大腸桿菌檢測方法:平板計數(shù)法:用無菌吸管吸取稀釋度樣品1mL,該樣品與乳糖膽鹽發(fā)酵類似,然后將其放入無菌培養(yǎng)皿中,再加入溫度于45℃下的CDLJJD顯色培養(yǎng)基中10mL的量,并進行培養(yǎng)皿中溶液均勻混合,可以通過快速轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿的方式,等溶液凝固以后,加入5mL左右,然后快速搖晃培養(yǎng)基,使其可以均勻覆蓋平板表面,等其凝固以后,翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)基,在溫度37℃中培養(yǎng)24h左右,然后觀察其形態(tài),顏色等變化。除此之外,平行設(shè)置兩個稀釋度培養(yǎng)基,步驟是先稀釋樣本,通過稀釋后,微生物可以分散為單個細胞,然后進行一定環(huán)境條件下培養(yǎng),直到其長成菌落為止,然后進行計算大腸桿菌的數(shù)量,通過稀釋度和樣本數(shù)量進行計算??莶菅挎邨U菌的芽孢形成后菌體不膨大。阿氏芽胞桿菌菌種
大腸埃希氏菌(Escherichiacoli)通常稱為大腸桿菌,約占腸道菌中的1%。是一種兩端鈍圓、能運動、無芽孢的革蘭氏陰性短桿菌。大腸桿菌在1885年由Escherich發(fā)現(xiàn),它分布在自然界,大多數(shù)不致病,主要附生在人或動物的腸道里,為正常菌群。少數(shù)大腸桿菌具有毒性,可引起疾病。嬰兒出生后大腸桿菌即隨哺乳進入腸道,其代謝活動能抑制腸道內(nèi)分解蛋白質(zhì)的微生物生長,減少蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物對人體的危害,還能合成維生素B和K,正常棲居條件下不致病,若進入膽囊、膀胱等處可引起炎癥。若在水和食品中檢出大腸桿菌,可認為是被糞便污染的指標。因此大腸菌群數(shù)(或大腸菌值)常作為飲水、食物或藥物的衛(wèi)生學標準。詹氏丙酸桿菌將金黃色葡萄球培養(yǎng)在哥倫比亞血平板中,在光下觀察菌落會發(fā)現(xiàn)周圍產(chǎn)生了透明的溶血圈。
金黃色葡萄球菌的檢驗方法操作步驟:血漿凝固酶試驗:吸取1:4新鮮兔血漿0.5mL,放入小試管中,再加人培養(yǎng)24h的金黃色葡萄球菌肉浸液肉湯堵養(yǎng)物0.5mL,振蕩搖勻,置36℃士1℃溫箱或水浴內(nèi),每半小時觀察一次,觀察6h,如呈現(xiàn)凝固,即將試管傾斜或倒置時,呈現(xiàn)凝塊者,被認為陽性結(jié)果。同時以已知陽性和陰性葡萄球菌株及肉湯作為對照。直接計數(shù)方法6.2.1吸取上述1:10混懸液,進行10倍遞次稀釋,根據(jù)樣品污染情況,選擇不同濃度的稀釋液1mL,分別加人三塊Baird一Parker平板,每個平板接種量分別為0.3mL、0.3mL、0.4mL,然后用滅菌L棒涂布整個平板。如水分多不易吸收,可將平板放在36℃士1℃lh,等水分蒸發(fā)后反轉(zhuǎn)平皿置36℃士1℃培養(yǎng)。
在畜牧養(yǎng)殖業(yè)方面,枯草芽孢桿菌具有市場潛力,枯草芽孢桿菌能夠增強畜禽免疫機能和抗氧化性能,提高畜禽的生產(chǎn)性能,但是由于其價格較貴,目前還主要應(yīng)用于仔豬配合飼料等高附加值飼料產(chǎn)品。未來的研究重點應(yīng)該放在進一步優(yōu)化生產(chǎn)工藝,降低枯草芽孢桿菌類產(chǎn)品的成本,將其推廣到畜禽配合飼料中;以及將枯草芽孢桿菌與其他功能性飼料添加劑(如啤酒酵母菌、菊糖和絲蘭提取物等)進行合理搭配,充分發(fā)揮其增強畜禽免疫功能和抗氧化性能,提高畜禽生產(chǎn)性能的功效。在植物保護方面,枯草芽孢桿菌制劑可以與化學農(nóng)藥復配,實現(xiàn)優(yōu)勢互補、用量減少、防效增強的目的。銅綠假單胞菌一般情況下建議在20度以上的溫度儲存或者直接-80度冷凍儲存。
金黃色葡萄球,甘油菌和斜面試管菌種作為定性菌種,可以直接用于繼續(xù)傳代,用來做上述應(yīng)用。定量菌液有不同的濃度,主要是用于口罩阻菌性能驗證及其他相關(guān)檢測,需要干冰運輸,-80度保存。按照《WS/T774-2021期間現(xiàn)場消毒評價標準》制成傳染鋼片和染菌布片,就是把10的6次方個金黃色葡萄球菌涂布到鋼片上,用來做消毒效果評價指示菌片。金黃色葡萄球菌的應(yīng)用廣,但是主要是用來做科學研究用途。甘油菌液和斜面試管比較便宜,45元/支,現(xiàn)貨供應(yīng)。凍干粉菌種按照規(guī)定屬于0代,現(xiàn)貨,現(xiàn)貨庫存。其中甘油菌可以加冰袋運輸,斜面試管可以常溫運輸。甘油菌液需要在-80度保存,保質(zhì)期可以1-2年。斜面試管保存條件不高,4-10度就可以保存,保質(zhì)期3個月。)金黃色葡萄球營養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長良好。波氏假性阿利什霉菌株
大腸桿菌多是單一或兩個存在,但不會排列呈長鏈形狀。阿氏芽胞桿菌菌種
銅綠假單胞菌進行傳代保存時,培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于較適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。銅綠假單胞菌主要用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或療養(yǎng),非藥用,非食用。主要用途有抗抵菌防腐劑的檢測、抗微生物效力測試、培養(yǎng)基測試、非無菌產(chǎn)品的控制菌測試、質(zhì)量控制菌株,無菌測試、產(chǎn)鼠李糖脂表面活性劑、藥品和個人護理用品檢測。通常采用冷凍干燥管保藏。與特異性有密切關(guān)系。標本可取創(chuàng)面滲出物、膿汁、尿、血等。分離培養(yǎng),根據(jù)菌落特征、色素以及生化反應(yīng)予以鑒定。必要時可用血清學試驗確診。部分人群體內(nèi)銅綠假單胞菌滋生會使尿液呈綠色。銅綠假單胞菌為條件致病菌,常見于燒傷科影響等癥,因此絮用纖維等纖維產(chǎn)品標準中規(guī)定不得檢出銅綠假單胞菌。阿氏芽胞桿菌菌種
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