎn)率高，但是純度會受到影響。鑒于每種分離方法都有其優(yōu)缺點，實驗可以根據(jù)樣本來源、下游實驗?zāi)康牡?，選擇合適的外泌體分離方法。2015年，國際囊泡組織(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出，簡單依靠一種分離方法得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都難滿足實驗的需求。因此，推薦聯(lián)合使用各種方法，從而得到高純度和高產(chǎn)量的外泌體。外泌體提?。壕哂懈哒扯鹊纳飿悠贰＝鹑A外泌體提取試劑廠家推薦

外泌體研究的主要應(yīng)用：外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型，其可參與到機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換，從而導(dǎo)致大量新生血管的生成，促進了一些病癥的生長與侵襲。一些病癥。一些病癥轉(zhuǎn)移。來自白血病干細(xì)胞的外泌體促進急性骨髓性白血病（AML）細(xì)胞的增殖、遷移和壓制細(xì)胞凋亡。治病靶標(biāo)。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D，從而特異性高效靶向至胰腺病細(xì)胞，以明顯降低RAS活化、病細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移過程。免疫。β細(xì)胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細(xì)胞外，并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細(xì)胞，有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。心血管。外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細(xì)胞的損傷促進動脈硬化。分子標(biāo)記。疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、菌類性肝炎、藥物性肝損傷和肝細(xì)胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升天津外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家外泌體提?。菏褂每贵w包被珠子的分離不適合從大量樣本中獲得外泌體。

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡，直徑約為30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu)，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞（免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞)，都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA，Exosome可通過細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞，也可運輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA，甚至細(xì)胞器進入受體細(xì)胞，參與細(xì)胞間通訊。Exosome在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、血管生成、凋亡、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作用，不同細(xì)胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同，可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物，也能作為靶向藥物的載體進行疾病

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外泌體的提取的方式：1、免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性，不便進行下一步的實驗。2、PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法較新數(shù)據(jù)，表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。六是色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不普遍。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物，用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合。長沙正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹

同時對超速離心機的設(shè)備要求以及操作程序的培訓(xùn)較大提高了提取成本。金華外泌體提取試劑廠家推薦

有的外泌體分離方法需要高速離心，需要使用大型機器，耗費近24小時的時間才能獲得，非常不便。而高離心力也可能破壞囊泡。降低樣品的質(zhì)量。這項研究有望解決這一難題。在論文中，研究人員們提供了一種通過微流體和聲學(xué)的獨特組合從體液樣品中捕獲外泌體的新穎方法。他們開發(fā)的原始聲學(xué)分選裝置由兩個傾斜的聲學(xué)換能器和一個微流體通道組成，當(dāng)這些傳感器產(chǎn)生的聲波相互碰撞時，形成產(chǎn)生一系列壓力節(jié)點的駐波。每當(dāng)細(xì)胞或顆粒流過通道并遇到一個節(jié)點時，壓力會將細(xì)胞引導(dǎo)離開中心一點點。細(xì)胞移動的距離取決于大小和其他屬性（如可壓縮性），這樣，當(dāng)?shù)竭_(dá)通道末尾時，不同大小和性質(zhì)的細(xì)胞就能夠被分離開來。這種方法分離得到的外泌體，基本上不改變其生物或物理特征，為開發(fā)評估人類健康以及疾病診斷和進展提供了有吸引力的新方法。金華外泌體提取試劑廠家推薦