大腸桿菌是種什么樣的存在?大腸桿菌是一種很常見的細(xì)菌,革蘭氏陰性,有鞭毛,能一運動,能耐受一定濃度的膽鹽,菌體抗原能產(chǎn)生很好的保護(hù)性抗體,能在普通培養(yǎng)基中培養(yǎng),對營養(yǎng)要求不苛刻,分離培養(yǎng)可用選擇性培養(yǎng)基(EC培養(yǎng)基,伊紅美蘭培養(yǎng)基,麥康凱培養(yǎng)基等)。大多數(shù)大腸桿菌種類是非致病性的,少數(shù)種肉可引起人或動物腸道染上或菌毒血癥,愈后良好。在病毒染上時非致病性大腸桿菌也可引起菌毒血癥,是病毒病繼發(fā)細(xì)菌染上的一種主要細(xì)菌。在溫度較低的糞便中存活更久。膽鹽、煌綠等對大腸桿菌有抑制作用。魯氏淀粉霉
根據(jù)大腸桿菌在染上過程中能否產(chǎn)生腸毒的能力,可將大腸桿菌分為兩大類:即產(chǎn)腸有毒的大腸桿菌和非產(chǎn)腸有毒的大腸桿菌。產(chǎn)腸有毒的大腸桿菌是人和多種動物的任何染上性腹瀉的重要病原,鑒定產(chǎn)腸有毒的大腸桿菌主要是測定所分離大腸桿菌分泌的腸毒的類型。除此之外,也可以根據(jù)大腸桿菌產(chǎn)生腸毒的能力,結(jié)合其對不同腸毒的敏感性,而將大腸桿菌分型,稱為腸毒型。產(chǎn)腸毒的大腸桿菌進(jìn)入機(jī)體后,定植在小腸上皮細(xì)胞的表面,不損傷小腸上皮細(xì)胞也不侵入粘膜,而是通過產(chǎn)生的腸毒而引起腹瀉。大腸桿菌有不耐熱的腸毒和耐熱的腸毒兩種,均由質(zhì)粒編碼。根據(jù)所產(chǎn)生的大腸桿菌腸毒類型,可將產(chǎn)腸有毒的大腸桿菌細(xì)分為LT株、ST株(只產(chǎn)生一種,LT或ST)及LT/ST株(能產(chǎn)生兩種腸毒)。佐氏紅球菌菌種銅綠假單胞菌的O抗原包含外膜蛋白,為保護(hù)性抗原。
除了基因工程之外,大腸桿菌作為模式生物在細(xì)菌生理及行為的研究上也有著不可代替的作用。實驗室中至常用到的是大腸桿菌的K12品系,在1997年的時候,科學(xué)家們就已經(jīng)完成了對K12品系的全基因組測序。這一品系與正常的野生型大腸桿菌品系相比,已經(jīng)失去了在腸道中生存的能力,但是卻十分適合進(jìn)行實驗室研究及實驗室環(huán)境繁殖。至經(jīng)典的是美國科學(xué)家JoshuaLederberg和EdwardTatum利用大腸桿菌K12,發(fā)現(xiàn)了細(xì)菌特有的接合現(xiàn)象。這有點類似于有性生殖生物中的性別,其中含有F因子(一種可以表達(dá)性菌毛的質(zhì)粒)的可以類比為「雄性菌」,沒有F因子的可以類比為「雌性菌」。「雄性菌」可以通過其上的性菌毛與「雌性菌」發(fā)生短暫的接合作用,這一短暫的接合當(dāng)中,「雄性菌」會把這個F因子的質(zhì)粒復(fù)制并轉(zhuǎn)移給「雌性菌」,從而使之也變成「雄性菌」。這一現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)也為我們進(jìn)行不同菌種之間的遺傳物質(zhì)交流等分子生物學(xué)及微生物遺傳學(xué)的研究,提供了一個非常好的方法。
枯草芽孢桿菌的液態(tài)發(fā)酵是釆用現(xiàn)代發(fā)酵技術(shù),將目標(biāo)微生物菌種接種到生物反應(yīng)器中進(jìn)行通風(fēng)的深層液體培養(yǎng),其一般工藝流程為:菌種接種培養(yǎng)—種子罐培養(yǎng)—發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)—收集培養(yǎng)液后處理。由于發(fā)酵的基質(zhì)為液態(tài),發(fā)酵時菌體、底物及產(chǎn)物可達(dá)到一個均質(zhì)的狀態(tài),這對發(fā)酵過程中的檢測和控制都是十分有利的;隨著科研人員對生物反應(yīng)器的不斷改進(jìn),發(fā)酵過程中的無菌環(huán)境得以保證,使得產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定性很高;此外,液態(tài)發(fā)酵易擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模,生產(chǎn)過程中液體輸送方便,易于機(jī)械化操作,適合工業(yè)化生產(chǎn)的發(fā)酵工藝。銅綠假單胞菌菌種不能在4-10度條件下儲存,容易死亡。
大腸桿菌的耐藥機(jī)制:根據(jù)細(xì)菌耐藥性的起源,可將其分為兩類:一類為固有耐藥性(intrinsicresistance),即耐藥性的產(chǎn)生并不依賴于抑菌藥物的存在,而是細(xì)菌細(xì)胞所固有的,與細(xì)菌的遺傳和進(jìn)化密切相關(guān)。固有耐藥性是細(xì)菌穩(wěn)定的遺傳特性,它受細(xì)菌染色體DNA控制并且是同屬細(xì)菌的共同特征,固有耐藥性包括自發(fā)基因突變導(dǎo)致的耐藥性和細(xì)胞膜藥物外輸作用引起的耐藥性。另一類為獲得性耐藥性(acquiredresistance),是指細(xì)菌在抑菌藥物選擇性壓力存在下經(jīng)過基因突變?;蚣?xì)菌在生長過程中由于移動耐藥因子的轉(zhuǎn)移而獲得的一種表型。其中,移動因子包括質(zhì)粒、轉(zhuǎn)座子、整合子和噬菌體。獲得性耐藥性主要包括移動因子和抑菌藥壓力作用下引起基因突變所導(dǎo)致的耐藥性。金黃色葡萄球,編號為ATCC6538。羅伊氏乳桿菌
銅綠假單胞菌的菌體有時呈球桿狀或線狀,成對或短鏈狀排列。魯氏淀粉霉
保存條件斜面、穿刺菌和凍干粉可常溫運輸,但應(yīng)在4-10度長期保存。甘油菌可常溫運輸,但應(yīng)在-80度長期保存。微生物菌種應(yīng)保存于低溫、清潔和干燥的地方,室溫放置時間過長會導(dǎo)致菌種衰退。
凍干管的開啟方法:方法一:將凍干粉甩至底部圓球位置,然后用70%的酒精脫脂棉球擦凈凍干管,將凍干管的前列(注意不是圓球端)放在火焰上加熱。然后迅速滴幾滴無菌水至加熱處,此時凍干管的前列會自動破開。然后用鑷子輕輕敲下凍干管前列,并將凍干管開口處在火焰上加熱滅菌一下,并且保持下面的菌種菌種活化步驟在火焰旁操作。然后逐漸敲開凍干管,直至適當(dāng)位置。(敲開位置以可以很好注入無菌水以及吸取混勻后的液體為準(zhǔn))直接敲開法。方法二:首先將凍干粉甩至底部圓球位置,然后用70%的酒精脫脂棉球擦凈凍干管,將凍干管的前列(注意不是圓球端)放在火焰稍微加熱滅菌。然后直接用大鑷子敲打前列,敲開后將破口處在火焰上加熱滅菌一下,并且保持下面的菌種菌種活化步驟在火焰旁操作。然后逐漸敲開凍干管,直至適當(dāng)位置。(敲開位置以可以很好注入無菌水以及吸取混勻后的液體為準(zhǔn))。 魯氏淀粉霉
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