干細胞無血清凍存液操作事項:使用說明:1. 細胞消化和計數(shù),用胰酶對待凍存的細胞進行消化,并對細胞進行計數(shù)。2. 1000轉(zhuǎn)/min離心5分鐘(4℃),去掉上清。3. 根據(jù)細胞計數(shù)的情況,加入適量的干細胞無血清凍存液,使細胞密度在1×106左右(或根據(jù)自己希望達到的細胞密度)。4. 輕輕地重懸細胞(務(wù)必重懸均勻)。5. 將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管(需提前做好標記或者貼上標簽)中,旋緊凍存管蓋。6. 將凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒直接放入-80℃。7. 第二天將細胞從-80℃轉(zhuǎn)移到液氮中。注意事項:1.用處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存。2.控制好胰酶的消化時間,切記消化過度,會影響復蘇效果。3.重懸細胞的過程中,請務(wù)必要輕柔,以免損傷細胞,但同時也一定要充分重懸,這樣細胞在復蘇時才不會成團。4.細胞操作請注意無菌。無血清凍存液使用方法:收集懸浮細胞或貼壁細胞,離心去除上清培養(yǎng)液。深圳無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家
無血清細胞凍存液使用方法:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。1)按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2)按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。(參考:5×105至5×106cells/ml)。3)取相當于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離心管中的上清液。4)加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。5)將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。6)直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱,長期冷凍保存。開封無血清細胞凍存液進貨價無血清凍存液特性:不含動物成分。
細胞凍存中的注意事項:細胞凍存開始時,要溫好相應(yīng)的培養(yǎng)基和相應(yīng)的試劑,以及計數(shù)耗材,避免操作過程中手忙腳亂。用移液管吹打相應(yīng)的胞液時,要保證移液管在液面以下吹打,管內(nèi)要有液體,防止產(chǎn)生相應(yīng)的氣泡,氣泡的張力會影響細胞的活率和生存狀態(tài)。計數(shù)細胞時要保證取胞液時也要混勻,這個過程比較重要,細胞不混勻,計數(shù)不準,此外吹打應(yīng)該輕柔,避免細胞在吹打的過程中出現(xiàn)了相應(yīng)的死亡。凍存離心用50ml離心管比較好,加凍存液吹打混勻比較方便,離心后不能過多地晃動離心管。當離心管液體較多的時候,可以直接傾倒,不要磕,多余的液體較好用泵吸出比較好。凍存支數(shù)少的情況,用泵頭輕柔吹打,避免出現(xiàn)氣泡,凍存支數(shù)多用移液管吹打。
無血清細胞凍存液,通用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規(guī)細胞),凍存細胞可在-80℃長期保存(>5年)。CellFreezingMedium配方成分明確,不含動物來源性蛋白,Chemicalbook不含血清,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分,提高細胞存活率和活力,亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。細胞凍存是細胞實驗中的一個常規(guī)技術(shù),通常細胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成,由于血清含有異源成分且生長過程中可能帶來的風險Chemicalbook,故傳統(tǒng)的細胞凍存配方并不適于體內(nèi)研究。本產(chǎn)品完全由化學成分組成,無動物來源,目前測試可以很好的凍存T細胞,NK細胞以及MSC等細胞。含血清,細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風險更高。
細胞凍存的操作步驟:1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;2.取對數(shù)生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。3.去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;4.離心1000rpm,5min;5.去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細胞的較終密度為5×106/ml~1×107/ml;6.將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;8.凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。反復吹吸混勻后,分裝于細胞凍存管中,每管500ul-1000ul。徐州無血清細胞凍存液廠家批發(fā)價
程序降溫凍存技術(shù)要點是慢凍,標準的凍存程序為降溫速率-1~-2/℃ min。深圳無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家
無血清快速細胞凍存液凍存液成分。無血清細胞,無血清干細胞及MSC凍存液。保存條件:儲存于4℃以下。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期3年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,盡可能冷凍保存。為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,推薦將100ml產(chǎn)品分裝小瓶后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清細胞凍存液,細胞凍存與復蘇后,平均活細胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細胞存活率都有較佳的表,BI無血清細胞凍存液也適用于動物血清培養(yǎng)的細胞凍存。深圳無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家
蘇州君欣生物科技有限公司辦公設(shè)施齊全,辦公環(huán)境優(yōu)越,為員工打造良好的辦公環(huán)境。致力于創(chuàng)造***的產(chǎn)品與服務(wù),以誠信、敬業(yè)、進取為宗旨,以建蘇州君欣生物產(chǎn)品為目標,努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè)。公司以用心服務(wù)為重點價值,希望通過我們的專業(yè)水平和不懈努力,將蘇州君欣生物科技有限公司的經(jīng)營范圍包括原代細胞的定制以及相關(guān)產(chǎn)品的配套銷售與服務(wù),干細胞染色體核型分析與鑒定、無血清細胞培養(yǎng)基以及無血清細胞凍存等系列產(chǎn)品的生產(chǎn)與銷售,動物疾病模型的構(gòu)建以及藥物效果的驗證等領(lǐng)域。等業(yè)務(wù)進行到底。蘇州君欣生物科技有限公司主營業(yè)務(wù)涵蓋原代細胞,無血清細胞凍存液,干細胞無血清培養(yǎng)基,動物疾病模型,堅持“質(zhì)量保證、良好服務(wù)、顧客滿意”的質(zhì)量方針,贏得廣大客戶的支持和信賴。