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堿性蛋白胨水(APW)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-11-29

如何有效避免培養(yǎng)基污染?做好實(shí)驗(yàn)操作規(guī)則:在實(shí)驗(yàn)中制定好統(tǒng)一意識(shí)的操作規(guī)則至關(guān)重要。例如,制定有關(guān)實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)中洗手、換鞋、穿戴實(shí)驗(yàn)服的規(guī)定。還要保證操作的環(huán)境衛(wèi)生、實(shí)驗(yàn)材料消毒等等。這樣可以降低實(shí)驗(yàn)環(huán)境中的細(xì)菌來源,保證實(shí)驗(yàn)材料的純度,同時(shí)也可以提高操作人員的自覺性和流程規(guī)范性,然后避免因人為原因而產(chǎn)生的污染。做好培養(yǎng)基制作:在培養(yǎng)基的制作過程中,一些常見的問題往往會(huì)導(dǎo)致污染,例如:不干凈的試管,不潔凈的機(jī)器設(shè)備,不正確的過濾操作和培養(yǎng)基儲(chǔ)存不當(dāng)?shù)?。為了避免這些問題,實(shí)驗(yàn)室人員應(yīng)該采用高標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)原料,在制作培養(yǎng)基前徹底清洗操作區(qū),并使用無菌試管及機(jī)器設(shè)備,千萬不要盲目省事不進(jìn)行適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)準(zhǔn)備和操作過程。液體培養(yǎng)基的質(zhì)量可以通過酚紅試紙測(cè)試進(jìn)行檢測(cè),從而確定其pH值和酸堿度是否適當(dāng)。堿性蛋白胨水(APW)

培養(yǎng)基

基礎(chǔ)培養(yǎng)基:含有基礎(chǔ)生長所需的基本營養(yǎng)成分,較常用的是肉浸液,俗稱肉湯,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨?;A(chǔ)培養(yǎng)基普遍用于細(xì)菌的增菌、檢驗(yàn),也是制備其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。營養(yǎng)培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中可加入葡萄糖、血液、生長因子等特殊成分,供營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌和需要特殊生長因子的細(xì)菌生長。較常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基,除含營養(yǎng)成分外,還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢(shì),如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對(duì)細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。雙歧桿菌活化培養(yǎng)基使用液體培養(yǎng)基時(shí),需要正確計(jì)量添加適量的生理鹽水、葡萄糖和其他化學(xué)試劑。

堿性蛋白胨水(APW),培養(yǎng)基

干粉培養(yǎng)基的組成:干粉培養(yǎng)基通常由基礎(chǔ)草料、營養(yǎng)(或培養(yǎng))成分、緩沖劑、指示劑、氨基酸、維生素和其他有機(jī)化合物等組成。具體成分的選擇和比例取決于所需培養(yǎng)的微生物類型和生長條件?;A(chǔ)草料通常由各種蛋白質(zhì)來源(如動(dòng)物肌肉、黃豆、酵母等)組成,提供微生物生長所需的碳、氮、磷、硫、鎂、鐵等元素。營養(yǎng)(或培養(yǎng))成分則包括轉(zhuǎn)化碳源、氮源、磷酸鹽、微量元素等,是培養(yǎng)基的主要能量源和合成原料。緩沖劑用于維持培養(yǎng)基的 pH 值穩(wěn)定,適當(dāng)?shù)?pH 值對(duì)于微生物生長和代謝至關(guān)重要。指示劑常用于檢測(cè)微生物在培養(yǎng)基中的生長和代謝情況,如酚紅、溴藍(lán)、氧化亞鐵等。氨基酸和維生素等是微生物在生長過程中所需的營養(yǎng)物質(zhì),能夠促進(jìn)微生物的代謝和生長。

干粉培養(yǎng)基是一種經(jīng)常被使用的培養(yǎng)基,由于其易于儲(chǔ)存和攜帶,也經(jīng)常被用于實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)操作中。在使用干粉培養(yǎng)基時(shí),人們經(jīng)常會(huì)問到一個(gè)問題,那就是干粉培養(yǎng)基可以重復(fù)使用嗎?首先,需要明確的是干粉培養(yǎng)基是指培養(yǎng)基由干燥制成的粉末,而并不是指培養(yǎng)基的原液。在細(xì)菌或其他微生物培養(yǎng)中,常用的是制成干粉之后需要通過加水或其他液體來重建成液態(tài)培養(yǎng)基的干粉培養(yǎng)基。因此,干粉培養(yǎng)基在制備時(shí)需要嚴(yán)格的操作和儲(chǔ)存規(guī)范,以保證其質(zhì)量和可重復(fù)使用性。而對(duì)于是否可以重復(fù)使用,需要依據(jù)實(shí)驗(yàn)室的具體情況來考慮。如果干粉培養(yǎng)基使用過程中與周圍環(huán)境接觸,或者在制備時(shí)不符合儲(chǔ)存要求,那么干粉培養(yǎng)基的質(zhì)量就無法得到保障。這時(shí)候,即便再次使用干粉培養(yǎng)基,也無法保證其質(zhì)量和培養(yǎng)結(jié)果的可靠性。如果細(xì)菌的生長受到限制,可以嘗試調(diào)整培養(yǎng)基的成分或添加輔助物質(zhì),例如控制培養(yǎng)基中氧氣的含量。

堿性蛋白胨水(APW),培養(yǎng)基

預(yù)裝培養(yǎng)基的有效期是指由于技術(shù)和保質(zhì)問題而限定的使用時(shí)限。雖然預(yù)裝培養(yǎng)基在生產(chǎn)過程中基本上是消毒處理的,但是在使用過程中,仍然會(huì)存在著微生物和其他污染因素對(duì)培養(yǎng)基的影響。因此,即使保質(zhì)期未過,在使用之前也應(yīng)檢查其質(zhì)量,并確保其適用于實(shí)驗(yàn)的要求。一般情況下,市售的預(yù)裝培養(yǎng)基的保質(zhì)期通常為6-12個(gè)月,但是這只是一個(gè)約定值,并不是通用值。在制造過程中,每個(gè)廠家都會(huì)考慮到不同的因素,如培養(yǎng)基成分、凝膠結(jié)構(gòu)、包裝方式和儲(chǔ)存條件等,保質(zhì)期因此也不一樣。因此,在購買預(yù)裝培養(yǎng)基時(shí),我們應(yīng)該認(rèn)真查看其保質(zhì)期,以便判斷其可行性。酵母培養(yǎng)基通常包含酵母營養(yǎng)素、碳水化合物和氮源。氧化亞鐵硫桿菌培養(yǎng)基

液體培養(yǎng)基的配方和制備方法不同于干粉培養(yǎng)基,需要在滿足衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)和生物安全操作指南的情況下進(jìn)行。堿性蛋白胨水(APW)

干粉培養(yǎng)基是指干燥形態(tài)的培養(yǎng)基,通常需要加入適量的水或其他溶液以制成使用液體。干粉培養(yǎng)基通常包括可溶性和不溶性成分兩種。其中可溶性成分為微生物和細(xì)菌等生物的生長提供必要的營養(yǎng),而不溶性成分則為細(xì)胞提供支撐和保護(hù)作用。常見的干粉培養(yǎng)基包括TrypticSoyBroth(TSB)培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基、NutrientBroth(NB)培養(yǎng)基等。這些培養(yǎng)基通常需要在pH7.0-7.4之間保持穩(wěn)定的酸堿度,并在適宜的溫度和濕度下保存以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量。液體培養(yǎng)基通常是以水為基礎(chǔ)配制而成的,或加入適量的薄荷醇等物質(zhì)以調(diào)節(jié)酸堿度和滲透壓等。與干粉培養(yǎng)基不同的是,液體培養(yǎng)基通常較少使用不溶性物質(zhì),而是依賴于水的流動(dòng)性和原生質(zhì)體膜的穩(wěn)定性。液體培養(yǎng)基制備起來相對(duì)容易,且通常不需要使用過多的手段和工具即可獲得較好的培養(yǎng)基。常見的液體培養(yǎng)基包括TSB液體培養(yǎng)基、LB液體培養(yǎng)基、Hanks培養(yǎng)基等。堿性蛋白胨水(APW)