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RNA提取試劑的選擇:首先,要確定材料的可用性。盡管現(xiàn)有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,但提取的材料仍需謹慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關鍵,但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時,使用Takara公司的樣品保護劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,同時也可以有效解決組織、細胞樣品的短時間保存及運輸問題。此外,如果將不同時期收集的樣品都預先存放于本試劑中,可以做到立即終止并固定RNA表達的時序變化,減少實驗組間的誤差~加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相。南昌正規(guī)RNA提取試劑廠家
與DNA不同,RNA一般為單鏈長分子,很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結構乃至三級結構來行使生物學功能。RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補配對原則,轉錄而形成的一條單鏈,主要功能是實現(xiàn)遺傳信息在蛋白質上的表達,是遺傳信息向表型轉化過程中的橋梁。在此過程中,轉運RNA是攜帶與三聯(lián)體密碼子對應的氨基酸殘基與正在進行翻譯的mRNA結合,而后核糖體RNA將各個氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進而構成蛋白質分子。有些生物,例如一些病菌,也直接使用RNA作為遺傳信息的載體,而不是DNA。廈門正規(guī)RNA提取試劑生產(chǎn)廠家移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質。
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒優(yōu)勢:1、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個實驗操作步驟簡化快捷從時間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個樣RNA的提取,較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時甚至更長的時間)。2、高產(chǎn)量:多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強細胞裂解液,保證后續(xù)RNA提取的得率。(能完全通過化學方法徹底裂解細胞讓RNA釋放完整,并且有效成分能壓制內(nèi)源RNA酶的降解作用)。3、高純度:試劑盒的進口吸附柱具有的專一吸附特性和強吸附力。三管齊下保證所提取RNA的產(chǎn)量和純度,前期得到的高質量RNA才能保證后續(xù)實驗成功,尤其是對熒光定量PCR實驗等。
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發(fā)生產(chǎn),博取眾家之長,根據(jù)多年來市場反饋不斷進行技術升級和改良得來。具有操作步驟少,實驗快捷,RNA產(chǎn)量純度高,充分滿足后續(xù)實驗要求的需要,適用提取樣品普遍等特點。產(chǎn)量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等。純度:OD值一般在1.9以上。得到的RNA無DNA污染,可直接用于反轉錄,實時熒光定量PCR(尤其對RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后續(xù)實驗。1、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個實驗操作步驟簡化快捷從時間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個樣RNA的提取,較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時甚至更長的時間,)。2、高產(chǎn)量:多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強細胞裂解液,保證后續(xù)RNA提取的得率。(能完全通過化學方法徹底裂解細胞讓RNA釋放完整,并且有效成分能壓制內(nèi)源RNA酶的降解作用)拭子RNA提取試劑的選擇?拭子樣本的量與提取的核酸量成正比,提高核酸得率,可通過增加樣本量來實現(xiàn)。
總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2-8°C可以保存一周,-20°C條件下可以保存1年。RNA半衰期比較短,容易降解,建議提取后盡快進行后續(xù)實驗,如反轉錄成cDNA,NorthernBlot等買點無酶的吸頭、離心管,找一個普通的試驗臺,穿好實驗服戴好手套,保護好自己就好。蘇州正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家
實驗者只需要按照說明書上的步驟操作即可。使用時無需配制其它試劑,非常方便,適合于RNA的快速提取。南昌正規(guī)RNA提取試劑廠家
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。將剩下的一半溶液轉移到同一離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。將離心吸附柱轉移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,室溫放置1~2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用南昌正規(guī)RNA提取試劑廠家