鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上， pH 左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中，在成膠過(guò)程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來(lái)中和。 需要的溶液 （均需要無(wú)菌、 預(yù)冷） 10mg/L 酚紅用于pH 指示） 0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一 般不用)，雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠原溶液中， 會(huì)由于 NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的 膠原凝結(jié)） 立即混勻。再加入 100ul 10PBS 10培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后 pH 左右，如果PBS 或培養(yǎng)液中沒(méi)有加 酚紅，初次使用時(shí)需要用 pH 試紙測(cè)試)。鼠尾膠原、多聚賴(lài)氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿。貴陽(yáng)鼠尾膠原報(bào)價(jià)

膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同，每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋，其中每 3個(gè)氨基酸殘基形成一圈螺旋。3 條左手螺旋再扭在一起形成一個(gè)右手大螺旋。這樣的螺旋稱(chēng)為 3股螺旋。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃，這些棒狀分子首尾相連，并側(cè)向排列形成膠原微絲（其直徑可從50埃至數(shù)千埃）。膠原分子在兩端及沿軸向每隔 680埃的距離存在極性區(qū)，這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合，使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu)。徐州正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中，確保膠原蛋白溶液鋪滿(mǎn)器皿的表面。

鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當(dāng)?shù)墓切迯?fù)材料是治好骨缺損的中心環(huán)節(jié)。目前，臨床上常用的有人工骨移植、自體骨移植和同種異體骨移植。其中，人工骨材料多為磷酸三鈣、半水硫酸鈣等含有鈣和磷的無(wú)機(jī)礦物材料[1-2]，由于不含自體骨組織中的有機(jī)大分子Ⅰ型膠原蛋白，其臨床療效遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于自體骨組織。但是，自體骨移植和同種異體骨移植均來(lái)源于人類(lèi)自身骨組織，數(shù)量有限，難以滿(mǎn)足臨床需要。因此，研發(fā)與人類(lèi)自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料，成為全世界骨組織工程學(xué)者孜孜以求的目標(biāo)。由于天然骨組織是Ⅰ型膠原蛋白和羥基磷灰石鈣生物礦化的產(chǎn)物，在分子結(jié)構(gòu)上，羥基磷灰石鈣晶體是以Ⅰ型膠原纖維為模板，呈片狀鑲嵌在膠原纖維分子間隙，沿著膠原纖維的長(zhǎng)軸縱向礦化生長(zhǎng)。本研究仿生天然骨組織的分子結(jié)構(gòu)，酸解提取鼠尾肌腱的Ⅰ型膠原蛋白，重構(gòu)形成Ⅰ型膠原纖維，然后將Ⅰ型膠原纖維放置在礦化液中模擬人體內(nèi)骨生物礦化，通過(guò)透射電子顯微鏡(TEM)和電子衍射觀察羥基磷灰石鈣晶體在膠原纖維內(nèi)部的骨生物礦化。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄，并且制作簡(jiǎn)便，成本低廉。

鼠尾膠原蛋白的獲取也相當(dāng)“講究”，首先要以無(wú)毒方法捕到家鼠。取尾長(zhǎng)20cm以上者，齊尾根部切下尾巴，洗凈后浸于75%酒精中。在無(wú)菌操作下剝?nèi)ナ笪财つw，即可見(jiàn)附于鼠尾骨上的4束韌帶。每束韌帶中，位于外面及近骨一面的為白色纖維，較光潔，微發(fā)亮。纖維之間為易碎裂的間質(zhì)。而剝?nèi)ハ聛?lái)的“纖維”，就放置在嘉興眼庫(kù)中，以供需要時(shí)及時(shí)提取。讓小小的老鼠尾巴發(fā)揮其神奇的作用，以醫(yī)學(xué)人嚴(yán)謹(jǐn)、踏實(shí)、不斷進(jìn)取的醫(yī)學(xué)態(tài)度，讓鼠尾膠原蛋白幫助更多的人，恢復(fù)角膜的光明，重現(xiàn)光明的世界。I型膠原蛋白分布非常普遍，是主纖維束的主要成分。

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：兩組培養(yǎng)皿中，隨著過(guò)氧化氫濃度的增高，均可見(jiàn)細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯加重，細(xì)胞存活率及細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫活力明顯下降，細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞內(nèi)丙二醛水平明顯增高，Bcl-2/Bax比值明顯降低，呈劑量依賴(lài)性。而在相同濃度過(guò)氧化氫誘導(dǎo)下，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯減弱，細(xì)胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高，細(xì)胞凋亡率和丙二醛水平明顯減低。表明鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫所致的心肌細(xì)胞氧化損傷具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與提高超氧化物歧化酶活力，減少丙二醛產(chǎn)生及提高Bcl-2的表達(dá)有關(guān)。膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同。金華深圳鼠尾膠原

前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁，易于封接和長(zhǎng)時(shí)間（約8h)的觀察和記錄。貴陽(yáng)鼠尾膠原報(bào)價(jià)

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中，制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌。在2-8度中放置過(guò)夜。在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過(guò)濾的方法無(wú)菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜。貴陽(yáng)鼠尾膠原報(bào)價(jià)