培養(yǎng)基按成分分類有哪些?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,根據(jù)培養(yǎng)基的組成成分,可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩大類。天然培養(yǎng)基(native medium) 含有不完全明了化學(xué)成分的天然物質(zhì)。如蛋白胨、牛肉膏(粉)、肉浸液、玉米漿、血液、馬鈴薯等。用此類材料配成的培養(yǎng)基很難做到不同批號之間質(zhì)量的穩(wěn)定一致,因此在選用原料時務(wù)必注明其商品名稱、生產(chǎn)廠家及批號,對不同來源的原料應(yīng)先做小樣試驗。此種培養(yǎng)基成本較低,細(xì)菌繁殖較好,一般細(xì)菌培養(yǎng)以選用天然培養(yǎng)基為主。培養(yǎng)基類型和配方可以根據(jù)需要進(jìn)行定制,以滿足特定的實驗需求。1/2MS培養(yǎng)基
培養(yǎng)基中谷氨酰胺作用及使用方法?幾乎所有的細(xì)胞對谷氨酰胺有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時,細(xì)胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20℃ 冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基 4℃冰箱儲存兩周以上時,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽,是一個L-谷氨酰胺的衍生物,其不穩(wěn)定的 alpha-氨基用L-丙氨酸來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有較小的降解,如果在相同條件下,L-谷氨酰胺幾乎完全降解。霍格蘭氏營養(yǎng)液為了避免細(xì)胞爆破釋放DNA和蛋白質(zhì),培養(yǎng)基中常常添加DNA酶和蛋白酶等酶類。
培養(yǎng)基的分類有幾種呢?按培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學(xué)成分區(qū)分:1.天然培養(yǎng)基,天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。2.組合培養(yǎng)基,合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計而配制的培養(yǎng)基。例如。高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。3.半組合培養(yǎng)基 ,指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。
以MS培養(yǎng)基母液為基礎(chǔ),向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養(yǎng)基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。需要控制pH值、溫度、氣氛等因素,以保證培養(yǎng)基的穩(wěn)定性。
1951年厄爾開發(fā)了供動物細(xì)胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當(dāng)多。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對實驗條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復(fù)雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對細(xì)胞生長很有效,但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質(zhì)量的動物血清來源有限,成本高,限制了它的大量使用。無血清培養(yǎng)基不加動物血清,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長有效因子等。液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固態(tài)培養(yǎng)基是常用的培養(yǎng)基種類。M4培養(yǎng)基
某些培養(yǎng)基會在特定環(huán)境下產(chǎn)生特定的表型變化,例如MacConkey培養(yǎng)基生成紅色菌落表示腸道桿菌的存在。1/2MS培養(yǎng)基
bFGF是一個肝素結(jié)合的多膚類絲裂源,普遍分布于各種組織中。bFGF 是一種重要的細(xì)胞增殖分化調(diào)節(jié)劑,可刺激多種細(xì)胞的增殖。有研究發(fā)現(xiàn)它對滋養(yǎng)細(xì)胞也有促增殖作用。bFGF 主要是與細(xì)胞膜上FGF受體結(jié)合發(fā)揮作用,刺激與增殖有關(guān)的基因表達(dá)。Thomson 等認(rèn)為,像其他體外培養(yǎng)的人體細(xì)胞一樣,hES 細(xì)胞要求 bFGF 的存在以促進(jìn)增殖。同理EGF(上皮生長因子) , 是人體內(nèi)的一種活性物質(zhì),由53個氨基組成的活細(xì)胞,藉由刺激表皮細(xì)胞生長因子受體之酪氨酸磷酸化,達(dá)到修補增生肌膚表層細(xì)胞,據(jù)說對受傷、受損之表皮肌膚擁有很好的療效,其較大特點是能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖分化。所以加入它們都是促進(jìn)細(xì)胞增殖的。1/2MS培養(yǎng)基
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