植物、動(dòng)物、人類都存在RNA干擾現(xiàn)象,這對于基因表達(dá)的管理、參與對病菌傳染的防護(hù)、控制活躍基因具有重要意義。RNA干擾是一個(gè)生物過程,在這個(gè)過程中雙鏈RNA以一種非常明確的方式壓制了基因表達(dá)。自1998年發(fā)現(xiàn)以來,RNA干擾已經(jīng)作為一種強(qiáng)大的“基因沉默”技術(shù)而出現(xiàn)。RNA干擾作為研究基因運(yùn)行的一種研究方法已被普遍應(yīng)用于基礎(chǔ)科學(xué),它可能在將來產(chǎn)生更多更新的醫(yī)治方法。科學(xué)家認(rèn)為,RNA干擾技術(shù)不僅是研究基因功能的一種強(qiáng)大工具,不久的未來,這種技術(shù)也許能用來直接從源頭上讓致病基因“沉默”,以醫(yī)治病癥甚至一些病,在農(nóng)業(yè)上也將大有可為。好的試劑盒價(jià)格比較貴,在實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要來定奪試劑盒的使用。珠海正規(guī)RNA提取試劑哪家便宜
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個(gè)月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2-8°C可以保存一周,-20°C條件下可以保存1年。RNA半衰期比較短,容易降解,建議提取后盡快進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),如反轉(zhuǎn)錄成cDNA,NorthernBlot等。石家莊正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家口罩愛帶不帶,做實(shí)驗(yàn)時(shí)高冷一點(diǎn),不要指點(diǎn)江山,唾沫橫飛即可。
動(dòng)物細(xì)胞RNA提取:1、懸浮細(xì)胞:可直接離心后棄掉培養(yǎng)基,用無菌PBS清洗1~2遍后,再用適量PBS懸浮起來,然后再加入裂解液進(jìn)行裂解。千萬不要完全棄掉液體后,往沉淀細(xì)胞里直接加入裂解液,這樣會(huì)使外表層的細(xì)胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細(xì)胞外側(cè),從而限制沉淀內(nèi)部的細(xì)胞與裂解液的接觸,從而導(dǎo)致細(xì)胞裂解不徹底,降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細(xì)胞:棄掉培養(yǎng)基后,用PBS洗1~2次,然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養(yǎng)皿,把細(xì)胞吹下來,轉(zhuǎn)移到無RNA酶的EP管中,加裂解液進(jìn)行提取。
總RNA提取試劑,適用于動(dòng)植物細(xì)胞或組織及細(xì)菌的總RNA抽提,可有效防止RNA在提取過程中的降解。獲得的RNA可直接用于Northern雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase保護(hù)實(shí)驗(yàn),RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。該試劑可用于100次總RNA提取(10平方厘米細(xì)胞或100mg組織)??俁NA提取試劑注意事項(xiàng):1,RNA提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應(yīng)保證無污染無RNA酶。操作中應(yīng)小心,防止外源性RNA酶污染樣品導(dǎo)致RNA樣品降解。2,試劑中含有酚等有害物質(zhì),注意個(gè)人防護(hù)。自備新開封或?qū)iT氯仿,異丙醇,75%乙醇,DEPC處理水。當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒,但是均存在價(jià)格高、訂貨周期長的問題。
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇會(huì)影響RNA的使用。將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,室溫放置1~2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用RNA提取試劑:TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染。成都RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨
植物RNA提取試劑:提取的總RNA純度極高,沒有蛋白和其他雜質(zhì)的污染。珠海正規(guī)RNA提取試劑哪家便宜
RNA快速提取試劑盒:隨著對小RNA的研究的逐漸深入,小RNA的分離逐漸成為一種需求,百泰克利用雄厚的研發(fā)實(shí)力,開發(fā)出高效快捷的小RNA分離純化試劑盒,對各種不同來源的樣品(動(dòng)物、植物、細(xì)胞等)均取得滿意的效果。miRNA提取試劑盒采用自創(chuàng)的結(jié)合洗脫技術(shù),對小RNA,包括RNA(miRNA)、smallinterferingRNA(siRNA)、smallnulcearRNA(snRNA)均能很好的回收。產(chǎn)品特點(diǎn):高效分離小RNA,同時(shí)分離總RNA。富集200nt以下的小RNA,增加其用于下游實(shí)驗(yàn)的濃度??焖佟?0分鐘完成實(shí)驗(yàn)??捎糜趍iRNA、siRNA、shRNA和snRNA分析。適用于各種來源的樣品。珠海正規(guī)RNA提取試劑哪家便宜