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甘油甘氨酸瓊脂基礎

來源: 發(fā)布時間:2023-03-27

氨基酸是細胞合成蛋白質的基本成分,氨基酸中有12種是細胞本身不合成的,必須由培養(yǎng)液提供。水解乳蛋白、膠原是另外兩種較好的天然培養(yǎng)基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解產物,呈蛋黃色粉末狀,富含氨基酸。一般配制成0.5%溶液,微酸性。膠原是從動物真皮中提取的,具改善細胞表面特性促使其附著生長的作用。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢,如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型,由于胞內滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。TYGPN培養(yǎng)基 乳糖蛋白胨半固體培養(yǎng)基 M63肉湯培養(yǎng)基基礎 M63瓊脂培養(yǎng)基基礎 LES遠藤氏瓊脂培養(yǎng)基。甘油甘氨酸瓊脂基礎

培養(yǎng)基

培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調pH至7.2-7.4,若pH值超過7.6或遠低于6.8,則大多數(shù)細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體,置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細胞種類、時間而定,一般用10—15%。由于血清成分復雜、條件不易控制,可選用無血清培養(yǎng)基。麥康凱肌醇阿東醇羧芐青霉素瓊脂(MIAC)基礎AB培養(yǎng)基基礎 地桿菌培養(yǎng)基基礎 硫還原泥土桿菌培養(yǎng)基基礎 固氮菌瓊脂(甘露醇) 固氮菌肉湯(甘露醇,葡萄糖)。

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營養(yǎng)培養(yǎng)基(nutrient media) 在基礎培養(yǎng)基中添加一些特殊的營養(yǎng)物質,如葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏、生長因子等,可供營養(yǎng)要求較高的細菌在其中生長。例如鏈球菌、肺炎鏈球菌等需在含血液或血清的培養(yǎng)基中生長;結核分枝桿菌的培養(yǎng)基中須添加雞蛋、馬鈴薯、甘油等。比較常用的營養(yǎng)培養(yǎng)基是血瓊脂平板。增菌培養(yǎng)基(enrichment media) 一般為液體培養(yǎng)基,用于細菌的增菌培養(yǎng),可泛用,也可專門用的,在專門用的增菌培養(yǎng)基中常含有目的菌生長所需要的特殊營養(yǎng)物質或生長因子。

近年來,國內外利用某些細菌特有的酶,選擇相應的作用底物,研制出某些細菌專門用的的顯色培養(yǎng)基,用于細菌的分離鑒別,收到了良好的效果,這種顯色培養(yǎng)基實際上也是鑒別培養(yǎng)基。其基本原理是將色原(或熒光原)與細菌作用底物的結合物加于培養(yǎng)基中,當細菌含有相應酶時,使該結合物分解而顯色(或顯示熒光)。如色原糖苷結合物在糖苷酶作用下分解,使糖苷與色原分離,并顯示顏色;熒光氨基酸結合物(不顯熒光)在氨基肽酶作用下,使氨基酸與熒光物質分離而顯示熒光。常用顯色的色原有α-萘酚、β-萘酚、鄰位硝基酚、對位硝基酚、對硝基苯胺、酚酞、2-氨基4-硝基苯等;常用的熒光物有4-甲基傘形酮(又稱7-羥基4-甲基香豆素)等。目前,顯色培養(yǎng)基已用于多種細菌的分離鑒別培養(yǎng),如沙門菌、大腸埃希菌、李斯特菌、雙歧桿菌和乳酸桿菌、白色念珠菌等顯色培養(yǎng)基。PBS-Tween20洗液 卵磷脂多價胨稀釋液基礎 30%葡萄糖溶液(pH6.5±0.5) 1.5%蛋白胨水。

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細胞培養(yǎng)液(liquid of culture cellulae) 是指用于各種目的的體外培養(yǎng)、保存、運輸活組織及細胞的液體,實質為人工模擬體內生長的營養(yǎng)環(huán)境,使細胞在此環(huán)境中有生長和繁殖的能力。由于其成分數(shù)量明確并可通過調節(jié)某一種成分來觀察被研究對象的各種生物學改變,被廣泛應用于細胞生物學科的研究。細胞培養(yǎng)液的組成成分主要有水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機離子、生長因子等,這些成分必須通過嚴格挑選,嚴格測試后方可使用,所用的水必須達到2級試驗用水(CB/T 6682-1992),所用的器皿必須清潔無污并進行高壓滅菌或干烤去熱源處理。橄欖油培養(yǎng)基基礎 察氏酵母膏瓊脂(CYA) 25%甘油硝酸鹽瓊脂基礎(G25N) 馬鈴薯瓊脂/無糖馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基.改良M17培養(yǎng)基

李氏瓊脂 Herrold’s 卵黃瓊脂基礎 指示選指示選擇性培養(yǎng)基基礎 肝浸液肉湯 肝浸液瓊脂 胰膘肉湯 胰膘瓊脂。甘油甘氨酸瓊脂基礎

還有一些鑒別性培養(yǎng)基,是利用細菌特有的各種酶系統(tǒng),能分解利用各種特定的糖、醇、氨基酸或其他基質而產酸、產氣、產堿或產生其他可見物質,依此進行細菌的鑒別,例如常用的生化培養(yǎng)基。用于細菌生化特性試驗的培養(yǎng)基特點是在無糖的基礎培養(yǎng)基中加人某種特定的基質,并加人指示劑,細菌在此類培養(yǎng)基中的一系列生化反應結果,均通過指示劑顯示出來。此類培養(yǎng)基為生化反應鑒別培養(yǎng)基。根據(jù)用量又可分為常量生化培養(yǎng)基和微量生化培養(yǎng)基。值得注意的是生化試驗培養(yǎng)基的某些成分受高溫、pH等諸多因素的影響,在配制和使用時,應根據(jù)實際情況嚴格掌握,防止有效成分被破壞,以保障其使用效果。甘油甘氨酸瓊脂基礎

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