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鼠尾膠原的生物礦化和TEM觀察:果凍樣Ⅰ型膠原蛋白膠體初始浸泡在礦化液中時(shí)呈微白色;礦化2 d后,膠體的顏色逐漸加深至乳白色;礦化6 d后,隨著羥基磷灰石晶體礦化長(zhǎng)入膠原纖維內(nèi)部,膠體顏色加深至純白色,并在膠體表面沉積了一層薄薄的羥基磷灰石鈣晶體,予鑷子夾起,其表層羥基磷灰石鈣晶體破碎散落。TEM表征顯示:礦化2 d后,Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔周期性條紋結(jié)構(gòu)逐漸模糊,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維內(nèi)部,膠原纖維部分礦化,沿著膠原纖維生長(zhǎng),忖度變深;礦化6 d后,Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔D-Band結(jié)構(gòu)完全消失,膠原纖維內(nèi)部可以看到黑色羥基磷灰石晶體,嵌入膠原纖維縱向生長(zhǎng)。當(dāng)鼠尾Ⅰ型膠原纖維完全礦化時(shí),由于整條膠原纖維都被羥基磷灰石鈣晶體占據(jù),膠原纖維呈現(xiàn)黑色,選區(qū)衍射斑圖符合羥基磷灰石表征。不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出。貴陽(yáng)正規(guī)鼠尾膠原直銷(xiāo)廠家
膠原蛋白(Collagen)是結(jié)締組織和內(nèi)臟部位外基質(zhì)的主要成分,但在皮膚、肌腱、骨骼中分布*為普遍。膠原蛋白在結(jié)構(gòu)和遺傳學(xué)上被分為不同類型,I型膠原蛋白(Collagen, Type I)結(jié)構(gòu)上是由2個(gè)α1鏈和1個(gè)α2鏈組成的異源多聚體,在37℃中性條件下可形成3股螺旋結(jié)構(gòu),被普遍用于多種細(xì)胞的培養(yǎng)基質(zhì),如肝細(xì)胞、纖維細(xì)胞、脊髓神經(jīng)節(jié)、雪旺氏細(xì)胞等。另外,I型膠原蛋白在細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、遷移和組織態(tài)的發(fā)生等方面也具有重要應(yīng)用。注意事項(xiàng):1) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。2) 整個(gè)操作請(qǐng)于冰上進(jìn)行,因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠。3) 整個(gè)操作請(qǐng)?jiān)跓o(wú)菌環(huán)境下無(wú)菌操作,避免污染以影響細(xì)胞生長(zhǎng)。成都鼠尾膠原直銷(xiāo)廠家鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,并且制作簡(jiǎn)便。
鼠尾膠原蛋白的用途是什么:在食品加工領(lǐng)域,鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中。它還可以當(dāng)作酸奶,冰淇淋,果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用。在一些低脂肪食品中,它用于模仿全脂食品的感覺(jué)和質(zhì)地。它還用于生產(chǎn)膳食保健品,據(jù)說(shuō)能讓手指甲和皮膚看起來(lái)更好。此外,還有基于膠原蛋白的保健品,可用于促進(jìn)關(guān)節(jié)健康。在工業(yè)應(yīng)用方面,鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的內(nèi)部涂層。設(shè)備上的膠原蛋白薄層通常被允許干燥。它還可以用來(lái)制造一種凝膠,可當(dāng)作懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)基。此外,還可以把它當(dāng)膠水使用。
鼠尾膠原的提取步驟:配置含4.5mmol/lNacl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-Hcl溶液(用鹽酸將其PH值調(diào)至7.5) 取鼠尾,去皮,由尖部向前分段抽取肌腱,置于生理鹽水中,稱重,再倒掉生理鹽水,酒精中浸泡20分鐘 離心膠原溶液,(1200rpm10min) 取上清 每600上述粗提液加100ml0.14mol/l NaOH溶液離心,(8000rpm 5min) 其上清,留絮狀沉 10.將絮狀沉淀物置于三蒸水中,用0.1mol/l(1000:6) 醋酸溶解絮狀沉淀物,加入消毒過(guò)的攪拌 子,冷房攪拌數(shù)天,得絮狀膠原。 注意所有和膠原有關(guān)的操作都在冰上進(jìn)行\(zhòng) Rat tail collagen type 配置含4.5mmol/L NaCl 和0.05mol/l Tris-base 的Tris-HCl 溶液(用鹽酸將其pH值調(diào)至7.5); 于-20冰箱中取出鼠尾,浸泡75%或70%酒精,解凍; 在一小培養(yǎng)皿中放置少量生理鹽水,置于電子秤上,調(diào)零; 取鼠尾,去皮,由尖部向前分段抽取肌腱,置于生理鹽水中。使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。
鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法。各個(gè)材料及其重量配比為鼠尾膠原蛋白∶聚乙烯醇∶殼聚糖為余量為水,采用冷凍干燥工藝制備。本發(fā)明所制備的止血材料主要采用鼠尾膠原蛋白制備,較傳統(tǒng)的止血材料不可吸收、容易引起機(jī)體過(guò)敏、止血效果差等缺點(diǎn),本發(fā)明所制備的止血材料具有人體內(nèi)可吸收,生物相容性好;止血效果快,具有很強(qiáng)的親水性;同時(shí)可啟動(dòng)血小板的凝聚,一旦血小板凝聚,就可形成血栓,進(jìn)而促使血漿結(jié)塊阻止血流。同時(shí),膠原表面的特定區(qū)域可以與細(xì)胞表面存在的類似纖連蛋白的糖蛋白結(jié)合,可以起到防止腸粘連的功效。建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。天津鼠尾膠原銷(xiāo)售廠家
將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。貴陽(yáng)正規(guī)鼠尾膠原直銷(xiāo)廠家
膠原蛋白分離提純實(shí)驗(yàn)方案:提取鼠尾膠原蛋白的實(shí)驗(yàn)步驟: 1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對(duì)初步處理的鼠尾腱進(jìn)行 酶解, 持續(xù)一段時(shí)間待混合物變成無(wú)色、 透明、 粘稠液體后即可在 4℃, 5000g 的離心力下離心 20min, 收集上清即為粗制鼠尾膠原蛋白原液。 2、將一定濃度的氯化鈉溶液加入其中,持續(xù)攪拌直至白色絮狀沉淀 從溶液中析出,繼續(xù)加入氯化銨直至沉淀不在析出為止,4℃,5000g 的離心力下離心 20min 后獲得白色沉淀。 沉淀物加入一定濃度的醋酸 溶液中溶解。 3、將溶解后的鼠尾膠原蛋白溶液繼續(xù)反復(fù)進(jìn)行鹽析處理,重復(fù)步驟 2 的過(guò)程 2~4 次。 _x000c_鼠尾膠原蛋白經(jīng) SDS- PAGE 蛋白質(zhì)電泳。貴陽(yáng)正規(guī)鼠尾膠原直銷(xiāo)廠家