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細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長(zhǎng)期保存的常用方法,其中細(xì)胞凍存液,作為細(xì)胞凍存時(shí)必須使用的一種溶液,不光光是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存,在細(xì)胞的購(gòu)買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送過程中也起著關(guān)鍵作用,因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等,從而引起細(xì)胞死亡。而細(xì)胞凍存液就相當(dāng)于細(xì)胞的保護(hù)劑,在凍存細(xì)胞時(shí)將細(xì)胞懸浮于凍存液中,可使冰點(diǎn)降低,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,在緩慢的凍結(jié)條件下,能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞,可以防止或減少冷凍冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷作用。這樣就使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,在需要時(shí)直接復(fù)蘇就可恢復(fù)細(xì)胞活性。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:傳統(tǒng)的凍存液,一般由胎牛血清、DMSO等組分組成。金華無血清細(xì)胞凍存液直銷廠家
細(xì)胞凍存:細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中,在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi),而且細(xì)胞一旦離開活的開始原代培養(yǎng),它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要。細(xì)胞冷凍儲(chǔ)存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮中,溫度達(dá)-196℃,理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無限的。原理:細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。如今細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。武漢正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家推薦加入適量細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為1x106~1x107 cells/mL。
無血清細(xì)胞凍存液:產(chǎn)品介紹:無血清細(xì)胞凍存液是一款針對(duì)細(xì)胞凍存和復(fù)蘇所研發(fā)的即用型細(xì)胞凍存液。該凍存液采用獨(dú)特的凍存配方,包括DMSO在內(nèi)的凍存保護(hù)劑復(fù)合物,**降低了細(xì)胞在凍存過程中冰晶對(duì)于細(xì)胞的損傷。凍存液中添加了葡萄糖,氨基酸等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,***提高了細(xì)胞的活力和復(fù)蘇率。無血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,無任何動(dòng)物源組分,可維持干細(xì)胞低分化狀態(tài),并且可減少各類***和支原體污染的風(fēng)險(xiǎn),確保細(xì)胞凍存安全。與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液相比,本產(chǎn)品重懸細(xì)胞后可直接凍存于-80℃,無需程序降溫。
細(xì)胞凍存秘籍:程序1.凍存前檢查凍存前,細(xì)胞應(yīng)處于指數(shù)生長(zhǎng)期,確保細(xì)胞處于健康狀態(tài)。理想情況下,應(yīng)在收獲細(xì)胞前24小時(shí)更換培養(yǎng)基。建議對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行微生物污染物,特別是支原體的檢測(cè),并通過適當(dāng)?shù)姆椒?,如STR分析確定其身份。如果在培養(yǎng)過程中使用物品,那么建議在冷凍前1到2周不使用物品,這樣如果出現(xiàn)污染,可以更容易地發(fā)現(xiàn)。2.收集細(xì)胞通常,您可以使用常規(guī)細(xì)胞傳代的實(shí)驗(yàn)程序來收獲細(xì)胞。細(xì)胞收獲期間盡可能溫和操作。本程序推薦的試劑量是針對(duì)為75平方厘米(T-75)培養(yǎng)瓶;若使用其他培養(yǎng)容器,請(qǐng)相應(yīng)調(diào)整所用試劑量。A.使用無菌吸管,取出并丟棄培養(yǎng)基。請(qǐng)妥善處置與細(xì)胞接觸的任何材料和溶液。B.用5到10ml CMF-PBS沖洗細(xì)胞,去除所有痕量的血清。C.加入3到5ml的胰酶(在CMF-PBS中),37℃孵育。預(yù)熱酶溶液通常會(huì)縮短處理時(shí)間。無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì):可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)可節(jié)省篩選過程。
無血清細(xì)胞凍存液的使用方法及注意事項(xiàng):無血清細(xì)胞凍存液:含多種保護(hù)劑成分,一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶 液的電解質(zhì)濃度,減少陽(yáng)離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,我公司無血清細(xì)胞凍存 液,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),較大提高了細(xì)胞復(fù) 蘇存活率。 【產(chǎn)品用途】 1.用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ)。 2.細(xì)胞保藏中心,用于細(xì)胞株的長(zhǎng)期保存。 3.科研高校,細(xì)胞株凍存。 4.醫(yī)院樣本庫(kù)細(xì)胞樣本保存。 【使用方法】 1、細(xì)胞凍存前準(zhǔn)備 (1)要求凍存的細(xì)胞在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,且活率大于90%。 (2)計(jì)算細(xì)胞密度,一般要求密度在1-3x10 cells/mL,不同細(xì)胞系 請(qǐng)參照附表。 2、細(xì)胞凍存過程 (1)將要凍存的細(xì)胞懸液,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)后離心,800 3min即可。 度保存的無血清凍存液緩慢加入離心后的細(xì)胞沉淀中,根據(jù)密度調(diào)整細(xì)胞凍存 液用量。 (3)反復(fù)吹吸混勻后,分裝于細(xì)胞凍存管中,每管500ul-1000ul, (建議500ul/管)。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:細(xì)胞凍存是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)常規(guī)技術(shù)。成都無血清細(xì)胞凍存液
凍存細(xì)胞可直接存放于-80℃冰箱,穩(wěn)定保存數(shù)年。金華無血清細(xì)胞凍存液直銷廠家
通用細(xì)胞凍存液(無血清)的簡(jiǎn)介:隨著實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展,除了原代培養(yǎng)之外,人工開發(fā)出來的細(xì)胞系的保存越來越重要。細(xì)胞冷凍的原理在于盡可能降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成,減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對(duì)細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷,從提高細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的存活率。細(xì)胞凍存的數(shù)量應(yīng)保證復(fù)蘇時(shí)低溫保護(hù)劑獲得稀釋,稀釋后的細(xì)胞濃度扔高于正常傳代的細(xì)胞濃度為宜,這是因?yàn)楫?dāng)?shù)蜏乇Wo(hù)劑稀釋以后,該濃度一般不會(huì)對(duì)細(xì)胞造成毒性損傷。通用細(xì)胞凍存液(無血清)主要由培養(yǎng)基、DMSO 等組成,不含血清,是一種經(jīng)典的無菌凍存液。用于各種哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞系、雜交瘤細(xì)胞等的凍存。金華無血清細(xì)胞凍存液直銷廠家