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pH7.8磷酸鹽緩沖液

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-05-22

在培養(yǎng)基中加入 HEPES 有何好處?培養(yǎng)基中常用的緩沖體系是碳酸氫鹽,它可提供營(yíng)養(yǎng),但卻在生理 pH 條件下會(huì)降低緩沖能力。而HEPES 是一種很強(qiáng)的緩沖劑,能使細(xì)胞培養(yǎng)基在 pH7.2-7.6 條件下緩沖能力增強(qiáng)。HEPES溶液:是一種弱酸,中文名字是羥乙基哌秦乙硫磺酸,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動(dòng)。在開(kāi)放式培養(yǎng)條件下,觀察細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)基脫離了 5%CO2 的環(huán)境,CO2 氣體迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此時(shí)可以維持 pH7.0 左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)要添加HEPES。神經(jīng)細(xì)胞原代培養(yǎng)的過(guò)程中能用到。培養(yǎng)基根據(jù)其組成、用途、酸堿度等不同因素分類(lèi),如營(yíng)養(yǎng)瓊脂、LB培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基等。pH7.8磷酸鹽緩沖液

培養(yǎng)基

還有一些鑒別性培養(yǎng)基,是利用細(xì)菌特有的各種酶系統(tǒng),能分解利用各種特定的糖、醇、氨基酸或其他基質(zhì)而產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、產(chǎn)堿或產(chǎn)生其他可見(jiàn)物質(zhì),依此進(jìn)行細(xì)菌的鑒別,例如常用的生化培養(yǎng)基。用于細(xì)菌生化特性試驗(yàn)的培養(yǎng)基特點(diǎn)是在無(wú)糖的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加人某種特定的基質(zhì),并加人指示劑,細(xì)菌在此類(lèi)培養(yǎng)基中的一系列生化反應(yīng)結(jié)果,均通過(guò)指示劑顯示出來(lái)。此類(lèi)培養(yǎng)基為生化反應(yīng)鑒別培養(yǎng)基。根據(jù)用量又可分為常量生化培養(yǎng)基和微量生化培養(yǎng)基。值得注意的是生化試驗(yàn)培養(yǎng)基的某些成分受高溫、pH等諸多因素的影響,在配制和使用時(shí),應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況嚴(yán)格掌握,防止有效成分被破壞,以保障其使用效果。放線菌酮溶液培養(yǎng)基類(lèi)型和配方可以根據(jù)需要進(jìn)行定制,以滿足特定的實(shí)驗(yàn)需求。

pH7.8磷酸鹽緩沖液,培養(yǎng)基

培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2-7.4,若pH值超過(guò)7.6或遠(yuǎn)低于6.8,則大多數(shù)細(xì)胞不能生長(zhǎng)。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過(guò)處理。培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無(wú)菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體,置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類(lèi)、時(shí)間而定,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制,可選用無(wú)血清培養(yǎng)基。

以MS培養(yǎng)基母液為基礎(chǔ),向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養(yǎng)基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實(shí)際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)通常還需要添加藥物,以防止細(xì)菌污染。

pH7.8磷酸鹽緩沖液,培養(yǎng)基

選擇性培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。其功能是使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌,從而提高該菌的篩選效率。酵母菌富集培養(yǎng)基:葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化銨0.1%,磷酸二氫鉀0.25%,磷酸氫二鈉0.05%,七水合硫酸鎂0.1%,七水合硫酸鐵0.01%,酵母膏0.05%,孟加拉紅0.003%,pH4.5。富集好氧自生固氮菌:甘露醇1%,磷酸二氫鉀0.02%,七水合硫酸鎂0.02%,氯化鈉0.02%,二水合硫酸鈣0.01%,碳酸鈣0.5%液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固態(tài)培養(yǎng)基是常用的培養(yǎng)基種類(lèi)。放線菌酮溶液

培養(yǎng)基制備的質(zhì)量和配方對(duì)于細(xì)胞和微生物的生長(zhǎng)、分化和培養(yǎng)效果具有至關(guān)重要的作用。pH7.8磷酸鹽緩沖液

1951年厄爾開(kāi)發(fā)了供動(dòng)物細(xì)胞體外生長(zhǎng)的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類(lèi)相當(dāng)多。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無(wú)法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動(dòng)物血清成分復(fù)雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)很有效,但后期對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測(cè)造會(huì)成一定困難。另外高質(zhì)量的動(dòng)物血清來(lái)源有限,成本高,限制了它的大量使用。無(wú)血清培養(yǎng)基不加動(dòng)物血清,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長(zhǎng)有效因子等。pH7.8磷酸鹽緩沖液

上海瑞楚生物科技有限公司成立于2012-11-29,同時(shí)啟動(dòng)了以瑞楚生物為主的培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶產(chǎn)業(yè)布局。瑞楚生物經(jīng)營(yíng)業(yè)績(jī)遍布國(guó)內(nèi)諸多地區(qū)地區(qū),業(yè)務(wù)布局涵蓋培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶等板塊。同時(shí),企業(yè)針對(duì)用戶,在培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶等幾大領(lǐng)域,提供更多、更豐富的化工產(chǎn)品,進(jìn)一步為全國(guó)更多單位和企業(yè)提供更具針對(duì)性的化工服務(wù)。上海瑞楚生物科技有限公司業(yè)務(wù)范圍涉及從事生物科技、農(nóng)業(yè)科技、環(huán)??萍碱I(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)服務(wù),化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物品、易制毒化學(xué)品),日用百貨,金屬制品,塑料制品,儀器儀表,實(shí)驗(yàn)室設(shè)備(除醫(yī)療器械)銷(xiāo)售,會(huì)務(wù)服務(wù),從事貨物及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù)等。等多個(gè)環(huán)節(jié),在國(guó)內(nèi)化工行業(yè)擁有綜合優(yōu)勢(shì)。在培養(yǎng)基,菌種,標(biāo)準(zhǔn)品,酶等領(lǐng)域完成了眾多可靠項(xiàng)目。