糖原染色法:染色原理細(xì)胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色,沉積在細(xì)胞內(nèi)多糖所在之處。染色步驟:1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加過碘酸溶液,氧化5min;3.蒸餾水洗10min;4.滴加Schiff試劑,侵染10-20min;5.傾去Schiff 試劑,流水沖洗10min;6.滴加蘇木素染色液,染核1-2min;7.流水沖洗5min;8.酸性乙醇分化液分化操作簡(jiǎn)單方便,1h內(nèi)即可完成反應(yīng)。江蘇哪家提供糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽(yáng)性程度和陽(yáng)性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷天津糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。
特染的應(yīng)用價(jià)值:現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍,但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴,對(duì)于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡(jiǎn)單的優(yōu)勢(shì),在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。比如,當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當(dāng)組織中出現(xiàn)均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,用組織化學(xué)技術(shù)區(qū)別起來很簡(jiǎn)單,所以組織化學(xué)技術(shù),雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個(gè)很有實(shí)用價(jià)值的技術(shù)~
糖原染色:方法固定液Carnoy固定液:純酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以選用75%酒精配制1)過碘酸酒清夜配法:過碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml)5ml蒸餾水10ml保存于冰箱內(nèi),用棕色瓶,可用兩周.2)Schiff氏液:0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時(shí)時(shí)搖動(dòng)三角瓶5分鐘,使之充分溶解.冷卻至50℃后過濾加入10毫升1N鹽酸.冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時(shí),然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒 配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml純酒精23ml4)亞硫酸水1%偏重亞硫酸蒸餾水180ml的樹膠溶解切取的材料應(yīng)小而薄,便于固定液迅速滲入內(nèi)部。
糖原染色用于鑒別淋巴系統(tǒng)細(xì)胞增生的性質(zhì)鑒別紅細(xì)胞系統(tǒng)增生的性質(zhì)[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細(xì)胞PAS反應(yīng)積分正常人幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分[臨床意義]惡性淋巴瘤、急慢性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)PAS積分升高巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再障貧血時(shí)幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)多為陰性紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征時(shí)幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分可40甚至高達(dá)100--200以上用于不典型巨核細(xì)胞與李-斯細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽(yáng)性后者為陰性或弱陽(yáng)性;用于高雪細(xì)胞和尼曼一匹克細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽(yáng)性而后者反應(yīng)為陰性或弱性細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。安徽正規(guī)糖原染色試劑盒直銷價(jià)
亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔凈而干燥。江蘇哪家提供糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。江蘇哪家提供糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家