膠原蛋白按其應(yīng)用可以分為食品級、一般級、醫(yī)藥級。食用膠原一般來源于動物的真皮、肌腱和骨膠原.其中皮膠原是主要的食用膠原。食用級膠原通常外觀為白色,口感柔和,味道清淡,易消化。膠原的獨特品質(zhì).使得它在許多食品中用作功能物質(zhì)和營養(yǎng)成分,具有其它替代材料無可比擬的優(yōu)越性:①膠原大分子的螺旋結(jié)構(gòu)和存在結(jié)晶區(qū).使其具有一定的熱穩(wěn)定性;②膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),使膠原材料顯示出很強的韌性和強度,適用于薄膜材料的制備;③大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨特之處是:在熱處理過程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致。而其他的可食用包裝材料還沒被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì)。在操作過程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存,切勿凍存,有效期一年。徐州鼠尾膠原廠家
鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對角膜上皮細胞增殖的影響:目的探討鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對體外培養(yǎng)角膜上皮細胞增殖的影響。方法采用鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿,以普通培養(yǎng)器皿作對照,培養(yǎng)角膜上皮細胞,觀察細胞形態(tài),進行細胞計數(shù)并描繪細胞生長曲線,比較不同基質(zhì)對角膜上皮細胞的增殖作用。結(jié)果使用基質(zhì)包被的培養(yǎng)器皿培養(yǎng)角膜上皮細胞,細胞增殖速度較普通組快,細胞形態(tài)、活力和長勢比普通組更佳,促進增殖的能力為鼠尾膠原多聚賴氨酸明膠。結(jié)論鼠尾膠原可促進角膜上皮細胞增殖,且增殖效果優(yōu)于多聚賴氨酸和明膠。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。金華鼠尾膠原廠家直銷加入適當(dāng)體積的細胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
鼠尾膠原制備詳細步驟: 1、取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡 5 分鐘; 2.將尾巴剪開、去掉皮毛,并剪成小段,抽出銀色的尾鍵 3、將尾腱剪斷置于平皿中,PBS 浸泡; 4、將所有的尾鍵放于 Tris-HCl 中,4 度過夜。 0.05mol/L Tris-bas 的 Tris-HCl 的配制方法。 稱量 6gTris 置于 1L 燒杯中,加入約 800ml 去離子水,充分?jǐn)嚢枞芙?,濃鹽酸調(diào)節(jié) PH,高壓滅菌。 5、吸去 Tris-HCl,將尾腱稱重(0.5-1 克); 6、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中; 7、按每克尾腱 50ml 的比例,加入 0.1%醋酸溶液; 8、搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期; 9、離心,4 度 4000 轉(zhuǎn)/分,30 分鐘; 10、吸取上清,過 300 目濾器。 11、每 600ml 上述粗提液中加入 100ml 0.14 mol/LNaOH,8000 轉(zhuǎn) 5min 離心,棄上清,留絮狀沉淀。 12、將絮狀沉淀物置于三蒸水中,用 0.1mol/L(1000:6)醋酸溶解沉淀物。
膠原蛋白的提取方法:酸法提?。核岱ㄌ崛≈饕捎玫碗x子濃度酸性條件浸漬處理原料,從而破壞分子間的鹽鍵和希夫堿,而引起纖維膨脹、溶解。作為溶劑使用的酸,主要有鹽酸或亞硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、檸檬酸和甲酸等。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu)。此法處理快速,所得產(chǎn)品的分子量是連續(xù)的,適用于醫(yī)用生物材料及原料的制備,但產(chǎn)品得率低,設(shè)備腐蝕嚴(yán)重,污染重。趙蒼碧等[2]采用0.3 %的醋酸溶液在4 ℃下從牛腱中提取膠原蛋白,得到高純度的膠原蛋白溶液。在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹。
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上, pH 左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中,在成膠過程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。 需要的溶液 (均需要無菌、 預(yù)冷) 10mg/L 酚紅用于pH 指示) 0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一 般不用),雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠原溶液中, 會由于 NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的 膠原凝結(jié)) 立即混勻。再加入 100ul 10PBS 10培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后 pH 左右,如果PBS 或培養(yǎng)液中沒有加 酚紅,初次使用時需要用 pH 試紙測試)。酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu)。金華鼠尾膠原廠家直銷
凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至目。徐州鼠尾膠原廠家
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