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大腸埃希氏菌(Escherichiacoli)通常稱為大腸桿菌,約占腸道菌中的1%。是一種兩端鈍圓、能運(yùn)動(dòng)、無(wú)芽孢的革蘭氏陰性短桿菌。大腸桿菌在1885年由Escherich發(fā)現(xiàn),它分布在自然界,大多數(shù)不致病,主要附生在人或動(dòng)物的腸道里,為正常菌群。少數(shù)大腸桿菌具有毒性,可引起疾病。嬰兒出生后大腸桿菌即隨哺乳進(jìn)入腸道,其代謝活動(dòng)能抑制腸道內(nèi)分解蛋白質(zhì)的微生物生長(zhǎng),減少蛋白質(zhì)分解產(chǎn)物對(duì)人體的危害,還能合成維生素B和K,正常棲居條件下不致病,若進(jìn)入膽囊、膀胱等處可引起炎癥。若在水和食品中檢出大腸桿菌,可認(rèn)為是被糞便污染的指標(biāo)。因此大腸菌群數(shù)(或大腸菌值)常作為飲水、食物或藥物的衛(wèi)生學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。干酪乳桿菌 DN114 嗜酸乳桿菌 CL1285 干酪乳桿菌 LBC80R 鼠李糖乳桿菌 CLR2 乳雙歧桿菌 Bl-04 兩岐雙岐桿菌 W23 .蜜蜂類芽孢桿菌菌株
金黃色葡萄球菌免疫學(xué)檢測(cè)方法:分子生物學(xué)檢測(cè)方法:核酸探針技術(shù):通過(guò)使用基因特異性核苷酸序列作為探針與目的DNA雜交的一種核酸雜交技術(shù),通過(guò)檢測(cè)該段特異性的標(biāo)記物,從而判斷是否含有目標(biāo)微生物。核酸探針具有分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)的靈敏度高、特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),但是實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng),操作繁瑣,如果樣品中目標(biāo)微生物含量過(guò)低,極易造成樣品目標(biāo)微生物未檢出,出現(xiàn)假陰性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù):該技術(shù)基于DNA擴(kuò)增技術(shù),能夠在恒溫條件下,根據(jù)設(shè)計(jì)的多對(duì)引物,利用鏈置換型DNA聚合酶快速的進(jìn)行核酸的擴(kuò)增。與PCR方法比較,環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法操作更加快捷簡(jiǎn)單,花費(fèi)成本較低,且對(duì)儀器要求低,能夠普遍利用在食源性致病微生物的檢測(cè)中。Corynebacterium trachiae菌株金黃色葡萄球常見(jiàn)于人和動(dòng)物的皮膚及與外界相通的腔道中。
大腸桿菌檢測(cè)方法:ATP生物發(fā)光法:在近些年的發(fā)展過(guò)程中,生物發(fā)光技術(shù)應(yīng)用很廣,是一種比較快速的檢測(cè)微生物的技術(shù)。在活性細(xì)胞中,ATP是其常見(jiàn)的能量代謝產(chǎn),可以提供細(xì)胞生理活動(dòng)過(guò)程中所需的能量。并且,該技術(shù)可以在生物體內(nèi)可以在一定范圍內(nèi)保持一定的含量。食品中的大腸桿菌檢測(cè)技術(shù)可以采用熒光光度的方法,因?yàn)樯矬w發(fā)光的原因是有熒光素酶的作用,產(chǎn)生了發(fā)光的效果。該物質(zhì)來(lái)源于北美的螢火蟲(chóng)體內(nèi),可以催化熒光素的氧化作用,不過(guò),該物質(zhì)性質(zhì)不穩(wěn)定,可以對(duì)熒光進(jìn)行快速分解。另外,該檢測(cè)技術(shù)結(jié)果獲得過(guò)程是非??斓模⑶以撛O(shè)備攜帶方便,十分適用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。
除了基因工程之外,大腸桿菌作為模式生物在細(xì)菌生理及行為的研究上也有著不可代替的作用。實(shí)驗(yàn)室中至常用到的是大腸桿菌的K12品系,在1997年的時(shí)候,科學(xué)家們就已經(jīng)完成了對(duì)K12品系的全基因組測(cè)序。這一品系與正常的野生型大腸桿菌品系相比,已經(jīng)失去了在腸道中生存的能力,但是卻十分適合進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室研究及實(shí)驗(yàn)室環(huán)境繁殖。至經(jīng)典的是美國(guó)科學(xué)家JoshuaLederberg和EdwardTatum利用大腸桿菌K12,發(fā)現(xiàn)了細(xì)菌特有的接合現(xiàn)象。這有點(diǎn)類似于有性生殖生物中的性別,其中含有F因子(一種可以表達(dá)性菌毛的質(zhì)粒)的可以類比為「雄性菌」,沒(méi)有F因子的可以類比為「雌性菌」。「雄性菌」可以通過(guò)其上的性菌毛與「雌性菌」發(fā)生短暫的接合作用,這一短暫的接合當(dāng)中,「雄性菌」會(huì)把這個(gè)F因子的質(zhì)粒復(fù)制并轉(zhuǎn)移給「雌性菌」,從而使之也變成「雄性菌」。這一現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)也為我們進(jìn)行不同菌種之間的遺傳物質(zhì)交流等分子生物學(xué)及微生物遺傳學(xué)的研究,提供了一個(gè)非常好的方法。金黃色葡萄球是革蘭氏陽(yáng)性菌表示,為一種常見(jiàn)的食源性致病微生物。
金黃色葡萄球特性:較初,金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素的敏感度在90%以上,從而大部分維生素在臨床上對(duì)金黃色葡萄球菌所引起的病癥起到了很好的救治作用l2J。但隨著維生素的大量使用,耐青霉素的金黃色葡萄球菌也隨之出現(xiàn),并且緊跟著也發(fā)現(xiàn)了耐其他維生素的金黃色葡萄球菌,如四環(huán)素、紅霉素等。所以很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi),救治耐藥性金黃色葡萄球菌傳染沒(méi)有達(dá)到預(yù)期的效果。微生物抗藥性突變是DNA分子的某一特定位置的結(jié)構(gòu)改變的結(jié)果,與藥物的存在無(wú)關(guān),某種藥物的存在只是作為分離某種抗藥性菌株的一種手段。銅綠假單胞菌在暗視野顯微鏡或相差顯微鏡下觀察可見(jiàn)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)活潑。Corynebacterium trachiae菌株
大腸桿菌的質(zhì)量必須符合設(shè)計(jì)要求或合同要求,并有出廠檢驗(yàn)報(bào)告。蜜蜂類芽孢桿菌菌株
銅綠假單胞桿菌凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO)對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。離心問(wèn)題目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),然后過(guò)段時(shí)間之后再進(jìn)行換液。在土壤濕度15-30%時(shí),銅綠假單胞菌可生長(zhǎng)繁殖。蜜蜂類芽孢桿菌菌株
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