金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)方法操作步驟：增菌培養(yǎng)法：(1)檢樣處理：按無菌操作取檢樣25g(ml)，加入225mL滅菌生理鹽水，固體樣品研磨或置均質(zhì)器中制成混懸液。(2)增菌及分離培養(yǎng)：吸取5ml上述混懸液，接種于7.5%氯化鈉肉湯或胰酪陳大豆肉湯50mL培養(yǎng)基內(nèi)，36℃士1℃培養(yǎng)24h，轉(zhuǎn)種血平板和Baird一Parker平板，36℃士1℃培養(yǎng)24h，挑取血平板上金黃色(有時(shí)為白色)菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢及血漿凝固酶試驗(yàn)。(3)形態(tài)：本菌為革蘭氏陽性球菌，排列呈葡萄球狀，無芽胞，無莢膜，致病性葡萄球菌菌體較小，直徑約為0.5um～1um。銅綠假單胞菌有菌體o抗原和鞭毛h抗原。狐糞青霉

銅綠假單胞菌為直或稍彎的革蘭氏陰性桿菌，是無核細(xì)菌，以極生鞭毛運(yùn)動，不形成芽孢，化能有機(jī)營養(yǎng)，嚴(yán)格好氧，呼吸代謝，從不發(fā)酵。普遍分布于自然界，如土壤、水、食物和空氣中。營養(yǎng)要求不高，種類多，銅綠假單胞菌為需氧的革蘭陰性小桿菌。銅綠假單胞菌菌體呈桿狀或略彎曲，有單端鞭毛或叢鞭毛，有莢膜，無芽胞。銅綠假單胞菌菌屬中有些菌株在代謝中能產(chǎn)生多種水溶性的色素，如綠膿素、熒光素、紅膿素、黑膿素等，有的菌可產(chǎn)生多種，有的只產(chǎn)生1—2種。銅綠假單胞菌與熒光似單胞菌和惡臭假單胞菌的鑒別，三者均可產(chǎn)生熒光色素，但銅綠假單胞菌42攝氏度時(shí)生長，后兩者則不能生長。壁檸檬球菌金黃色葡萄球需要在-80度保存，保質(zhì)期可以1-2年。

銅綠假單胞菌生長對營養(yǎng)要求不高。對有正常菌群存在的臨床標(biāo)本或采自環(huán)境中的標(biāo)本應(yīng)接種選擇性培養(yǎng)基如麥康凱瓊脂培養(yǎng)基(MAC)；對無正常菌群存在的臨床標(biāo)本如血液、腦脊液、穿刺液等可接種普通全營養(yǎng)型培養(yǎng)基(如TSA、PCA、營養(yǎng)瓊脂}或血瓊脂培養(yǎng)基、銅綠假單胞菌培養(yǎng)基。普通瓊脂培養(yǎng)基上生長18~24h可以見到扁平、濕潤的菌落，銅綠假單胞菌所產(chǎn)生的帶熒光的水溶性青膿素與綠膿素相結(jié)合將使得培養(yǎng)基呈亮綠色；在血瓊脂平板上生長時(shí)可以見到在菌落的周圍有溶血環(huán)，菌落呈金屬光澤；在銅綠假單胞菌培養(yǎng)基上呈藍(lán)綠色或者紅褐色菌落，365nm紫外燈下顯熒光。如果是在液體培養(yǎng)基中則呈渾濁狀生長，在液體表面形成菌落，而在培養(yǎng)基底部細(xì)菌的生長不良。

目前已知的大腸桿菌和志賀氏菌的完整基因組序列有三百多個。2014年之前，大腸桿菌類型菌株的基因組序列被添加到這個集中中。這些序列的比較顯示出明顯的多樣性。每個基因組中只有大約20%的表示序列存在于每個分離株中，而每個基因組中大約80%在分離株之間有所不同。每個基因組包含4，000到5，500個基因，但是在所有已測序的大腸桿菌菌株(泛基因組)中，不同基因的總數(shù)超過16000個。這種非常多的組成基因被解釋為三分之二的大腸桿菌泛基因組起源于其他物種，并通過水平基因轉(zhuǎn)移過程到達(dá)?？莶菅挎邨U菌具有較強(qiáng)的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活性，促進(jìn)飼料中營養(yǎng)素降解。

典型的金黃色葡萄球菌為球型，顯微鏡下排列成葡萄串狀。金黃色葡萄球菌無芽胞、鞭毛，大多數(shù)無莢膜。革蘭染色陽性。金葡菌具有抗干燥、耐熱、耐低溫、耐高滲的特性。在干燥環(huán)境中存活數(shù)月；空氣中存在，但不繁殖。加熱70℃1h，80℃30min不被殺死。在冷凍食品中不易死。在含有50%～66%蔗糖或15%以上食鹽食品中才可被抑制，能在15%NaCl和40%膽汁中生長。金黃色葡萄球菌是院內(nèi)傳染及社區(qū)獲得性傳染的常見細(xì)菌之一。隨著?-內(nèi)酰胺類維生素的普遍應(yīng)用，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)隨之增加，且引起的傳染和病死率有逐年增加的趨勢。MRSA可通過接觸途徑進(jìn)行傳播，即易感人群從攜帶者或傳染者身上獲得MRSA，導(dǎo)致傳播流行。人的大腸桿菌病的主要傳染源是因?yàn)樵谖改c道患者的糞便中有大量大腸桿菌病原菌排至體外構(gòu)成的。大腸埃希氏菌O157菌株

大腸桿菌在市場需求下被培養(yǎng)成一種醫(yī)藥菌種。狐糞青霉

    凍干粉菌種復(fù)蘇中注意事項(xiàng)：菌種活化前，如要長期保藏，可將凍干管放在-20度條件下保存。此凍干菌是經(jīng)凍干燥并抽真空保存的，開啟后必須一次使用完，不能剩菌粉下次使用。凍干管中大部分是用牛奶做保護(hù)劑，菌體為少數(shù)，復(fù)蘇時(shí)要全部菌懸液接種在新鮮培養(yǎng)基上，否則可能造成復(fù)蘇不成功。凍干粉是在凍干燥保存后處于休眠狀態(tài)，有時(shí)延滯期較長，如在說明書建議的培養(yǎng)時(shí)間還未長出，請繼續(xù)在相應(yīng)的環(huán)境下多培養(yǎng)24小時(shí)或更長時(shí)間，直至菌種培養(yǎng)出。正常情況下，菌種是需要培養(yǎng)2代后才會具備穩(wěn)定的活性，所以建議做2次繼代培養(yǎng)后才能用于您后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。打開凍干管應(yīng)在專業(yè)的微生物專業(yè)人員才可操作，注意生物危害程度為三級的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作。其中標(biāo)準(zhǔn)菌種可以在超凈臺中操作，并且做好個人防護(hù)。開管時(shí)要注意做好個人面部防護(hù)，防止碎片飛入眼中。以上開管操作都應(yīng)該在安全柜或超凈臺中操作，并且操作完后所有器皿都要經(jīng)滅菌后再銷毀。所有的菌種操作和轉(zhuǎn)移應(yīng)依「實(shí)驗(yàn)動物微生物學(xué)等級及監(jiān)測」規(guī)定訂定安全等級，履行生物安全防護(hù)責(zé)任及採取必要之措施；并遵守「病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例」。 狐糞青霉

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