半固體培養(yǎng)基(half-solid medium) 在液體培養(yǎng)基中加人0.2%~0.5%的瓊脂粉,加熱溶解后冷卻即成,以倒置不流動的較軟狀態(tài)為宜,一般供細(xì)菌動力試驗、菌種傳代、保存和儲運標(biāo)本之用。固體培養(yǎng)基(solid medium) 培養(yǎng)基中含有足量的凝固劑(瓊脂粉>0.5%),在常溫下能保持固體狀態(tài)。此類培養(yǎng)基大都用于微生物的分離、純化、藥敏試驗及菌苗制造。如營養(yǎng)瓊脂、營養(yǎng)斜面、SS瓊脂、TCBS瓊脂等。此外,還有一些特殊用途的培養(yǎng)基,如用血清或雞蛋做凝固劑配成的呂氏血清斜面培養(yǎng)基、雞蛋斜面培養(yǎng)基等。黃色布氏菌芽孢桿菌常用的培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基。MIO培養(yǎng)基
以MS培養(yǎng)基母液為基礎(chǔ),向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養(yǎng)基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng)液 國家消毒技術(shù)規(guī)范需要控制pH值、溫度、氣氛等因素,以保證培養(yǎng)基的穩(wěn)定性。
半組合培養(yǎng)基:指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如,馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基:1.液體培養(yǎng)基:80%~90%是水,其中配有可溶性的或不溶性的營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。2.固體培養(yǎng)基:一類配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)。根據(jù)性質(zhì)又分為固化培養(yǎng)基、非可逆性固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基、濾膜。3.半固體培養(yǎng)基:指在液體培養(yǎng)基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。4.脫水培養(yǎng)基:又稱預(yù)制干燥培養(yǎng)基,指含有除水分外的一切成分的商品培養(yǎng)基。
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞培養(yǎng)基是不可或缺的,細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時需要加入血清,以維持細(xì)胞的生長和存活。而除了血清之外,部分細(xì)胞在培養(yǎng)過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分來維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇,不同細(xì)胞加入量會有差異,需根據(jù)細(xì)胞類型判斷。培養(yǎng)基根據(jù)功能分為選擇性培養(yǎng)基、區(qū)分性培養(yǎng)基、富集培養(yǎng)基等。
天然培養(yǎng)基是指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、、雞胚浸出液等。組織培養(yǎng)技術(shù)建立早期,體外培養(yǎng)細(xì)胞都是利用天然培養(yǎng)基。但是由于天然培養(yǎng)基制作過程復(fù)雜、批間差異大,因此逐漸為合成培養(yǎng)基所替代。普遍使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。血清質(zhì)量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應(yīng)健康無病并且在指定的出生天數(shù)之內(nèi),取材過程應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量鑒定。液體培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于微生物菌株的生長、染色及細(xì)胞背景下的細(xì)胞培養(yǎng)等方面。乳糖肉湯
在實際應(yīng)用過程中,常常需要調(diào)整培養(yǎng)基的組成和配方,以優(yōu)化細(xì)胞或微生物的生長和功能表現(xiàn)。MIO培養(yǎng)基
選擇性培養(yǎng)基(selective media) 選擇性培養(yǎng)基含有營養(yǎng)物(增菌劑)和抑菌劑(選擇劑),標(biāo)本接種于此類培養(yǎng)基后,由于抑菌劑的選擇性抑制作用,使非目的菌受到不同程度的抑制,更有利于目的菌的增殖或分離。利用選擇性培養(yǎng)基經(jīng)過一定時間的增菌培養(yǎng),再接種于選擇性鑒別培養(yǎng)基,可以提高目的菌的陽性檢出率。抑菌劑的種類很多,常用的有孔雀綠、燦爛綠、亞硒酸鈉、去氧膽酸鈉、膽鹽、四硫磺酸鈉等。抑菌劑的加入量要適宜、準(zhǔn)確,有的劇毒,有的不耐高熱,配制時須特別注意。MIO培養(yǎng)基
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