無血清快速細胞凍存液凍存液成分。無血清細胞,無血清干細胞及MSC凍存液。保存條件:儲存于4℃以下。質量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期3年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,盡可能冷凍保存。為避免重復凍融過程可能導致的凍存液品質下降和性能降低,推薦將100ml產(chǎn)品分裝小瓶后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清細胞凍存液,細胞凍存與復蘇后,平均活細胞回收比例超過80%。與含血清凍存液比較,BI無血清凍存液細胞存活率都有較佳的表,BI無血清細胞凍存液也適用于動物血清培養(yǎng)的細胞凍存。無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色:不含動物源成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低。唐山正規(guī)無血清細胞凍存液進貨價
細胞凍存液的配置成分及比例: 細胞凍存液是含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液。在凍存前比較好換一次培養(yǎng)液。 配置方法: 1、將DMSO和小牛血清加入培養(yǎng)液中,各自含量占總體積的10%; 2、然后用濾膜過濾配置好的細胞凍存液; 3、用**保存瓶分裝保存?zhèn)溆眉纯?15%(常見為10%)的DMSO或甘油,含10%-20%血清的凍存培養(yǎng)液。一般來講血清含量可以在10%-90%之間調整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質,如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞。有人親測10%血清凍存細胞,結果證明是可以的,但高血清比例的凍存液更有助于提高細胞活力,此外嬌貴的細胞可以適當提高凍存液中血清的比例以保證獲得更高的存活率及活力。無錫無血清細胞凍存液直銷廠家無血清凍存液注意事項:凍存液加入細胞后,請盡快放入-80C冰箱凍存。
無血清細胞凍存液:凍存注意:開蓋之前,用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身。以下說明適用于在6孔板內的培養(yǎng)物的凍存。培養(yǎng)物應該在適合傳代的時候進行收集和凍存。每管所含有的細胞應當來源于6孔板的1個培養(yǎng)孔。如果使用其他的培養(yǎng)器皿,請相應的調整體積。1. 在室溫(15 - 25°C)以300 x g離心5分鐘。2. 輕輕吸走上清液,注意不要擾動細胞團。3. 用血清學吸管以1 mL的TBD-698重懸細胞。在打散細胞團時,盡量減少細胞聚集體分解。4. 用2 mL的血清學吸管將1 mL的細胞聚集體轉移到標記好的凍存管中。5. 用以下方法凍存細胞聚集體:推薦使用緩速降溫方法,每分鐘降低1度,隨后可以在 -196°C液氮長期保存。不推薦在 -80°C長期保存。逐步降溫法:-20°C保存2個小時,然后 -80°C中保存2個小時,隨后可以在 -196°C液氮中長期保存。
細胞凍存時間和操作步驟:1、首先我們需要凍存培養(yǎng)液,通常細胞凍存液含10%的DMSO,或者是甘油、10-20%的小牛血清;、取對數(shù)生長期細胞,并且還需要用PBS進行清洗,需要注意在這里要丟棄掉舊的細胞凍存液;3.去除PBS,加入適量的胰蛋白酶,以覆蓋住培養(yǎng)皿表面為宜,然后把單層生長的細胞消化掉;然后離心1000rpm5min時間;4、去除胰蛋白酶,加入凍存培養(yǎng)液,輕輕吹打使細胞的分布變得均勻,調節(jié)細胞較終的密度為5×106/ml-1×107/ml,需要注意這是較佳的細胞密度;5、將細胞裝入凍存管之中,每管的含量應該保持在1~1.5ml之間。在凍存管上標明細名稱、時間、操作者;6、較后要說的就是細胞凍存的時間了,對于標準的凍存程序來說,需要進行梯度降溫,降溫速率-1~-2℃/min,一旦溫度達到-25℃以下時,那么就可增至-5℃~-10℃/min;等到-100℃的時候,可迅速的放入到液氮之中。也可將凍存管放入-20℃冰箱中兩小時,然后放入-70℃冰箱中進行過夜,較后取出凍存管并移入到液氮容器內。無血清細胞凍存液用途:無血清細胞凍存液用于造血干細胞、間充質干細胞等干細胞的儲存。
凍存細胞注意事項:冷凍保護劑可降低培養(yǎng)基的冰點,并可減緩冷卻速度,較大降低冰晶形成的危險(冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡)。注:DMSO可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規(guī)范,并應按照當?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。建議可使用廠商生產(chǎn)的無血清細胞凍存液,使用方便,復蘇率高。注意冷凍保護劑DMSO的品質:DMSO應為試劑級等級,無菌且無色,以5-10ml小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍??焖賰龃婕床恍枰?jīng)過梯度降溫,直接將細胞放入-80 ℃冰箱24h。貴陽正規(guī)無血清細胞凍存液哪家好
無血清細胞凍存液使用方法:緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。唐山正規(guī)無血清細胞凍存液進貨價
凍存細胞注意事項:凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得較佳結果。在細胞處于生長期密度達到70-90%的情況下進行培養(yǎng)細胞的凍存,并且細胞傳代盡可能靠前。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意較佳凍存條件取決于所用細胞系。細胞應緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器,使溫度每分鐘大約降低1°C。必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO或者甘油等冷凍保護劑。唐山正規(guī)無血清細胞凍存液進貨價